T-CROPSSC 012-2025 水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定技术规程

团体标准T/CROPSSC012—2025白叶枯病抗性鉴定技术规程Technicalcodeofpracticeforidentifyingbacterialleafblightresistanceinricevarieties（lines）2025-11-12发布2025-11-12实施中国作物学会发布ⅠT/CROPSSC012—2025前言 Ⅲ 2规范性引用文件 3术语和定义 4田间管理 4.1鉴定圃选择 4.2种植管理 4.3保护行 4.4鉴别品种设置 5接种与调查 5.1菌株准备 5.2接种时期 5.3接种方法 5.4菌株有效性检验 5.5调查时期 5.6病情调查 6评价方法与后续处理 6.1病害发生等级标准 6.2抗病性评价方法 6.3接种有效性判断 6.4汇总报告 6.5菌株和接种材料处理 附录A（资料性）水稻白叶枯病 附录B（资料性）牛肉胨培养基配制方法 附录C（规范性）水稻白叶枯病接种调查记录表 附录D（规范性）农事操作记录 附录E（规范性）水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定汇总 ⅢT/CROPSSC012—2025本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国作物学会提出并归口。本文件起草单位：中国农业科学院作物科学研究所、广东省农业科学院水稻研究所、上海交通大学、湖南省植物保护研究所、安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所。1T/CROPSSC012—2025水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定技术规程本文件规定了水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定的术语和定义、田间管理、接种与调查、评价方法与后续处理的要求。本文件适用于水稻种质资源、品系、品种等的白叶枯病抗性的鉴定、评价和监测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB34/T2810水稻白叶枯病抗病性鉴定技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。水稻白叶枯病ricebacterialleafblight由稻黄单胞菌水稻致病变种（Xanthomonasoryzaepv.oryzae，Xoo）引起的水稻病害。对照品种controlvariety本文件中特指为检验试验的可靠性，在抗性鉴定时附加的表现为已知抗病品种或感病品种。试验品种testingvariety进行抗病鉴定测试的水稻品种。优势致病型predominantpathotype在一定时间和区域内具有显著致病能力和竞争优势的病原菌类群。病情指数diseaseindex一种评价植物病害发生程度的综合性指标，由病害发生严重程度的级别、对应级别的发病样本数和调查的总样本数计算得出。抗病性diseaseresistance寄主植物所具有的能够减轻或抵抗病原物致病作用的可遗传的性状。2T/CROPSSC012—20254田间管理4.1鉴定圃选择选择在水稻白叶枯病常发区域的代表性田块设置鉴定圃，要求气候湿润、土壤肥沃、肥力均匀，且具有良好的灌溉条件。水稻白叶枯病见附录A。4.2种植管理试验品种随机编号后，结合当地农情适时开展育秧与移栽工作。移栽时，每个品种按顺序栽插2行，每行10穴，每穴2株，株行距为17cm×23cm，每隔10个试验品种两侧各栽插抗感病对照品种（图1鉴定圃的氮肥水平应高于一般大田，注意及时防治纹枯病和虫害等，全生育期不使用防治细菌病害的农药。图1鉴定圃布局图（局部）4.3保护行在鉴定圃周围种植3行~5行当地感病品种作为保护行，株行距与试验品种相同。4.4鉴别品种设置在同一病圃同时移栽鉴别品种并接种。采用IR24和金刚30作为感病对照品种；同时，根据当地Xoo小种的分化情况，可适当加入其他相关的抗白叶枯病品种作为抗病对照，如IRBB7、IRBB5等，以加强对测试菌株毒性的毒力评价。5接种与调查5.1菌株准备选用若干经过监测鉴定的优势致病型代表菌株作为测试菌株。将新鲜活化的测试菌株接种于牛肉胨液体培养基中，28℃振荡培养36h后，以2000r/min的转速离心收集菌体，加入适量灭菌水配制成吸光值OD600=1.0的悬浮液，建议每个品种配制10mL，现配现用。