第六章中药含量的测定

第六章中药含量的测定第一节常用含量测定方法一、化学分析法包括重量分析法和滴定分析法特点：仪器简单、结果准确。局限性：灵敏度低、操作繁琐、耗时长、专属性不高、不适于微量成分测定。适用于含量较高的成分及矿物药制剂中的无机成分，如总生物碱类、总酸类、总皂苷及矿物药制剂等。（一）重量分析法1.挥发法可测定具有挥发性或能定量转化为挥发性物质的组分含量。2.萃取法根据被测组分在互不相溶的两相中溶解度不同达到分离的目的。3.沉淀法是将被测组分定量转化为难溶化合物，以沉淀形式从溶液中分离出来，经滤过、洗涤、干燥、称重、依称量形式转换，并计算含量的方法。（二）滴定分析法

1．滴定度（TT/A）计算TT/A是指每1ml某浓度的滴定液所相当的被测药物成分的质量。式中:CT为被测成分的摩尔浓度，MA为被测成分的毫摩尔质量（相对分子质量）中国药典用毫克（mg）作质量单位。2．百分含量计算直接滴定法：T

T/A为滴定度，药典收载的滴定分析法会给出滴定度值。mS（g）为供试品取样质量VT

（ml）为消耗滴定液的体积返滴定法：aA+t1T1

(定量过量)→产物1和t1T1(剩余量)+t2T2→产物2V0T2为空白试验时消耗滴定液T2的体积VT2为供试品测定时消耗滴定液T2的体积TT/A为滴定液T1的滴定度ms为供试品取样质量(g)1234MINDMAPT2.沉淀滴定法利用离子和离子形成难溶性的盐，在中药分析中主要用于测定生物碱、生物碱的氢卤酸盐及含卤素的其他有机成分的含量。通常采用银量法。3.氧化还原滴定法用于测定具有氧化还原性的物质，如含酚类、糖类及含Fe、As等成分的中药。可分为碘量法、高锰酸盐法和亚硝酸盐法等。4.配位滴定法以配位反应为基础的一种滴定方法。包括EDTA法和硫氰酸铵法等。在中药分析中，主要用于测定鞣质、生物碱及含Ca2+、Fe3+、Hg2+等矿物类制剂的含量。二、紫外可见分光光度法根据物质分子对200~760nm波长范围电磁波的吸收特征建立起来的光谱分析方法，其定量依据是Lambert-beer定律。可用于测定总生物碱、总黄酮、总蒽醌、多糖等。单波长光谱法通常选择被测成分的λmax为测定波长，而共存组分在此波长处基本无吸收。一般应控制供试液的吸收度读数在0.3~0.7之间。测定法除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，且在规定的吸收峰波长±2nm内测试几个点的A，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确。除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内。A在0.3～0.7之间的误差较小。测定供试品溶液的吸收度应减去空白读数，再计算含量。1.Lambert-beer定律A=-lgT=ELCA：吸光度T：透光率E：吸光系数C：吸光物质的浓度L：吸光物质的厚度2.标准对照法3.标准曲线法

采用标准曲线法应注意的几个问题：（1）制备一条标准曲线至少需要5~7个点，并不得随意延长。（2）待测溶液浓度应在标准曲线范围内（3）待测溶液和对照品溶液必须在相同条件下进行测定三、薄层色谱扫描法用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中吸收紫外光或可见光的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于药品的鉴别、杂质检查或含量测定。（一）基本原理分为薄层吸收扫描法和薄层荧光扫描法。1.薄层吸收扫描法适用于在可见、紫外区有吸收的物质（或衍生化）测定。光源为钨灯和氘灯，波长范围200～800nm，灵敏度可达ng级。测光方式：常用反射法扫描方式：常用锯齿式扫描测定波长：常用双波长扫描法2.薄层荧光扫描法适用于本身具有荧光或经过适当处理后可产生荧光的物质的测定，适用范围较窄。光源为氙灯或汞灯，波长范围200～700nm，灵敏度比吸收法高，专属性强。测光方式：常用反射法扫描方式：常用直线式扫描定量关系：当溶液浓度很稀时（EcL≤0.05）在点样量很小时，斑点中待测组分的质量m（ng或μg）与其荧光强度积分值F呈线性关系。定量分析外标二点法：工作曲线不通过原点时，只能用外标二点法定量，至少要在同一薄层板上两种不同浓度（每个浓度可点2~4个点，取平均值）的对照品溶液（或一种浓度两种点样量），才能决定一直线。步骤：一定量的R和X制备分别点样于同一块薄层板，展开，显色定位，扫描斑点，得相应的A或F积分值，根据定量关系计算出被测成分的含量含量测定时规定要用市售薄层板应采用随行标准法，交叉点样，克服薄层板间差异

