《动物细胞融合技术与单克隆抗体》课件

二动物细胞融合技术与单克隆抗体第2章内容索引0102课前篇自主预习课堂篇探究学习素养目标课前篇自主预习一、动物细胞融合技术1.概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。

细胞膜的流动性2.诱导动物细胞融合的常用方法(1)物理法:电融合法等。(2)化学法:PEG融合法等。(3)生物法:灭活病毒诱导法等。

动物细胞工程特有3.意义:利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为制造单克隆抗体开辟了新途径。自我检测1.动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。判断下列有关动物细胞融合的表述是否正确。(1)动物细胞融合过程中既有细胞膜的融合,也有细胞核的融合。(

√

)(2)与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒。(

×

)(3)动物体细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。(

×

)(4)动物细胞融合与植物体细胞杂交都能突破有性杂交的局限,实现远缘杂交。(

×

)2.下列关于动物细胞融合技术的叙述,错误的是(

)A.细胞融合技术能应用于细胞遗传、细胞免疫等研究B.动物细胞成功融合是细胞膜具有流动性的有力证据C.动物细胞融合的基本原理与植物原生质体融合的不同D.除化学法和物理法,动物细胞融合还可用灭活病毒诱导答案

C解析

细胞融合技术是细胞遗传、细胞免疫等研究的重要技术支持;动物细胞融合证明了组成细胞膜的分子是运动的,说明细胞膜具有流动性;动物细胞融合与植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性;诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法,还可以用灭活的病毒诱导细胞融合。二、单克隆抗体及其应用1.传统抗体的制备(1)(2)缺点:产量低、纯度低、特异性差。2.单克隆抗体的制备(1)存在问题(2)解决思路:将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞。(3)制备过程

(4)单克隆抗体的特点:能准确识别抗原的细微差异,与特异抗原发生特异性结合,并可大量制备。(5)单克隆抗体的应用:被广泛用作诊断试剂,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。自我检测1.单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。判断下列有关单克隆抗体的表述是否正确。(1)单克隆抗体的制备可从未经免疫的小鼠体内提取B淋巴细胞。(

×

)(2)单克隆抗体制备过程中的两次筛选目的相同。(

×

)(3)用特定的抗原对小鼠进行免疫后,从小鼠脾脏中只能得到一种B淋巴细胞。(

×

)(4)单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体。(

×

)2.下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述,正确的是(

)A.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合,一般需要灭活的病毒或聚乙二醇诱导B.融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生单克隆抗体C.体外培养时,一个B淋巴细胞可以产生抗体,也能无限增殖D.单克隆抗体与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,可利用分子克隆技术大量制备答案

A解析

动物细胞的融合需要物理、化学或生物的方法来诱导才能实现,其中生物方法是利用灭活的病毒来诱导,化学方法是利用聚乙二醇作诱导剂,A项正确;第一次筛选出的融合细胞——杂交瘤细胞不一定能产生针对特定抗原的单克隆抗体,需要进行第二次筛选才能达到目的,B项错误;在体外培养条件下,一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的,C项错误;与一般的血清抗体相比,单克隆抗体最主要的优点在于其特异性强、灵敏度高,它可以利用杂交瘤细胞的克隆而实现大量制备,而非分子克隆,D项错误。课堂篇探究学习探究点一动物细胞融合[流程分析]结合下面动物细胞融合的过程,探究下列问题。

1.从融合的过程看,首先是A、B细胞膜融合,接着是

融合,最后完成

融合。

提示

细胞质细胞核2.细胞膜融合的过程体现出细胞膜具有

。

提示

一定的流动性3.融合后重组细胞的特点为融合形成的杂种细胞C具有两种细胞的

,通过动物细胞培养,杂种细胞C表现出两个亲本细胞的特点。

提示

遗传信息4.诱导动物细胞融合和诱导植物原生质体融合都可使用的方法有

。

提示

物理方法(电融合法等)和化学方法(PEG融合法等)5.若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞,在两细胞融合前需用酶解法去掉