牛肉胨培养基配制方法见附录B。5.2接种时期在水稻分蘖盛期至孕穗期进行剪叶接种，选择气温不高于33℃的条件进行操作。3T/CROPSSC012—20255.3接种方法按照DB34/T2810中的人工剪叶接种法，用手术剪刀蘸取菌液，剪去植株顶端健康、完全展开叶片的叶尖1cm~2cm，每穴接种3片~5片叶片，每个品种接种30片叶以上。5.4菌株有效性检验用优势致病型菌株接种感病对照品种，发病程度须达到对应表型病级，否则该菌株的测试结果无效。5.5调查时期接种后（早稻，15d；晚稻，17d田间调查并记录接种叶片的病斑长度。5.6病情调查每个品种共量取20片以上叶片的病斑长度，保留小数点后1位，结果记入附录C。6评价方法与后续处理6.1病害发生等级标准将水稻白叶枯病发生的等级划分为5个级别，病害发生等级标准如表1所示。表1水稻白叶枯病人工接种调查等级标准病害发生等级病斑长度0级病斑长度<2cm1级2cm≤病斑长度<5cm3级5cm≤病斑长度<10cm5级10cm≤病斑长度<15cm7级病斑长度≥15cm根据以下公式计算各测试品种的病情指数（DIDI……………（1）式中：DI——病情指数；Pi——各级发病叶片数；Di——各级代表值；P——调查总叶片数；DM——最高等级代表值。6.2抗病性评价方法按照表2的评价标准，确定水稻品种的抗性。4T/CROPSSC012—2025表2水稻白叶枯病抗性水平标准抗性水平评价标准DI=00<DI≤2525<DI≤5050<DI≤75DI>75注：DI为病情指数。6.3接种有效性判断如感病对照品种达到感（S）级别，本批次试验结果有效；否则，试验结果无效。6.4汇总报告6.4.1记录水稻白叶枯病抗性鉴定的农事操作基本情况，包括鉴定地点、鉴定单位、主要鉴定技术人员、水肥管理等基本信息，记录至附录D。6.4.2根据感病对照品种的鉴定结果阐明本批次水稻白叶枯病抗性鉴定结果的有效性，按照高抗、抗、中抗、中感和感5个抗性级别对参试水稻品种（系）的白叶枯病抗性做出定性评价，列出各鉴定品种的抗性表现，完成附录E。6.5菌株和接种材料处理接种剩余的菌株应进行灭菌处理，试验结束后，鉴定圃的病株应进行无害化处理。5T/CROPSSC012—2025（资料性）水稻白叶枯病水稻白叶枯病俗称“茅草瘟”“地火烧”“黄毛瘴”等，是一种危害水稻的细菌性病害。该病害主要在华东、华中、华南等稻区发生，一般沿海、沿湖、丘陵和低洼易涝地区发生较为频繁。籼稻发病情况重于粳稻和糯稻，双季晚稻发病情况重于双季早稻，单季中稻发病情况重于单季晚稻。病害一旦发生，一般可减产10%左右的产量，严重的可减产50%~60%，甚至绝收。水稻白叶枯病由稻黄单胞杆菌水稻致病变种（Xanthomonasoryzaepv.oryzae）引起。在琼脂培养基上，其菌落呈蜜黄色或淡黄色（图A.1表面隆起，光滑发亮，革兰氏染色呈阴性，病菌适宜的生长温度为26℃~30℃。白叶枯病的典型症状是叶枯型（图A.2一般在分蘖期后才较为明显。发病多从叶尖或叶缘开始，初现黄绿色或暗绿色水渍状病斑，后沿叶脉从叶缘或中脉迅速向两端扩展成条斑，可蔓延至叶片基部和整个叶片，病健交界线明显，呈波纹状（粳稻）或直线状（籼稻）。病斑黄色或略带红色，最后变为灰白色或黄白色，病部易见蜜黄色珠状菌脓。图A.1水稻白叶枯病菌菌落图A.2水稻白叶枯病田间自然发病症状6T/CROPSSC012—2025（资料性）牛肉胨培养基配制方法B.1培养基成分与配制氧化钠（NaOH）溶液调节pH值至7.0~7.2。B.2培养基的灭菌将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌，121℃灭菌30min，冷却后备用。7T/CROPSSC012—2025（规范性）水稻白叶枯病接种调查记录表水稻品种（系）田间人工接种后，调查记录见表C.1。表C.1水稻白叶枯病抗性鉴定调查记录表鉴定方法：人工剪叶接种鉴定地点：接种时间：调查时间：品种叶片病斑长度/cm病情指数（DI）抗性水平123456789品种品种…………抗病对照感病对照备注：1.接种菌株：来源：2.移栽日期：记录人：年月日复核人：年月日8T/CROPSSC012—2025（规范性）农事操作记录水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定的田间农事操作记录见表D.1。表D.1水稻品种（系）白叶枯病抗性鉴定农事操作基本情况记录表鉴定地点鉴定单位鉴定人经度纬度海拔地形农事操作记录施肥情况灌水排水情况杀菌剂使用情况杀虫剂使用情况除草剂使用情况特殊天气情况**特