CN119409693A α突触核蛋白聚集体结合剂及成像方法 （国立研究开发法人量子科学技术研究开发机构）

202080017070.12020.01.24提供与α突触核蛋白聚集体的结合选择性蛋白聚集体结合剂，其含有：式(I)所示的化合234所述式(I)所示的化合物的1个或1个以上原子是该原权利要求1～4中任一项所述的结合剂。权利要求5所述的结合剂。该诊断药是与α突触核蛋白聚集体相关的疾病的诊断药，或是所述疾病的治疗或预防 向投予了权利要求1～4中任一项所述的结合剂的受试生物体脑，从脑外照射第1波长5检测从投予了权利要求5所述的结合剂的受试生物基于用权利要求10或权利要求11所述的成像方法对被投予候补物质前后的受试生物其包含以下步骤：检测从投予了权利要求5所述的结合剂的受试生物体脑发出的放射基于所述检测的放射线的量及/或分布，对脑内α突触基于所述第1步骤中检测的放射线的量及/或分布数据、以及所述第2步骤中检测的放6789[0001]本发明涉及α突触核蛋白聚集体结合剂、α突触核蛋白聚集体的光学成像用组合或所述疾病的治疗或预防上的伴随诊断药、与积聚在脑内的物质相关的疾病的诊断试剂蛋白聚集体能够可视化，则有可能早期获得与这些疾病的诊断相关的接近于确证的信息过随着时间推移的成像等，可能有助于对以α突触核蛋白聚集体为靶的治疗或预防药的候[0003]作为已知的在生物体脑中与α突触核蛋白结合的PET(正电子放射断层造影术)探[0004]本发明人开发了对脑内积聚了的Tau蛋白进行成像(图像化)的新的化合物(参考献1的技术能够应用于例如阿尔茨海默症(AD)等由Tau蛋白的积聚所引起的疾病的治疗及选择性高的α突触核蛋白聚集体结合剂、使用了该α突触核蛋白聚集体结合剂的成像方法、[0010]本发明人发现在专利文献1所记载的化合物之中，具有丁烯基结构及苯并噻唑结所述式(I)所示的化合物的1个或1个以上原子是该原该诊断药是与α突触核蛋白聚集体相关的疾病的诊断药，或是所述疾病的治疗或所述的成像方法对被投予候补物质前后的受试生物体所检测出基于所述第1步骤中检测的放射线的量及/或分布数据、以及所述第2步骤中检测图4示出α突触核蛋白纤维溶液注射后6周的模型小鼠的双光子激光扫描荧光显微115C18161514131228262438364846等。22CH＝CH2322CH2_CH(OH)_3)等x含无机酸或无机碱或者包含有机酸或有机碱的、无毒性的酸或碱来形成在医药上容许的方式中，有效量是指能成功地对α突触核蛋白聚集体等脑内积聚物质进行光学成像及放射下式(I)所示的化合物在专利文献1所记载的化合物的基础上，不具有丁二烯结蛋白β聚集体的结合选择性相比，已确知下式(I)所示的化合物相对于α突触核蛋白聚集体因此，本发明的结合剂可作为分子探针来用于脑内积聚了的α突触核蛋白聚集体R1及R2[0065]一实施方式中，R1及R2各自独立地为氢或烯基，尤其是C2一8烯基，优选为烯丙基2[0066]一实施方式中，R1及R2各自独立地为氢或酰基，尤其是C1一8酰基、优选为乙COCH3COCH3是3是184R5是氢4CH2烷基是指构成结构式中所示的*标记的原子(结构式中若有2个*标记，则指其中任意1个或2个)是该原子[0086]α突触核蛋白聚集体结合剂可以包含在医药上容许的载体。在医药上容许的该载体的含有量可为α突触核蛋白聚集体结合剂的1～99重量％的量。