,所用酶是

、

,杂交细胞C经培养形成的高度液泡化、无定形的薄壁细胞团称为

。

提示

细胞壁纤维素酶果胶酶愈伤组织[归纳提升]1.对动物细胞融合过程的理解(1)细胞融合的过程包括细胞膜的融合、细胞质融合和细胞核融合,其中细胞膜的融合是细胞融合的先导,在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性。(2)动物细胞融合完成的标志:来自不同细胞的两个或多个细胞核融合成一个细胞核。2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较

比较项目动物细胞融合(单克隆抗体制备)植物体细胞杂交(番茄—马铃薯植株)过程正常小鼠的处理(注射特定的抗原)原生质体的制备(酶解法)动物细胞融合原生质体的融合杂交瘤细胞的筛选和培养杂种细胞的筛选和培养提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)杂种植株鉴定原理细胞膜的流动性、细胞增殖细胞膜的流动性、植物细胞的全能性比较项目动物细胞融合(单克隆抗体制备)植物体细胞杂交(番茄—马铃薯植株)融合前处理注射特定抗原,免疫处理正常小鼠酶解法去除细胞壁:纤维素酶、果胶酶诱导方法(1)物理法:电融合法等(2)化学法:PEG融合法等(3)生物法:灭活病毒诱导法等(1)物理法:电融合法、离心法等(2)化学法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等意义和用途(1)制备单克隆抗体(2)有助于疾病的诊断、治疗、预防(1)克服不同物种间远缘杂交的障碍(2)培育作物新品种[探究应用]1.(多选)右图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是(

)A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去壁再诱导融合B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因答案

ABC解析

若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去细胞壁再诱导融合,A项正确;a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现,B项正确;c细胞的形成,依赖细胞膜的流动性,C项正确;c细胞中含有a、b两种细胞的遗传物质,但是基因是选择性表达的,因此,c细胞将选择性地表达a细胞和b细胞中的基因,D项错误。2.下列关于动物细胞融合的说法,错误的是(

)A.动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞C.细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能D.常用的诱导动物细胞融合的因素有:聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射等答案

D解析

动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,A项正确;动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞,B项正确;细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能,C项正确;常用于诱导动物细胞融合手段有:化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)、物理法(电激),紫外线照射不是诱导动物细胞融合的手段,D项错误。3.(辽宁葫芦岛高二月考)下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,描述正确的是(

)A.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同,诱导融合的方法也完全相同B.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物抗病毒C.动物细胞融合后,可以通过体外适宜条件培养获得新物种D.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基的物理性质不同答案

D解析

动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相似,诱导融合方法不完全相同;动物细胞培养可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性,茎尖组织培养可用于植物脱除病毒;动物细胞不能通过培养获得完整个体;动物细胞培养使用液体培养基,植物组织培养一般要用固体培养基。探究点二单克隆抗体及其应用[流程分析]下图表示制备抗X抗体的过程,①~⑥表示相关步骤。据图回答下列问题。1.由图可知,单克隆抗体制备过程运用了哪些主要的动物细胞工程技术手段?提示

动物细胞融合和动物细胞培养。2.经步骤④第一次筛选,被淘汰的细胞有哪些类型?提示

没有融合的单个细胞(骨髓瘤细胞、B淋巴细胞)和具有同种核的细胞(骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞、B淋巴细胞—B淋巴细胞)。3.在单克隆抗体的制备过程中,选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞具有的特点是

。

提示

既能迅速大量增殖,又能产生抗体4.请写出图中两次筛选的目的:

。

提示

第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞[归纳提升]1.单克隆抗体的制备流程2.两种抗体的比较

名

称产

生特

点血清抗体由浆细胞分泌一般从血清中分离,产量低、纯度低、特异性差单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌特异性强,灵敏度高,能大量制备3.三种细胞的比较

