ISO 238512026 鸡组织和鸡蛋 尼卡巴嗪标志物残留量的测定 液相色谱串联质谱法标准立项发展报告

ISO23851:2026鸡组织和鸡蛋尼卡巴嗪标志物残留量的测定液相色谱串联质谱法标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:Chickentissueandeggs—Determinationofmarkerresiduesofnicarbazin—Liquidchromatographytandemmassspectrometrymethod摘要随着全球禽肉和禽蛋消费量的持续增长，食品安全问题日益受到国际社会的高度关注。尼卡巴嗪作为一种广泛用于家禽抗球虫病的药物，其残留监控已成为国际畜产品贸易中重要的技术壁垒之一。在此背景下，国际标准化组织（ISO）于2026年5月15日正式发布ISO23851:2026标准，为鸡组织和鸡蛋中尼卡巴嗪标志物残留量的测定提供了统一的液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）技术规范。本报告全面梳理了该标准的立项背景、研制历程、核心技术内容及其国际影响。报告指出，尼卡巴嗪有效成分4,4'-二硝基苯脲（DNC）作为标志物残留的靶向分析物，经液相色谱分离后，采用串联质谱多反应监测模式进行定性和定量分析，方法检出限达亚微克/千克级别，满足国际食品法典委员会（CAC）的最大残留限量要求。该标准的发布填补了国际标准化组织在禽产品中尼卡巴嗪残留检测方法领域的空白，对促进全球禽产品贸易畅通、保护消费者健康、推动检测技术国际互认具有深远意义。关键词：尼卡巴嗪；标志物残留；液相色谱串联质谱法；鸡组织；鸡蛋；国际标准Keywords:Nicarbazin;Markerresidue;Liquidchromatographytandemmassspectrometry;Chickentissue;Eggs;Internationalstandard1引言1.1背景与意义球虫病是家禽养殖中最常见且危害最严重的寄生虫病之一，可导致雏鸡大规模死亡和生长性能显著下降，给全球家禽养殖业造成巨大的经济损失。尼卡巴嗪（Nicarbazin）作为一种高效抗球虫药物，自1955年问世以来被世界各国广泛用于肉鸡和蛋鸡的球虫病防治。然而，尼卡巴嗪在动物体内代谢缓慢，残留期长，特别是其有效成分4,4'-二硝基苯脲（DNC）能在禽类组织（尤其是肝脏和肌肉）和蛋中持久蓄积，可能对消费者的健康构成潜在风险。为确保食品安全和公平贸易，世界各主要贸易国和国际组织均对尼卡巴嗪残留制定了严格的限量要求。国际食品法典委员会（CAC）将尼卡巴嗪（以DNC计）在鸡肌肉和肝脏中的最大残留限量（MRL）分别设定为200μg/kg和400μg/kg；欧盟对鸡蛋中DNC的限量规定更为严苛，其参考限量（RP）为10μg/kg；中国国家标准GB31650-2019规定鸡肌肉和肝脏中DNC的MRL分别为200μg/kg和400μg/kg。这一系列差异化的监管要求意味着各国必须能够准确、可靠地测定痕量级尼卡巴嗪残留，以验证产品合规性并应对潜在的贸易争端。1.2标准立项背景此前，虽然各国和地区已开发了多种尼卡巴嗪残留检测方法，包括高效液相色谱法（HPLC）、酶联免疫吸附法（ELISA）以及液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）等，但国际上缺乏统一、可互认的标准化检测方法基准。不同实验室在检测原理、前处理流程、质量控制指标以及结果表达方式上的差异，不仅影响检测结果的可比性，也在一定程度上形成了隐性的技术壁垒。这一现状严重制约了国际贸易中禽产品残留监控效率的提升。因此，国际标准化组织（ISO）在食品标准制定领域着力推动统一规范的残留检测方法标准，ISO23851:2026便是在这一时代需求下立项研制的。ISO23851:2026在原有的ISO23851:2026框架下，为该年度发布的新版标准明确规定了鸡组织和鸡蛋中尼卡巴嗪标志物残留的液相色谱串联质谱测定方法，旨在提供一种灵敏、准确、可重复，并能够在不同国家和实验室间推广应用的国际统一方法。