X点样＞2个，R点样（相同m）＞2个应沿展开方向扫描，不得横向扫描分析中必须考察斑点的稳定性，扫描操作必须在斑点稳定期内完成工作曲线不通过原点（截距为零）时至少8个点：对照品（R）4个分2组大质量的2个：2R1小质量的2个：2R2供试品（S）4个分2组：2S12S2由于对照品（m1、m2）：（二）系统适应性实验（1）比移值(各杂质的比移值以0.2-0.8为宜）比移值系指从基线至展开斑点中心的距离与从基线至展开剂前沿的距离的比值。（2）分离度（大于1.0）用于鉴别时，对照品溶液和供试品溶液中相应的主要斑点应显示两个清晰分离的斑点。用于限量检查和含量测定时，要求定量峰和相邻峰之间有较好的分离度。分离度（R）计算公式为：

R＝2（d2－d1）/（W1+W2）式中，d2为相邻两峰中后一峰与原点的距离，d1为相邻两峰中前一峰与原点的距离；W1、W2为此相邻两峰的峰宽。一般，分离度应大于1.0。（3）相对标准差同一供试品溶液在同一薄层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的相对标准差应不大于5.0%；需显色后测定的或者一般的相对标准偏差应不大于10.0%四、气相色谱法主要用于鉴别及测定含挥发油及其他挥发性组分的含量。如冰片、薄荷脑、龙脑等。还可用于中药及其制剂的检查，如含水量、含醇量的测定测定。气相色谱是根据气化后的试样被载气带入色谱柱，由于各组分在两相间作用不同，在色谱柱中移动有快慢，经一定柱长后得到分离，依次被载气带入检测器，将各组分浓度或质量变化转换成电信号变化，记录成色谱图，利用色谱峰保留值进行定性分析，利用峰面积或峰高进行定量分析的方法。（一）系统适应性试验1.色谱柱的理论塔板数（n）用于评价色谱柱的分离效能。由于不同物质在同一色谱柱上的色谱行为不同，采用理论塔板数作为衡量色谱柱效能的指标时，应指明测定物质，一般为待测物质或内标物质的理论板数。