细胞类型来

源特

点浆细胞由B淋巴细胞受抗原刺激后增殖分化而来能产生单一抗体,但不能无限增殖骨髓瘤细胞从骨髓肿瘤中提取能无限增殖,但不能产生抗体杂交瘤细胞浆细胞与骨髓瘤细胞融合而成既能产生抗体,又能无限增殖4.单克隆抗体制备过程中两次筛选的区别

项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后会得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选:在该培养基上,未融合的亲本细胞和具有同种核的细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长用多孔板培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞[探究应用]1.为研制抗病毒A的单克隆抗体,某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。下列叙述错误的是(

)A.筛选2含多次筛选,基本原理与筛选1相同B.为了诱导小鼠甲产生特异性的B淋巴细胞,可以对其注射病毒AC.利用灭活的病毒或聚乙二醇等作介导,融合B淋巴细胞和骨髓瘤细胞D.为了克隆阳性杂交瘤细胞,可将其注射到小鼠腹腔内增殖并获得大量单克隆抗体答案

A解析

图中筛选1所采用的培养基属于选择培养基,从而筛选出由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞,图中筛选2含多次筛选得到的能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞,筛选所依据的基本原理是抗体—抗原特异性结合,两次筛选的原理不同;病毒相当于抗原,可激发机体的特异性免疫,为诱导小鼠甲产生特异性的B淋巴细胞,可以对其注射病毒A;诱导动物细胞融合的方法有物理方法、化学方法等,可利用灭活的病毒或聚乙二醇等作介导,融合B淋巴细胞和骨髓瘤细胞;为了克隆阳性杂交瘤细胞,可将其注射到小鼠腹腔内增殖并获得大量单克隆抗体,也可在体外培养,从培养液中获得。2.下列有关单克隆抗体的制备的叙述,正确的是(

)A.小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40,其B淋巴细胞的染色体数为40,融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80B.在单克隆抗体的制备过程中,只有一次筛选C.单克隆抗体的制备需要用到动物细胞培养、动物细胞融合和动物体细胞核移植等技术D.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型(若仅考虑两两融合的情况)答案

D解析

小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40,其B淋巴细胞的染色体数为40,融合后形成的杂交瘤细胞染色体数目为80,由于线粒体中也有DNA,所以DNA分子数目大于80,A项错误;在单克隆抗体的制备过程中,至少涉及两次筛选,B项错误;单克隆抗体的制备需要用到动物细胞培养、动物细胞融合等技术,C项错误;B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种两两融合的细胞类型,即杂交瘤细胞、B淋巴细胞—B淋巴细胞、骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞,D项正确。3.(山东青岛高二期中)抗体导向酶——前药疗法是近几年发展起来的一种极有前景的靶向治疗技术,该方法能特异性杀死癌细胞。已知丝裂霉素是一种抗肿瘤药,丝裂霉素(MMC)前药几乎无毒性,经碱性磷酸酶(AP)催化后,活化的MMC对细胞有毒性。该技术的核心步骤是将单克隆抗体与AP交联成抗体导向酶后注入癌症患者体内。下列叙述正确的是(

)A.应将MMC前药和抗体导向酶充分混合后,再注射到患者体内B.前药在人体内被激活,活化的MMC对细胞有毒性,产生较强的药物副作用C.该技术能提高化疗药物在肿瘤部位的靶向聚集,但无法减少化疗副作用D.可利用特定的前药分别与不同的单克隆抗体连接,制备一系列靶向性各异的单抗药物答案

