CN119410587A 一种直肠肿瘤类器官芯片药敏检测试剂盒及其使用方法 （黑玉星岩国际科学技术(北京)有限公司）

一种直肠肿瘤类器官芯片药敏检测试剂盒本发明涉及一种直肠肿瘤类器官芯片药敏可在短时间构建满足药敏检测用的直肠肿瘤类2AdvancedDMEM/F12缓冲液基础培养基补足至2002.根据权利要求1所述的直肠肿瘤类器官芯片药敏检测试剂盒，其特征在于，所述所述50ml接种液由如下原料制成：Y27632，终浓度为8～9uM；白蛋白，终浓度为1~3.根据权利要求1所述的直肠肿瘤类器官芯片药敏检测试剂盒，其特征在于，所述AdvancedDMEM/F12缓冲液基础培养基补足至20034.根据权利要求1所述的直肠肿瘤类器官芯片药敏检测试剂盒，其特征在于，所述12～13μM和AdvancedDMEM/F12缓冲液基础6.根据权利要求1所述的直肠肿瘤类器官芯片药7.一种如权利要求6所述的直肠肿瘤类器官芯片药敏检测试剂盒的使用方法，其特征述直肠肿瘤单细胞悬液接种在所述1块微孔点阵类器S3：继续在所述1块微孔点阵类器官芯片上加入所述1瓶200ml类器官培养基制得直肠8.根据权利要求7所述的直肠肿瘤类器官芯片药敏检测试剂盒的使用方法，其特征在9.根据权利要求7所述的直肠肿瘤类器官芯片药敏检测试剂盒的使用方法，其特征在4[0002]原代肿瘤细胞药敏测试的目的主要是用于检测原代癌细胞在什么情况下对治疗~3g/L和PBS补足至50ml。终浓度为8～10nM；Wnt3a，终浓度为80～85ng/ml；5~2.5g/L和PBS补足至50ml。[0008]作为进一步改进，还包括1瓶20ml酶解液，所述20ml酶解液由如下原料制成：和AdvancedDMEM/F12缓冲液基础培养基6将所述直肠肿瘤单细胞悬液接种在所述1块微孔点阵类S3：继续在所述1块微孔点阵类器官芯片上加入所述1瓶200ml类器官培养基制得[0012]作为进一步改进，在S3步骤中：所述微孔点阵类器官芯片的规格包括5×5或5×[0014]图1为中国专利CN118440822A示例的基于开放腔室图案化阵列微流体的培养芯片图2为中国专利CN118440822A示例的基于开放腔室图案化阵列微流体的培养芯片汉赛维尔生物科技有限公司台盼蓝染色液（武汉普诺赛生命科技有限公司新鲜直肠肿适的穿刺样本用于体外培养advancedDMEM/F12（Gibco™,Dulbecco改良Eagle培养7式4[(R)1氨基乙基]N(4吡啶基)环己烷甲酰胺二盐酸盐B27添加剂（Gibco™B接种孔：为依次键合在所述开放通道区5下方的孔洞阵列层7和图案化阵列8；其中，所述流道的正下方对应所述孔洞阵列层7中的孔洞行以及所述图案化阵8中的图案行，且所述孔洞阵列层8中的孔洞和所述图案化阵列8的图案彼此一一对应以形成隔离腔室阵列；室盖板的两端具有与所述开放通道区5连接的进样口1，以及与所述培养液储存腔室6连接中的液体通过第二分流通道32分流输送至出样口2使流体均匀汇聚，避免流动过程中局部流通不畅带来的整体失衡，第二流速稳定腔室42为沿培养液储存腔室6出口方向空间高度[0021]使用时由进样口1直接加入培养物悬液，培养物在第一分流通道31及包括但不限8[0024]组织消化酶是为将肿瘤组织打散释放其中的直肠肿瘤细胞形成单细胞悬液之[0030]上述将细胞悬液接种到类器官芯片上可以采用两种方式，手动接种或自动接9物浓度梯度生成板上预制有所需检测的药物和检测活性细胞的荧光染料。在进行药敏检在后续的类器官培养过程中能够大大提升的类器官的形成率。试例6中改变了组织消化酶试验方法：取如表9中数量的直肠肿瘤单细胞用接种液重悬形成直肠肿瘤单细胞加在整个流道里或通过接种孔加入接种槽中（5