ISO 29822-22026 植物脂肪和油 1 2-和1 3-二酰基甘油含量和相对量的测定 第2部分固相萃取分离标准立项发展报告

植物脂肪和油1,2-和1,3-二酰基甘油含量和相对量的测定第2部分：固相萃取分离标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:VegetableFatsandOils—DeterminationoftheContentandRelativeAmountsof1,2-and1,3-Diacylglycerols—Part2:IsolationbySolidPhaseExtraction(SPE)摘要二酰基甘油（Diacylglycerols,DAG）是植物油脂中重要的微量组分，其1,2-和1,3-异构体的含量与相对比例不仅是评价油脂品质、监测油脂加工与储存过程中水解劣变程度的关键指标，更与油脂产品的功能特性及健康效益密切相关。随着功能性油脂产业的快速发展及消费者对食用油品质要求的不断提升，建立准确、高效的DAG异构体检测方法已成为国际油脂标准化领域的迫切需求。ISO29822-2:2026《植物脂肪和油1,2-和1,3-二酰基甘油含量和相对量的测定第2部分：固相萃取分离》由国际标准化组织（ISO）正式发布，确立了基于固相萃取（SPE）前处理技术分离油脂中DAG异构体的标准化方法。本报告系统阐述了该标准的立项背景、技术内容、修订过程、主要参与单位及行业影响，并对标准在油脂品质控制、食品真实性鉴别及功能性油脂产业中的应用前景进行了展望。关键词：二酰基甘油；固相萃取；植物油脂；国际标准；异构体分离；品质检测Keywords:Diacylglycerols;SolidPhaseExtraction;VegetableFatsandOils;InternationalStandard;IsomerSeparation;QualityDetermination一、引言1.1研究背景植物油脂是人类膳食的重要组成部分，其品质安全直接关系到消费者的健康权益。二酰基甘油作为甘油三酯合成与水解过程中的重要中间产物，天然存在于各类植物油脂中。在油脂精炼、储存及煎炸使用过程中，由于水解作用和酰基迁移反应的发生，油脂中DAG的总量及1,2-与1,3-异构体的比例会发生显著变化。研究表明，1,2-DAG是脂酶水解的主要初始产物，其含量可反映油脂的新鲜程度；而随着储存时间延长或加工条件剧烈，1,2-DAG会通过酰基迁移转化为更为热力学稳定的1,3-DAG。因此，DAG异构体分布特征可作为评价油脂品质、判断精炼程度和监测氧化劣变的重要参考指标。从功能油脂的角度来看，DAG因其独特的代谢途径——摄入后不易在体内重新合成甘油三酯，而是进入氧化供能途径——而被广泛开发为膳食油脂替代品。尤其以1,3-DAG为主要成分的功能性食用油已在日本、美国等国家实现产业化。我国于2009年批准1,3-DAG食用油为新资源食品，其含量测定方法的标准化对于产品质量控制和市场监管具有重要意义。1.2标准立项的必要性在ISO29822-2:2026发布之前，DAG异构体的检测主要依赖高效液相色谱（HPLC）、气相色谱（GC）及薄层色谱（TLC）等方法，但DAG异构体因极性相近、性质相似，直接进行色谱分析往往存在分离度不足、定量准确度不高等问题。采用固相萃取（SPE）技术对油脂样品进行前处理，可选择性地将DAG从甘油三酯、游离脂肪酸、甾醇等复杂基质中分离富集，再结合高效液相色谱或气相色谱进行定量分析，从而显著提高检测的准确性和灵敏度。然而，由于缺乏国际统一的SPE操作规范，不同实验室间的检测结果可比性差，制约了国际贸易中的质量评价与仲裁检测。在此背景下，制定统一的DAG异构体固相萃取分离国际标准显得尤为必要。ISO29822-2:2026的发布填补了该领域的国际标准空白，为全球植物油脂行业提供了统一的技术依据。二、标准主要内容2.1标准基本信息ISO29822-2:2026《植物脂肪和油1,2-和1,3-二酰基甘油含量和相对量的测定第2部分：固相萃取分离》由国际标准化组织（ISO）于2026年3月19日正式发布，标准状态为现行有效。该标准属于ISO/TC34/SC11（食品技术委员会动植物油脂分技术委员会）的工作范畴，分类号为动物和植物的脂肪和油。标准文本为英文版本，以电子版加密PDF格式发行。2.2技术内容概述该标准规定了采用固相萃取技术从植物脂肪和油中分离1,2-和1,3-二酰基甘油的方法。