D解析

根据题干信息,“丝裂霉素(MMC)前药几乎无毒性,经碱性磷酸酶(AP)催化后,活化的MMC对细胞有毒性”,因此应先向患者的体内注射MMC前药,再向患者注射抗体导向酶;依据抗体导向酶的抗体对抗原识别的特异性,将癌细胞部位的丝裂霉素(MMC)催化,活化的MMC对癌细胞有毒性,但不损伤正常的细胞;根据B项分析可知,该项技术能提高化疗药物在肿瘤部位的靶向聚集,减少化疗的副作用;由于抗体具有特异性,所以可利用特定的前药分别与不同的单克隆抗体连接,制备一系列靶向性各异的单克隆抗体药物。解题方法单克隆抗体制备过程的关键分析(1)对动物免疫的原因:B淋巴细胞要经过免疫过程,即接触抗原,增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞,才能产生相应的抗体,所以,与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。(2)杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质,不仅具有浆细胞产生特异性抗体的能力,还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力,从而可以克服单纯B淋巴细胞不能无限增殖的缺点,大量生产单克隆抗体。123456789101112131415A级必备知识基础练1.动物细胞融合和植物原生质体融合的基本原理相同,下列诱导细胞融合的方法中,动物细胞融合特有的是(

)A.PEG融合法B.电融合法C.高Ca2+—高pH融合法D.灭活病毒诱导法D1234567891011121314152.下列关于制备单克隆抗体与培育番茄—马铃薯共同点的表述,错误的是(

)A.都可以用电融合法促融

B.都利用了细胞膜的流动性C.都需要用适宜种类的激素处理

D.培养环境中都需要有适量的二氧化碳C解析

制备单克隆抗体不需要用激素处理,C项错误。

1234567891011121314153.下列关于细胞融合的说法,错误的是(

)A.动、植物组织中的细胞在融合之前都需要经过酶处理B.灭活病毒通过溶解磷脂双分子层诱导细胞融合C.融合后,动、植物细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息D.可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞B123456789101112131415解析

动、植物组织中的细胞在融合之前都需要经过酶处理,植物细胞在融合之前需要用纤维素酶和果胶酶处理,而动物细胞融合同样需要获得单个细胞,需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,A项正确;灭活的病毒可以诱导细胞融合,但不会溶解磷脂双分子层,B项错误;由于融合可能出现两个或多个细胞融合的情况,所以,融合后动、植物细胞会具有原来两个或多个细胞的遗传信息,C项正确;细胞融合过程会出现同种细胞融合的细胞和异种细胞融合的细胞,因此,可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞,D项正确。1234567891011121314154.[山东青岛高二期末]将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人体某些癌细胞,其过程如下图所示。“生物导弹”主要由两部分组成,一是“瞄准装置”,二是杀伤性“弹头”。下列叙述错误的是(

)A.“脾脏中的细胞”是从经免疫处理的实验动物中获取的B淋巴细胞B.杂交瘤细胞在培养瓶中培养时不会出现接触抑制的现象C.“瞄准装置”是指能够特异性识别癌细胞的单克隆抗体D.构成“弹头”的抗癌药物具有选择性杀伤癌细胞的功能D123456789101112131415解析

制备单克隆抗体前需要给小鼠注射特定抗原,然后从脾脏中获得能够产生特定抗体的B淋巴细胞,A项正确;杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的特点,细胞膜上的糖蛋白含量减少,可以无限增殖,所以在培养瓶中培养时不会出现接触抑制现象,B项正确;单克隆抗体可以特异性识别癌细胞表面的抗原物质,所以“瞄准装置”是指能够特异性识别癌细胞的单克隆抗体,C项正确;构成“弹头”的抗癌药物没有特异性,只有“瞄准装置”中的单克隆抗体才能将药物带到特定部位,对癌细胞进行选择性杀伤,D项错误。1234567891011121314155.[黑龙江齐齐哈尔高二月考]下图为动物细胞融合技术流程图,下列相关叙述错误的是(

)A.图中C为灭活的病毒,此外还可用PEG诱导细胞融合B.图中①过程发生了细胞膜的融合,体现了细胞膜的流动性C.图中②过程表示通过有丝分裂过程产生杂种细胞D.若①过程的动物细胞是B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞,则融合细胞全部为杂交瘤细胞D123456789101112131415解析