2标准编制概况2.1标准基本信息ISO23851:2026《鸡组织和鸡蛋尼卡巴嗪标志物残留量的测定液相色谱串联质谱法》由国际标准化组织（ISO）正式发布，发布日期为2026年5月15日，标准状态为“现行”。该标准归属于“家禽和蛋”分类号，全文为英文版本，采用电子加密PDF格式发行。标准定价为541.0元人民币（含平台服务费），文档通过FileOpen插件进行数字版权管理，在联网条件下可下载，累计限制在3台电脑上打印5次。2.2编制过程与工作框架本标准的制定工作由ISO下设的食品技术委员会相关工作组牵头，联合各国权威食品安全检测机构、科研院所以及兽药残留监控实验室共同参与。标准编制工作严格遵循ISO工作导则（ISO/IECDirectives），在充分吸收各国先进经验和检测技术成果的基础上，经过多次专家论证、实验室联合验证（collaborativestudy）和公开征求意见，最终达成国际共识。根据国际标准化组织的标准研制程序，该标准从新工作项目提案（NWIP）到最终国际标准草案（FDIS）投票通过，历经了预研、草案研制、实验室间比对验证、征求意见及终审发布等阶段，整个过程历时约36个月。其中，联合验证实验覆盖了亚洲、欧洲和北美多个权威检测机构，充分验证了方法的准确性、精密度和适用性，确保标准文本在技术层面具备全球应用的可操作性。3标准核心技术内容3.1标准适用范围ISO23851:2026规定了鸡肌肉组织、肝脏组织以及鸡蛋中尼卡巴嗪标志物残留量（以DNC计）的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定方法。该标准适用于上述基质的常规监测、出口检验及残留监控计划中的定性和定量分析。3.2方法原理本标准的测定原理为：试样中的尼卡巴嗪标志物残留（DNC）经有机溶剂提取、固相萃取柱净化后，以液相色谱系统进行分离，在电喷雾离子源（ESI）的负离子模式下进行电离，通过串联四极杆质谱仪的多反应监测（MRM）模式，对DNC的母离子及其特征子离子进行监测，依据保留时间和离子对丰度比进行定性分析，采用内标法或外标法进行定量测定。3.3关键性能指标依据标准文本，该方法的主要性能指标包括：-检出限（LOD）：肌肉、肝脏、鸡蛋基质中DNC的检出限均可达到0.10～0.25μg/kg，显著低于各国设定的最大残留限量标准；-定量限（LOQ）：定量限为0.25～0.5μg/kg，能够满足鸡蛋中痕量水平残留的定值需求；-精密度：在重复性条件下，相对标准偏差（RSDr）≤9.6%；在再现性条件下，相对标准偏差（RSDR）≤14.8%，满足Horwitz方程对残留分析方法的精密度要求。3.4质量控制与保证标准明确规定，每批样品测定时需同时进行空白试验、添加回收试验以及标准工作曲线校准，并对仪器灵敏度、质量轴稳定性、基质效应等进行系统评估。此外，标准还给出了结果计算和测量不确定度评定的要求，确保检测数据具有完整的计量溯源性。4主要参与研制单位介绍ISO23851:2026标准的研制汇聚了全球食品安全检测领域的重要机构力量，其中中国动物卫生与流行病学中心（ChinaAnimalHealthandEpidemiologyCenter,CAHEC）作为核心参与单位之一，在标准的技术方案贡献、联合验证实验以及方法学完善等方面发挥了重要作用。中国动物卫生与流行病学中心是农业农村部直属的国家级专业技术机构，长期承担全国动物产品中兽药残留监控的基准方法研究、能力验证组织和风险评估工作。该中心建有国家兽药残留基准实验室，配备国际先进的高分辨质谱仪、三重四极杆质谱仪等大型精密仪器设备，在兽药残留检测方法的开发与标准化领域积累了深厚的技术基础。在ISO23851:2026研制过程中，中国动物卫生与流行病学中心主要承担了以下工作：1.提供鸡肝脏和肌肉组织中DNC残留检测的核心技术方案，包括改进的提取净化流程和基质效应补偿策略；2.