α突触核蛋白聚集体结合剂例如可以制备成：能够以式(I)所示化合物相对于投予对象每单位体重(kg)的投予量为5ng/kg～5mg/kg的方式，来投[0093]作为放射成像，例如，可举出正电子放射断层造影术(PositronEmissionTomography，PET)、单光子放射计算机断层摄影术(Singlephotonemissioncomputed[0096]＜与α突触核蛋白聚集体相关的疾病的诊断药、或所述疾病的治疗或预防上的伴本发明的与α突触核蛋白聚集体相关的疾病的诊断药、或所述疾病的治疗或预防将使用上述诊断药而从对象得到的脑内α突触核蛋白聚集体的量及/或分布量的本发明的一实施方式是在与α突触核蛋白聚集体相关的疾病的治疗或预防上的医本发明的与积聚在脑内的物质相关的疾病的诊断试剂盒(以下，也称为诊断试剂[0099]作为与积聚在脑内的物质相关的疾病，可举出：与α突触核蛋白聚集体相关的疾明的结合剂相对于α突触核蛋白聚集体的结合选择性更高；而另一方面，与相对于α突触核性更高。[0101]本发明的诊断试剂盒既包含相对于α突触核蛋白聚集体的结合选择性较高的上述果(所检测出的光及放射线的量及/或分布将本发明的诊断试剂盒与淀粉样蛋白β的成像剂组合而成的诊断试剂盒能够用来区分成像优选为5ng～20μg/kg。投予放射能量优选[0110]＜与脑内α突触核蛋白聚集体相本发明的与脑内α突触核蛋白聚集体相关的疾病的治疗或预防药的筛选方法(以基于用上述＜光学成像方法＞或上述＜放射成像方法＞的成像方法对被投予候[0111]与脑内α突触核蛋白聚集体相关的疾病与上述＜与积聚在脑内的物质相关的疾病另外，将来自所检测的受试生物体的光或放射线的量及/或分布与其他正常的哺本发明的对脑内α突触核蛋白聚集体的积聚进行定量或判定的方法包含以下步[0115]求取对受试生物体所检测出的光的量及/或分布相比于其他正常的哺乳动物的差[0116]其他实施方式中，本发明的对脑内α突触核蛋白聚集体的积聚进行定量或判定的[0118]求取对受试生物体所检测出的光或者放射线的量及/或分布相比于其他正常的哺[0119]＜对积聚在脑内的物质的分类本发明的对积聚在脑内的物质的分类及积聚进行判定的[0121]由于包含检测从投予了与α突触核蛋白聚集体的结合选择性高的结合剂的受试生分布)与第2步骤的检测结果进行比较，则能够区分积聚在脑内的物质是否为α突触核蛋白基于第1步骤中检测出的放射线的量及/或分布数据、及第2步骤中检测出的放射线的量及/或分布数据，对积聚在脑内的物质的分类及积聚进行判定。该方法通过放射成[0124]由于包含检测从投予了与α突触核蛋白聚集体的结合选择性高的结合剂的受试生述物质的受试生物体脑发出的放射线的第2步骤，所以将第1步骤的检测结果(所检测的放射线的量及/或分布)与第2步骤的检测结果进行比较，则能够区分积聚在脑内的物质是否为α突触核蛋白聚集体及/或Tau蛋白聚集聚集抑制剂能够阻碍存在于生物体脑内的α突触核蛋白的聚集，从而能够预防或治疗哺乳合物在α突触核蛋白聚集时会与α突触核蛋白聚集体结合，从而能够抑制及阻碍α突触核蛋唑6醇)通过专利文献1的合成实施例3所记载唑6醇)通过专利文献1的合成实施例10所记载醇)通过专利文献1的合成实施例6所记载的方醇)通过专利文献1的合成实施例7所记载的方呋喃5醇)通过专利文献1的合成实施例24所记在乙腈(MeCN)中，使化合物1(5.01g，东京化成工业制造)与亚硝酸叔丁酯(t_在二氯甲烷(DCM)中，使化合物6(4.00g)与戴斯__马丁试剂(Dess_Martin在四氢呋喃(THF)中，使化合物15(6.80g)与二碳酸二叔丁酯(DIBOC)及六甲基二在三乙胺(TEA)与四氢呋喃(THF)的混合液中，在双(三苯基膦