图中C为灭活的病毒,此外还可用物理法或化学法(PEG等)诱导细胞融合,A项正确;图中①过程发生了细胞膜的融合,体现了细胞膜的结构特点,即细胞膜的流动性,B项正确;杂种细胞的增殖方式为有丝分裂,C项正确;若①过程的动物细胞是B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞,则融合细胞有杂交瘤细胞、B淋巴细胞—B淋巴细胞、骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞,D项错误。1234567891011121314156.细胞融合技术应用广泛,下图为细胞融合的简略过程。据图分析,下列叙述不正确的是(

)A.甲形成过程中,a和b需要通过细胞膜接触完成识别和结合B.若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞,则完成融合的标志为再生出新的细胞壁C.将基因型为AaBB、aaBb植株的花粉细胞诱导融合(只考虑两两融合),可得到6种基因型细胞D.若细胞d是杂交瘤细胞,则在选择培养基中筛选后即可大规模培养生产单克隆抗体D123456789101112131415解析

据图分析甲是有性杂交产生的后代,其形成过程中a和b需要通过细胞膜接触完成识别和结合,A项正确;若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞,则完成融合的标志为再生出新的细胞壁,B项正确;若a和b分别为基因型AaBB、aaBb植株的花粉细胞,去壁后两两融合可以得到6种基因型(AABB、aaBB、aabb、AaBB、AaBb、aaBb)的细胞,C项正确;经选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞能产生多种抗体,还需要进一步筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞才能大规模培养生产单克隆抗体,D项错误。1234567891011121314157.将水溶性药物包裹在由磷脂分子构成的脂质体(脂质体膜上镶嵌有抗体)中可将药物直达病变细胞,此即“生物导弹”。下列叙述错误的是(

)A.水溶性药物被包裹在脂质体的两层磷脂分子之间B.抗体能够与病变细胞特定的抗原分子识别结合C.囊泡内药物进入病变细胞内部需要消耗ATPD.“生物导弹”可能在肿瘤定位和医学靶向治疗方面取得很大进展A123456789101112131415解析

在脂质体中,水溶性药物被包裹在双分子层中,脂溶性药物被包裹在两层磷脂分子之间,A项错误;抗体能特异性识别抗原,从而能够与病变细胞特定的抗原分子识别结合,B项正确;囊泡内药物进入病变细胞内部的方式属于胞吞,需要消耗ATP,C项正确;“生物导弹”能自动导向,在生物体内与特定目标细胞或组织结合,并由其携带的药物产生治疗作用,可能在肿瘤定位和医学靶向治疗方面取得很大进展,D项正确。1234567891011121314158.[河北邯郸高二月考]青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。为了快速检测青蒿素,科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体,其基本操作过程如下图。以下相关叙述错误的是(

)123456789101112131415A.过程②体现了细胞膜的流动性,过程⑤若在体内进行则操作更简单B.过程③常使用选择培养基,过程④常使用抗原—抗体杂交技术C.若细胞乙均由细胞两两融合而成,则细胞乙、丙、丁的染色体组数一定相同D.骨髓瘤细胞通常是从小鼠脾脏中提取的,其表面糖蛋白减少,培养时失去接触抑制答案

D123456789101112131415解析

过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合,体现了细胞膜的流动性;过程⑤为提取单克隆抗体,若在体内进行(可从小鼠腹水中提取),则操作更简单,A项正确。过程③是筛选杂交瘤细胞,常使用选择培养基(未融合的细胞、融合的具有相同核的细胞均死亡,杂交瘤细胞能正常生存);过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞,常使用抗原—抗体杂交技术,B项正确。因细胞甲和骨髓瘤细胞均来源于小鼠,若细胞乙均由细胞两两融合而成,则细胞乙和经筛选后的细胞丙、丁的染色体组数一定相同,C项正确。骨髓瘤细胞是从小鼠的骨髓中提取的,脾脏中无骨髓瘤细胞,D项错误。1234567891011121314159.若用a表示骨髓瘤细胞,b表示B淋巴细胞,则单克隆抗体制备过程中的两次筛选可表示为(