2.分离度（R）用于评价待测物质与被分离物质之间的分离程度。是衡量色谱系统分离效能的关键指标。可以通过测定待测物质与已知杂质的分离度对色谱系统分离效能进行评价与调整。待测物质色谱峰与相邻色谱峰之间的分离度应大于1.5。分离度是指相邻两组分保留时间之差与两组分基线宽度平均值的比值，用R表示:R值越大，表明相邻组分分离越好。R＜1，两峰有部分重叠；R=1，分离程度达98%R=1.5时，分离程度达99.7%。作为两组分完全分离的标志。3.灵敏度用于评价色谱系统检测微量物质的能力，通常以信噪比（S/N）来表示。通过测定一系列不同浓度的供试品或对照品溶液来测定信噪比。定量测定时，信噪比应不小于10；定性测定时，信噪比应不小于3。4.拖尾因子（T）用于评价色谱峰的对称性。拖尾因子计算公式：拖尾因子:又称对称因子，用于衡量色谱峰的对称性。计算公式:T＝W0.05h/2d1T应在0.95~1.05之间。W0.05h为5%峰高处的峰宽；d1为峰顶在5%峰高处横坐标平行线的投影点至峰前沿与此平行线交点的距离。5.重复性用于评价色谱系统连续进样是响应值的重复性能。采用外标法时，通常取各品种项下的对照品溶液，连续进样5次，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%。采用内标法是，通常配制相当于80%、100%和120%的对照品溶液，加入规定量的内标溶液，配成3种不同浓度的溶液，分别至少进样2次，计算平均校正因子，其相对标准偏差应不大于2%。（二）实验条件的选择1.固定相：常用气-液色谱进行分析，按极性相似、化学官能团相似的原则和主要差别选择固定液；也常用气-固色谱分离水及含羟基化合物。2.柱温：一般根据样品的沸点进行选择。高沸点（300-400℃）：1%-5%低固定液配比，柱温200-250℃中高沸点（200-300℃）：5%-10%固定液配比，柱温150-180℃中沸点（100-200℃）：10%-15%固定液配比，柱温各组分平均沸点2/3低沸点15%-25%固定液配比，在室温或50℃以下进行。宽沸程程序升温法，柱温不超过固定液的最高使用温度。3.载气热导检测器：H2、He；氢焰检测器、电子捕获器一般用N24.汽化室温度一般用样品的沸点或高于沸点，不超过沸点50℃以上，以防分解。一般应高于柱温30-50℃5.检测室温度：氢火焰离子化检测器温度一般高于柱温，以免色谱柱的流出物在检测器中冷凝而污染检测器。通常可高于柱温30℃左右或等于汽化室温度。6.进样量对于填充柱，气体样品为0.1-1ml，液体样品为0.2-1μl，最大不超过4μl。毛细管柱需用分流器分流进样，分流后的进样量为填充柱的1/10-1/100。7.检测器氢焰离子化检测器（FID）适用于含碳有机物的测定，是中药分析中最广泛的质量型检测器；氮-磷检测器（NPD）对含N、P有机化合物特别敏感，可用于农药残留的检测。电子捕获检测器（ECD）用于痕量电负性大的有机物，如含卤素、硫、氧、硝基、羰基、氰基化合物的分析。（三）定量分析方法1．内标法（校正因子法）在定量分析时，需要对检测器的输出信号进行校正。定量分析的依据是组分的量（Wi）或其在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比，即mi=fi’Ai。要准确进行定量分析，必须准确地测量峰面积Ai与比例常数fi(校正因子)。1.绝对校正因子m=fi’A或m=Ai/Sifi’为比例常数，称为校正因子，其物理含义为单位峰面积（或峰高）所代表某组分的量。Si为单位物质的面积响应值，简称响应值。

Si、fi’称为绝对定量校正因子，单位相同时两者互为倒数。fi’=1/S绝对定量校正因子是由仪器的灵敏度及色谱条件而决定的，缺乏通用性。在实际工作中，一般以相对定量校正因子代替绝对定量校正因子。2.相对定量校正因子相对定量校正因子指某物质与标准物质绝对定量校正因子之比。文献手册中，热导检测器用苯作标准物质；氢焰检测器用正庚烷做标准物质。（1）重量校正因子Fw称为相对重量校正因子；Ai、As、Wi、Ws和分别代表被测物质i和标准物质s的峰面积和重量。（2）校正因子的测定与计算取待测校正因子的物质i的纯品，另取一标准物质s，准确称量这两种物质，并配成一溶液。取一定体积的溶液，进样，得到两个色谱峰面积Ai与As，则待测物质的重量校正因子fw可按左式求得。优点：只要求待测组分与内标物出峰分离且R≥1.5即可定量，且在进样量不超限的范围内，定量结果与进样量的重复性无关，可抵消仪器稳定性差、进样量不够准确等原因所带来的定量分析误差。缺点：样品的配制较麻烦，有些内标物不易寻找。2．外标法1）标准曲线法：不需用校正因子2）外标一点法：标准曲线过原点，不需用校正因子要求进样量准确及实验条件恒定，x和R浓度相近！3.归一化法若样品中各组分为同系物或性质接近，各组分的定量校正因子相近，可直接采用面积归一化法计算：要求所有组分均产生色谱峰，不适于微量杂质检测！4.标准溶液加入法指精密称（量）取某个杂质或待测成分对照品适量，配制成适当浓度的对照品溶液，取一定量，精密加入供试品溶液中，根据外标法或内标法测定杂质或主成分含量，再扣除加入的对照品溶液含量，即得供试品溶液中某个杂质和主成分含量。五、高效液相色谱法HPLC法广泛用于中药的含量测定，中药的鉴别及检查，因此成为中药检测中最常用的分析方法。（一）基本原理1．塔板理论色谱柱的柱效用理论塔板数n或理论塔板高度H衡量。式中：tR为组分的保留时间（以分钟或长度计）