)钯(II)二氯(Pd(PPh3)2Cl2在三乙胺(TEA)和四氢呋喃(THF)的混合液中，在双(三苯基膦)钯(II)二氯(Pd(PPh3)2Cl2)、碘化铜(CuI)、三苯基膦(PPh3)的存在下，使ESIMS:m/zfound340.09(CalcdforC18H14FN3OS[M+H]+34在三乙胺(TEA)和四氢呋喃(THF)的混合液中，在双(三苯基膦)钯(II)二氯(Pd(PPh3)2Cl2)、碘化铜(CuI)、三苯基膦的存在下，使化合物13(596.6mg)与化合物1901的合成)液用HPLC法(HPLC条件：CAPCELLPAKC18UG8010mmx250mm，乙腈/50mM乙酸铵＝6/4，(100μL)及Tween80(100μL)的烧瓶中，在减压下馏去溶剂。将残余物溶解在生理盐水04的合成)5(4后，添加HPLC用溶剂(500μL)。将混合液用HPLC法(HPLC条件：WatersAtlantisprep体C05041是通过与上述C0504(TM2)的合成相类似的方法04的合成)HPLC用溶剂(500μL)。将混合液用HPLC法(HPLC条件：WatersAtlantisprepT310mm×C05042是通过与上述C0504(TM2)的合成相类似的方法来03的合成)5(4后，添加HPLC用溶剂(500μL)。将混合液用HPLC法(HPLC条件：WatersAtlantisprep体C06031是通过与上述C0603(TM1)的合成相类似的方法03的合成)反应容器中。将反应混合液在110℃下加热了10分钟。反应容器冷却后，添加4N盐酸HPLC用溶剂(500μL)。将混合液用HPLC法(HPLC条件：WatersAtlantisprepT310mm×2是通过与上述C0603(TM1)的合成相类似的方对路易体痴呆(DLB)患者、及阿尔茨海默症(AD)患者进行局部解剖，得到死后人使用了DLB患者脑杏仁核组织的后固定新鲜冷冻切片、及脱蜡了的AD患者脑额中[0171]另外，从相对于α突触核蛋白聚集体的选择性高于相对于与AD患者脑中形成的聚集体的选择性的这一点看，上述式(I)所示的这些化合物更优于具有丁二烯结构的化合物粉样蛋白β聚集体结合，BF_227相对于α突触核蛋白聚集体的结合弱于上述式(I)所示的化其中，采用以下方法将α突触核蛋白聚集体接种到了小鼠的纹状体。首先，将用核蛋白纤维溶液(溶于生理盐水中的小鼠α突触核蛋白纤维4mg/ml)3μl注入至2μm深的位具体而言，将α突触核蛋白纤维接种后小鼠脑切片及30μM的化合物在20％乙醇溶液中在室根据图3的结果，可知上述式(I)所示的化合物C05_05会与磷酸化α突触核蛋白所照Seylaz_Tomita法(Tomitaetal.JCerebBloodFlowMetab25,858_67,2005)来设置光荧光显微镜观察到了该化合物到达生物体的脑内乃至神经元内并与各个α突触核蛋白病使用microPETFocus220动物扫描仪(SiemensMedicalSolutions)来进行PET750keV的能量窗进行90分钟的放射扫描(emissionscan)。为避免该化合物的光消旋化[0176]用正电子放射性核素将上述式(I)所示的化合物C05_01标记后，静脉注射到正常30分钟的物体外成像观察到了该化合物行进到脑内乃至神经元内并与各个α突触核蛋白病变结合的使用microPETFocus220动物扫描仪(SiemensMedicalSolutions)来进行PET05(用正电子放射性核素标记了的C