)选项筛选前第一次筛选获得第二次筛选获得Aa、aa、ab、bb、ba、aa、ababBa、aa、ab、bb、bab、bb、babCa、aa、ab、bb、bab能无限增殖的abDa、aa、ab、bb、bab能产生特定抗体的abD解析

骨髓瘤细胞和B淋巴细胞在促融剂的作用下,有的发生融合,有的不发生融合,筛选前存在a、aa、ab、bb、b

5种细胞,第一次筛选可获得杂交瘤细胞ab,第二次筛选可获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞ab,D项符合题意。12345678910111213141510.下图为高等动、植物细胞融合的部分过程示意图,请据图回答下列问题。

(1)若上图表示植物细胞融合的过程,欲将丁细胞培育成植株,可选用

技术,这一培养过程主要经过

和

两个阶段。

(2)若上图表示动物细胞融合的过程,过程①区别于植物细胞的常用诱导因素是

,丁细胞称为

。此过程中对动物细胞进行培养时,培养基中除必要的营养外通常需要加入

等一些天然成分。

植物组织培养脱分化再分化灭活的病毒杂交细胞血清123456789101112131415(3)若上图表示制备单克隆抗体的部分过程,甲细胞为小鼠的骨髓瘤细胞,则乙细胞为

。在分离乙细胞之前,应对小鼠进行的处理是

。只考虑两个细胞融合,获得的丙细胞有

种。

(4)若上图表示制备单克隆抗体的部分过程,过程②筛选得到的丁细胞的特点是

。上述制备过程涉及的生物技术有

。获得丁细胞后进行体内培养或体外培养,可提取到单克隆抗体。单克隆抗体的优点是

。

(产生特定抗体的)B淋巴细胞将抗原注射到小鼠体内3既能迅速大量增殖,又能产生抗体动物细胞培养技术和动物细胞融合技术特异性强、灵敏度高、可大量制备123456789101112131415解析

(1)要将杂种细胞培育成杂种植株,需采用植物组织培养技术,该技术包括脱分化和再分化两个关键步骤。(2)动物细胞融合区别于植物的常用诱导因素是灭活的病毒,丁细胞称为杂交细胞。对动物细胞进行培养时,培养基中除必要的营养外,通常需要加入血清等一些天然成分,以补充特殊营养物质。(3)若题图为制备单克隆抗体的部分过程,甲细胞为小鼠的骨髓瘤细胞,则乙细胞为(产生特定抗体的)B淋巴细胞。在分离B淋巴细胞之前,需将抗原注射到小鼠体内。只考虑两个细胞融合,获得的丙细胞有3种:B淋巴细胞—B淋巴细胞、骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞。123456789101112131415(4)若题图为制备单克隆抗体的部分过程,过程②筛选得到的丁细胞为杂交瘤细胞,其特点是既能迅速大量增殖,又能产生抗体。单克隆抗体的制备涉及的生物技术有动物细胞培养技术和动物细胞融合技术。单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。123456789101112131415B级能力素养提升练11.长春花是野生花卉,其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。研究人员利用已免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞通过杂交技术生产出能够同时特异性识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体,制备过程如下图所示。下列说法正确的是(

)123456789101112131415A.①过程要多次注射抗原,其目的是刺激小鼠产生更多的抗体B.经③过程获得的杂交瘤细胞都能产生抗癌胚抗原的特异性抗体C.图中“?”处只能使用PEG融合法和电融合法来诱导细胞融合D.制备双特异性抗体的目的是使长春碱能定向地作用于癌细胞答案

D123456789101112131415解析

①过程要多次注射抗原,其目的是刺激小鼠产生更多的已免疫的B淋巴细胞,A项错误;③为选择培养基,经选择培养基获得的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体,要产生所需抗体还要进行抗体阳性检测和克隆化培养,B项错误;诱导动物细胞融合可以使用PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,C项错误;双特异性抗体中的癌胚抗原抗体能将药物定向引导至癌细胞所在位置并和癌细胞结合,从而避免对其他细胞的破坏,D项正确。12345678910111213141512.将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合(只考虑细胞两两融合)后,在HAT培养基上,同时含有T、H基因(独立遗传)的细胞才能存活和增殖。增殖过程中,细胞内人染色体随机丢失,只残留一条或几条。对处于分裂中期的细胞进行镜检,结果如表所示。已知人、鼠细胞的基因型分别为ttHH和TThh,下列叙述正确的是(