σ、W1/2、W分别为组分的标准偏差、半峰宽和基线宽度当tR一定时，峰越窄，则H越小，n越大，柱效越高，分离性能越好。2．速率理论速率理论研究了色谱过程中各种动力学因素对柱效（峰展宽）的影响，提出了VanDeemeter方程式：u为载气的线速度；A、B、C为常数，分别代表涡流扩散项系数、分子扩散项系数、传质阻力项系数。它可以说明色谱柱的填充均匀程度、固定相粒度、流动相、柱温和固定液膜厚度对柱效、峰扩张的影响。速率方程式对于色谱分离条件的选择具有指导意义！（一）HPLC分析概述1.HPLC实验条件的选择（1）色谱柱：色谱柱由柱管和固定相组成，按其用途分为分析型和制备型。大多数药物可用十八烷基硅烷键合胶（简称C18反相柱，ODS）为固定相进行分离测定，在建立HPLC分离方法时可先试用反相柱。亲水性强的可用正相分配色谱柱或硅胶吸附色谱柱。对于解离性药物如生物碱、有机酸等可用离子对色谱柱、离子抑制色谱或离子交换色谱分离测定。多糖类可选用凝胶色谱。主要化学键合相的类型及应用范围类型键合官能团性质分离方式应用对象烷基C8、C18－(CH2)7－CH3－(CH2)17－CH3非极性反相、离子对中等极性化合物苯基-C6H5－(CH2)3－C6H5非极性反相、离子对非极性、中等极性、芳香化合物醚基弱极性反相或正相酚类、芳硝基化合物氰基-CN－(CH2)3－CN极性正相极性化合物胺基-NH2－(CH2)3－NH2极性正相极性化合物－(CH2)3－O－CH22．流动相等度洗脱与梯度洗脱。可供选择的范围较宽：不同种类多元溶剂系统不同配比调节pH值反相键合相色谱最为常用，其流动相常选用下述两类：基本组成为:基础溶剂水+有机溶剂调节+其他试剂有机极性调节剂（甲醇、乙腈或四氢呋喃）+水:

tR和选择性其他试剂:减少峰拖尾，改善分离效果1)一般反相色谱:常用甲醇-水、乙腈-水系统，分离中等极性、弱极性的非解离性药物。有时加入0.1%～1%的磷酸盐及醋酸盐等可减弱固定相表面残余硅醇基的作用，减少峰拖尾。2)反相离子抑制色谱:常用含弱酸、弱碱或缓冲溶液的甲醇-水、乙腈-水系统，用于分离含有机弱酸、弱碱的中等极性、弱极性药物。调节流动相的pH值，使被测成分为非解离形式，使固定相有较大保留能力，而且减少峰拖尾。3)反相离子对色谱:常用含缓冲溶液和0.003～0.01mol/L的离子对试剂的甲醇-水、乙腈-水系统，用于分离含有机酸、碱、盐的药物。②非水溶剂：用于疏水性物质的分离可在乙腈或甲醇中加入二氯甲烷或四氢呋喃（称非水反相色谱）。正相键合相色谱的流动相通常采用饱和烷烃（如正己烷）+极性调节剂（如异丙醚），以改变溶剂强度（多元溶剂系统）。常以TLC为先导来探索合适的流动相。3.检测器：1）UV、DAD：被检成分有紫外吸收，最常用2）ELSD：通用型（A或h的对数值，外标二点法）3）FD：体内药物分析常用灵敏度：FD＞UV、DAD＞ELSD4.样品的处理经提取、纯化、浓缩后的供试液，用微孔滤膜（0.45μm）过滤。流动相处理1）溶剂的纯化：一般用色谱纯2）流动相脱气：常用超声脱气3）流动相过滤：用微孔滤膜（0.45μm）过滤第二节含量测定方法选定原则及验证一、含量测定指标选定从质量控制目的出发，以中医药理论为指导，结合当前中药基础研究现状，选择对控制中药的有效性，安全性和质量稳定性有益的成分为指标。（一）测定成分的选择1.选择有效成分，保证中药的有效性对有效成分相对清楚的中药，要首选有效成分作为含量测定的指标。如水溶性酚酸类化合物及脂溶性丹参酮类化合物是丹参活血化瘀的主要活性成分。《中国药典》规定丹参药材中丹酚酸B和丹参酮类分别不少于3.0%和0.25%。对中药制剂而言，在选择测定成分时应以中医药理论为指导，首先要测定来源于君药的成分，其次是臣药、佐使药。当测定君药、臣药有困难时，再考虑佐使药味，做到主次有序，控制合理。对含量特别低的有效成分，由于分析仪器的检测限、灵敏度等原因，不宜作为含量测定的指标。2.选择毒性成分，保证中药的安全性毒效成分：既有毒性又是治疗疾病的物质基础。研究建立安全的使用范围，建立合理的含量区间。川乌、草乌的乌头碱、雷公藤中雷公藤甲素、八角枫中的毒藜碱等。毒性成分：基本是不具有治疗疾病作用的成分。严格控制含量，经过研究要建立限度指标。如含马兜铃酸药材（细辛）、含银杏酸药材（银杏叶、白果）的制剂，保证制剂的安全和有效。3.选择不稳定成分，控制中药的质量稳定性中药材、饮片或制剂中如含有理化性质不稳定成分或者易损失成分，如冰片、樟脑、挥发油等，应对其建立含量测定方法，规定合理的含量范围，并据此制定中药有效期和相应包装贮存条件，保证有效期内中药质量的稳定有效。4.测定总成分或有效部位中药有效成分往往不是单一成分，而可能是同一结构类型的多种成分共同构成的有效部位，如人参总皂苷、葛根总黄酮、丹参总酚酸等。另外，某些中药的化学成分研究较为薄弱，其有效成分或指标性成分不甚清楚，而无法选择单一成分进行含量测定。可考虑测定总成分或有效成分或有效部位。如灵芝总多糖、总三萜及甾醇。检测时，应注意排除非测定成分干扰。5.测定专属性成分中药中常含有多种中药含有的共性成分，如绿原酸、橙皮苷、大黄素、小檗碱等，这些成分不具有专属性。往往存在于很多中药中，不能很好的发挥质量控制的作用和意义。(二)分析策略选择1.多成分测定选定依据药效物质研究的成果同一类多种成分不同类多种成分多个对照品、一测多评法一测多评法（quantitativeanalysisofmulti-componentsbysingle-marker,QAMS）通过中药有效成分间存在的内在函数关系和比例关系，仅测定1个成分（对照品可以得到者），来实现多个成分（对照品没有或难以供应）的同步监控。一、适用范围本方法适用于对照品难得或制备成本高或不稳定的情况下同类多成分同时测定。二、基本原理在一定的线性范围，成分的量（质量或浓度）与检测器响应成正比。在多指标（s,a,b,…,i,…）质量评价时，以药材（或成药）中某一典型有效成分作内参物（s），建立内参物与其它待测成分（a,b,…,i,…）间的相对校正因子（RCF,fsa,fsb,fsc,…），按下式计算:

（1）式中，As为内参物对照品s峰面积，Cs为内参物对照品s浓度，Ai为某待测成分对照品i峰面积；Ci为某待测成分对照品i浓度。在方法学建立时，主要是求出内参物与各待测成分间的RCF，并把它作为一个常数用于含量测定中。在测定含量时，内参物（s）的浓度可按常规方法进行测定（Cs）；应用RCF（fsa,fsb,fsc,…）,结合内参物（s）实测值Cs，计算待测成分（a,b,…,i,…）的浓度，见公式2。