技术路线主要包括以下关键步骤：（1）样品制备：准确称取适量油脂样品，用合适的有机溶剂溶解，配制成适宜浓度的样品溶液。样品溶液的浓度需根据油脂中DAG含量水平进行优化，以确保SPE柱的吸附容量不超载。（2）固相萃取柱选择与活化：标准规定了所用SPE柱的吸附剂类型（氨基柱、硅胶柱或二醇基柱）、规格和容量。上样前需使用适当溶剂对SPE柱进行平衡活化，以改善吸附剂表面性质，提高萃取的重复性。（3）上样与洗涤：将样品溶液定量转移至SPE柱上，控制流速使其均匀吸附。随后采用非极性或弱极性溶剂洗涤层析柱，以洗脱去除甘油三酯、甾醇酯等非极性组分。此步骤的关键在于洗脱溶剂种类和用量的优化，需确保目标组分在柱上保留的同时实现杂质的有效去除。（4）目标组分洗脱：采用极性较强的溶剂体系将吸附于SPE柱上的DAG组分洗脱收集。洗脱液经氮吹浓缩或低温蒸干后，复溶于适当溶剂供后续色谱分析使用。（5）分析方法衔接：标准中明确规定了与SPE分离步骤相衔接的色谱定量分析方法，通常为高效液相色谱法（配备示差折光检测器或蒸发光散射检测器），或气相色谱法（配备氢火焰离子化检测器）。DAG定量可通过内标法或外标法实现。（6）结果计算与表达：分别计算1,2-DAG和1,3-DAG在油脂中的含量，以及二者占总DAG的相对百分比例。结果的精密度要求依据国际协同试验（InterlaboratoryStudy）数据确定。2.3关键技术参数标准对不同类型植物油（高油酸植物油、中低碳链脂肪酸油脂、含高游离脂肪酸的毛油等）的适用性进行了验证，规定了方法的最低检出限、定量限、回收率和重复性限等性能指标。协同试验结果表明，该方法对DAG的加标回收率在85%~110%之间，相对标准偏差（RSD）小于10%，具有良好的准确度和精密度。三、标准修订过程ISO29822-2:2026的制定工作由ISO/TC34/SC11动植物油脂分技术委员会归口管理，其研制过程遵循ISO国际标准制定程序，主要经历了以下几个阶段：3.1提案阶段（ProposalStage）随着DAG分析技术研究的深入以及功能性油脂产业的快速发展，国际油脂界对DAG异构体分离分析方法的标准化需求日益迫切。在ISO/TC34/SC11年度会议上，相关成员国专家提出了制定DAG测定系列标准的提案。经过充分讨论和投票表决，该提案获批立项，并确定为ISO29822系列标准（拟分为多个部分，分别涉及不同测定原理）。3.2准备与起草阶段（PreparatoryandCommitteeStage）标准起草工作组成立后，系统收集了各国在DAG分析领域的研究成果和已有的国家标准、行业标准方法，包括国际理论与应用化学联合会（IUPAC）推荐方法以及欧盟、美国油脂化学家协会（AOCS）的相关官方方法。在此基础上，结合固相萃取技术的最新进展，形成了标准的工作草案（WorkingDraft,WD）。在国际标准草案（CommitteeDraft,CD）讨论阶段，各国专家围绕SPE柱类型选择、洗脱溶剂体系优化、方法适用性验证等问题展开了深入讨论，并提出了多项修改意见。起草组对草案进行了多轮修改完善，形成了国际标准草案（DraftInternationalStandard,DIS）。3.3国际协同试验（InterlaboratoryStudy）为确保标准方法的可靠性和通用性，DIS阶段由牵头实验室组织开展了国际协同试验。来自不同国家和地区的十余个实验室按照标准草案规定的操作方法，对多种植物油样品（包括大豆油、棕榈油、菜籽油、橄榄油及DAG功能性食用油等）进行了平行测定。协同试验数据经过统计分析，确定了方法的重复性限（r）和再现性限（R），为标准的最终发布提供了坚实的技术支撑。3.4发布阶段（PublicationStage）在完成最终国际标准草案（FDIS）的投票并获得通过后，ISO29822-2:2026于2026年3月19日正式出版发布。该标准的发布标志着DAG异构体固相萃取分离方法在全球范围内实现了统一。四、主要参与单位介绍4.1国际标准化组织ISO/TC34/SC11ISO29822-2:2026由国际标准化组织（InternationalOrganizationforStandardization,ISO）下属的ISO/TC34/SC11（食品技术委员会动植物油脂分技术委员会）归口制定。ISO/TC34/SC11是国际油脂标准化领域最权威的技术组织之一，其秘书处长期由英国标准协会（BSI）承担。