)融合细胞细胞样编号残留人染色体①17②10、17③17、X123456789101112131415A.在HAT培养基上,融合细胞均能存活和增殖B.可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhhC.可以确定①②③的相关基因组成相同D.通过有关信息不足以确定H(h)基因位于人第17号染色体上答案

B123456789101112131415解析

在HAT培养基上,同时含有T、H基因(独立遗传)的细胞才能存活和增殖,融合细胞中若携带有H基因或T基因的染色体丢失,该融合细胞就不能在HAT培养基上存活和增殖,A项错误;①含有鼠的全部基因及人的第17号染色体上的基因,②含有鼠的全部基因及人的第10号和第17号染色体上的基因,③含有鼠的全部基因及人的第17号和X染色体上的基因,在细胞融合过程中鼠的染色体不丢失,①②③都含有鼠的全部基因,即一定都含有TThh,而①只含有人的第17号染色体上的基因,且可以在HAT培养基上存活,所以人的第17号染色体上一定携带H基因,故可以将H(h)基因定位于人第17号染色体,处于分裂中期的细胞由于DNA在间期已完成复制,基因已加倍,故①的基因组成为TTTTHHhhhh,B项正确,C、D两项错误。12345678910111213141513.[多选]下图是单克隆抗体制备过程示意图,1~3代表相关过程,a~e代表相关细胞,其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是(

)A.过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白,可刺激小鼠产生特异性免疫反应B.过程2的促融方法可采用电融合技术,该技术能击穿核膜促使核融合C.c细胞有三种,每种细胞染色体组数不相等,e细胞是杂交瘤细胞D.过程3是进行抗体检测,并克隆产生阳性细胞的过程BC123456789101112131415解析

图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞,A项正确;过程2是促进细胞融合的过程,其中电融合技术是利用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合,B项错误;c细胞为杂交瘤细胞,有三种,分别是骨髓瘤细胞—骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞—B淋巴细胞、B淋巴细胞—B淋巴细胞,其中骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组,融合后的细胞都含有四个染色体组,e细胞是杂交瘤细胞,C项错误;过程3是专一抗体检测及克隆培养筛选后获得阳性细胞的过程,D项正确。12345678910111213141514.[多选][湖南永州高二月考]动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。下列有关动物细胞融合技术及其应用的叙述,错误的是(

)A.细胞工程中植物体细胞杂交和动物细胞融合技术的原理完全一样B.诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等C.单克隆抗体的制备过程至少需要筛选两次,筛选的方法相同、目的不同D.筛选得到的杂交瘤细胞需放到CO2培养箱中进行培养AC123456789101112131415解析

细胞工程中植物体细胞杂交和动物细胞融合技术的原理不完全一样,都利用了细胞膜具有流动性,植物体细胞杂交还利用了植物细胞的全能性,A项错误;诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,B项正确;单克隆抗体的制备过程至少需要筛选两次,筛选的方法不相同、目的也不同,第一次筛选是用特定的选择培养基获得杂交瘤细胞,第二次筛选是进行抗性检测得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,C项错误;筛选得到的杂交瘤细胞属于动物细胞,需放到CO2培养箱中进行培养,维持pH稳定,D项正确。12345678910111213141515.[河北石家庄高二期中]为降低乳腺癌治疗药物的副作用,科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上,构建抗体—药物偶联物(ADC),过程如下图1所示。请回答下列问题。图1123456789101112131415(1)本实验中,小鼠注射的特定抗原应取自

。

(2)步骤①常用方法包括

融合法、电融合法和灭活病毒