式中，Ai为供试品中待测成分i的峰面积，Ci为供试品中待测成分i的浓度，As为供试品中内参物s的峰面积，Cs为供试品中内参物的浓度，fsi为内参物s对待测成分i的校正因子。2.单一成分测定选择药效明确、含量较高、专属性较强的成分。例如：延胡索中的延胡索乙素3.总成分或有效部位对于有效成分类型或有效部位明确、含量较高，且有效成分数量较多的中药，仅可测定其单一或多成分含量，也可考虑增加总成分或有效部位的测定。二、含量测定方法选择（一）据测定对象组成选择单一物质——色谱法混合物（总黄酮、总生物碱等）——紫外分光光度法、滴定法（二）据测定物质类型选择微量无机物（矿物药、微量元素、有害元素）——离子色谱法、原子分光光度法或电感耦合等离子体质谱法。常量无机物——滴定法大分子物质——凝胶色谱法(三)据测定成分的性质选择酸碱物质——比色法或其他方法挥发性——气相色谱法共轭双键——分光光度法或液相色谱—紫外法。（四）据测定成分含量选择常量——化学分析法微量——仪器分析法微量、成分复杂——GC-MS、LC-MS、ICP-MS三、含量测定方法验证三、含量测定方法验证（一）准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。准确度应在固定的范围内测试。用于定量测定的分析方法均需做准确度验证。1.测定方法的准确度用已知纯度的对照品进行加样回收率测定，即向已知被测成分含量的供试品中再精密加入一定量已知纯度的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。A为供试品所含被测成分量；B为加入对照品量；C为实测值。注意：对照品的加入量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内，加入的对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。2.数据要求在规定范围内，取同一浓度的供试品，用6个测定结果进行评价；设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定，用9个测定结果进行评价，一般中间浓度加入量与所取供试品含量之比（B∶A）控制在1∶1左右。一般要求在95%～105%（结果保留一位小数）。方法操作步骤繁杂，可要求略低，但必须＞90%。RSD一般应＜3%以内（一般均保留1～2位有效数字）。（二）精密度

精密度系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。

标准偏差（S）和相对标准偏差(RSD)的计算公式分别为：式中n为测定次数，Xi为各测定值，为n次测定的平均值。包含有：重复性：在相同操作条件下，由同一个分析人员在较短的间隔时间内测定所得结果的精密度。中间精密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度。重现性：在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度。用于定量测定的分析方法均应考察方法的精密度！1．重复性在规定范围内，取同一浓度的供试品，用6个测定结果进行评价；或设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试品溶液进行测定，用9个测定结果进行评价。2．中间精密度为考察随机变动因素对精密度的影响，应进行中间精密度试验。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备等。

3．重现性当分析方法将被法定标准采用时，应进行重现性试验。例如建立药典分析方法时通过不同实验室的复核检验得出重现性结果。复核检验的目的、过程和重现性结果均应记载在起草说明中。应注意重现性试验用的样品本身的质量均匀性和贮存运输中的环境影响因素，以免影响重现性结果。4．数据要求均应报告S或RSD或可信限（RSD应小于3%）一般均保留1～2位有效数字。（三）专属性专属性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正确测定出被测成分的特性。中药制剂常用阴性对照法。必要时采用DAD和MS检测，通过UV光谱图一致性比较，或进行峰纯度检查。（单味药材）要求：色谱法、光谱法等应附代表性谱图，并标明相关成分在图中的位置，色谱法中分离度R≥1.5。（四）检测限检测限：系指供试品中被测物能被测出的最低量，确定检测限常用的方法如下。1．直观法用一系列已知浓度的供试品进行分析，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或质量。可用于非仪器分析方法，也可用于仪器分析方法。

2．信噪比法仅适用于能显示基线噪声的分析方法，即把已知低浓度供试品测出的信号与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比为3:1或2:1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。3．数据要求应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。在含量测定可不报告，限量检查的限度测定要报告！（五）定量限定量限：系指供试品中被测成分能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。常用信噪比法确定定量限。一般以信噪比为10∶1时相应浓度或注入仪器的量进行确定。在含量测定中也可不报告，限量检查的定量测定要报告！（六）线性线性：系指在设计的范围内，测试结果与供试品中被测物浓度或质量直接呈正比关系的程度。以测得的响应信号作为被测物浓度或质量的函数作图，观察是否呈线性，再用最小二乘法进行线性回归。必要时，响应信号可经数学转换，再进行线性回归计算。数据要求：应列出回归方程、相关系数或线性图。

（八）耐用性耐用性是指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为所建立方法用于日常检验提供依据。如果测定条件要求苛刻，则应在方法中写明，并注明可以接受变动的范围，可以先采用均匀设计确定