该分技术委员会负责植物油脂、动物油脂及其衍生产品的国际标准制定与修订工作，涵盖油脂的取样方法、检测分析方法、产品规格及包装储运等各个方面的标准体系。SC11下设多个工作组（WorkingGroups），分别承担特定领域的标准制修订任务。SC11的成员包括中国、美国、德国、法国、日本、马来西亚、印度尼西亚、阿根廷等主要油脂生产国和消费国的国家标准化机构，同时吸纳了国际油脂行业组织、科研机构及企业代表作为联络成员。该委员会定期召开全体会议和工作组会议，审议标准制修订项目，协调各成员国之间的技术意见。SC11在国际油脂标准化领域已制定并发布百余项国际标准，涵盖了油脂酸价、过氧化值、脂肪酸组成、反式脂肪酸、生育酚、植物甾醇、甘油三酯组成等关键质量指标的测定方法。ISO29822-2:2026的发布进一步丰富和完善了SC11的标准体系，填补了DAG异构体分离分析方法的国际标准空白。4.2标准起草工作组ISO29822-2:2026的起草工作组由来自多个国家的油脂分析领域专家组成，包括油脂化学家、色谱分析专家、标准化工作者及企业技术人员。工作组的核心成员来自马来西亚棕榈油委员会（MPOB）、日本油脂检查协会等在该领域具有深厚研究积累的机构。MPOB作为全球领先的棕榈油研究机构，在DAG分析领域拥有丰富的研究经验和先进的技术条件，为标准的制定提供了大量基础数据和关键技术支撑。4.3主要参与单位的贡献上述技术机构在标准制定过程中发挥了关键作用：在技术研究层面，系统研究了不同类型SPE柱对DAG异构体的选择性吸附机理，优化了洗脱条件和回收率；在方法验证层面，组织完成了多种植物油基质的适用性验证；在标准化协调层面，积极协调各国专家意见，推动标准技术内容的国际共识。这些工作为标准的科学性、先进性和适用性提供了坚实保障。五、标准的意义与影响5.1对油脂品质控制的技术支撑ISO29822-2:2026为全球油脂行业提供了一套科学、统一、可操作的DAG异构体分离分析方法。该标准的实施将显著提升各实验室间DAG检测结果的可比性和互认性，有利于油脂生产企业在原料采购、加工过程控制及成品出厂检验等环节建立更为完善的质量管控体系。通过对1,2-和1,3-DAG含量及相对比例的监测，企业可更加精准地评估油脂的新鲜程度、精炼深度和储存稳定性，从而优化生产工艺、延长产品货架期。5.2对油脂掺假鉴别的支撑作用DAG异构体分布特征可作为油脂真实性鉴别和掺假识别的辅助指标。不同来源的植物油因其脂肪酸组成和甘油酯结构不同，DAG异构体的含量与比例呈现一定差异。结合稳定同位素比值分析、脂肪酸指纹图谱等技术，DAG异构体分析可为橄榄油等高附加值油脂的真伪鉴别提供补充信息。在国际贸易中，该标准可用于仲裁检测和贸易纠纷的技术支撑。5.3对功能性油脂产业发展的推动作用DAG功能性食用油作为新兴的健康油脂产品，其质量评价高度依赖DAG含量及异构体比例的准确测定。ISO29822-2:2026为DAG功能性油脂的研发、生产、质量控制及市场监督提供了权威的技术依据。我国作为全球重要的油脂消费市场，在DAG食用油新资源食品批准的基础上，采用并转化该国际标准将有助于规范国内DAG油脂产品的质量监管体系，促进功能性油脂产业的健康有序发展。5.4对国际油脂标准化体系的完善ISO29822-2:2026作为ISO29822系列标准的组成部分，与第1部分（可能涉及高效液相色谱直接测定法等）及后续可能制定的其他部分协同配套，共同构成完整的DAG测定标准体系。该标准的发布进一步丰富了ISO动植物油脂标准体系中关于微量活性成分和特征组分的分析方法标准，体现了国际油脂标准化从常规理化指标向精细化、特征化方向发展的趋势。六、结论ISO29822-2:2026《植物脂肪和油1,2-和1,3-二酰基甘油含量和相对量的测定第2部分：固相萃取分离》的正式发布是国际油脂标准化领域的一项重要成果。该标准基于固相萃取技术实现了油脂基质中1,2-和1,3-DAG异构体的高效分离与富集，具有分离效果好、回收率高、重复性强、适用范围广等特点，填补了DAG异构体分离分析方法国际标准的空白。从技术层面看，该标准建立了从样品制备、SPE分离到色谱定量的全流程标准化操作规范，并通过国际协同试验验证了方法的可靠性，能够满足不同实验室、不同仪器条件下的检测需求。从产业层面看，该标准将有力促进油脂品质控制水平的提升，为功能性油脂产品的质量评价和市场监管提供权威依据，同时也为油脂真实性鉴别提供了新的技术