组织国内多家省级兽药残留检测实验室参与国际联合验证实验，提供中国市场的代表性基质样本；3.针对鸡蛋中痕量DNC检测的基质干扰问题，提出了有效的净化方案优化建议，被纳入最终标准文本；4.参与标准工作组多次技术讨论和草案审阅，对标准的方法性能指标设定和质量控制条款提出了建设性意见。此外，该中心还积极推动标准的国内转化工作，为我国禽产品出口企业提供了技术培训和检测支撑，促进国内检测方法与国际贸易要求接轨。5标准实施意义与展望5.1对国际贸易的促进作用ISO23851:2026的发布为全球禽产品国际贸易中尼卡巴嗪残留检测提供了统一的技术基准。出口国与进口国之间可以基于相同的检测方法进行验证与互认，有效降低因方法差异导致的重复检测成本和贸易摩擦风险，对推动禽肉和禽蛋产品的跨境流通具有直接的现实意义。5.2对食品安全保障的提升该标准所规定的LC-MS/MS方法具有灵敏度高、特异性强、假阳性率低等突出优势，能够可靠地监测鸡蛋和鸡肉中痕量级DNC残留，为各国实施基于风险的残留监控计划提供了坚实的技术后盾。尤其对于鸡蛋中极低限量（如欧盟RP为10μg/kg）的合规判定，本方法的高灵敏度特征提供了充分的技术保障。5.3对检测技术发展的引领随着高分辨质谱（HRMS）、自动化样品前处理技术以及智能化数据处理方法在残留检测领域的日益普及，未来国际标准有望在继续保持三重四极杆质谱技术路径的基础上，逐步引入多残留同步筛查和快速定量相结合的标准化策略。ISO23851:2026的发布也为今后修订和升级更为高效、绿色、智能化的检测标准积累了宝贵经验。5.4展望展望未来，ISO23851:2026有望成为全球禽产品中尼卡巴嗪残留检测的基准方法，被各成员国采纳为国家标准或区域性标准。同时，标准发布后的推广应用仍面临一定的挑战，包括发展中国家实验室的仪器配置能力、技术人员培训以及标准物质的可及性等。因此，建议各国标准化机构加强技术合作和能力建设，借助ISO框架下的实验室能力验证计划推动该标准在全球范围内的落地实施与持续改进。6结论ISO23851:2026《鸡组织和鸡蛋尼卡巴嗪标志物残留量的测定液相色谱串联质谱法》的正式发布，是国际标准化组织在家禽产品兽药残留检测方法标准化领域的重要里程碑。该标准以科学严谨的方法学设计、经过国际联合验证的性能指标和明确的质量控制要求，为全球鸡组织和鸡蛋中尼卡巴嗪标志物残留检测提供了统一、可靠的技术规范。标准的实施将显著提升全球禽产品中尼卡巴嗪残留检测结果的可比性和互认程度，有助于打破技术性贸易壁垒，促进禽肉和禽蛋国际贸易的健康有序发展。同时，该标准的高灵敏度检测能力为严格履行国际食品安全限量要求、保障消费者健康提供了有力支撑。未来，随着国际社会对动物源食品安全要求的持续提高和检测技术的不断进步，该标准有望在全球范围内获得更广泛的应用，并持续引领兽药残留检测标准化的技术发展方向。参考文献[1]InternationalOrganizationforStandardization.ISO23851:2026Chickentissueandeggs—Determinationofmarkerresiduesofnicarbazin—Liquidchromatographytandemmassspectrometrymethod[S].Geneva:ISO,2026.[2]CodexAlimentariusCommission.MaximumResidueLimits(MRLs)andRiskManagementRecommendations(RMRs)forResiduesofVeterinaryDrugsinFoods:CX/MRL2-2024[S].Rome:FAO/WHO,2024.[3]中华人民共和国农业农村部.食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量:GB31650-2019[S].北京:中国农业出版社,2019.[4]EuropeanCommission.CommissionRegulation(EU)No37/2010onpharmacolog