二维核磁简介

NMRspectroscopy

2021/5/271核磁共振实验的分类:1、连续波NMR实验（简称CW)，获得一维NMR谱，仅能做1H-NMR实验。（依赖于－个FID信号）2、单脉冲－傅立叶NMR实验（SPFT-NMR),获得一维NMR谱,在

图谱上完全等同于CW,只是扫描时间短，可以做氢谱，也可以做碳谱（依赖于－个FID信号）3、一维多脉冲傅立叶NMR实验，获得一维NMR谱。mPFT-NMR在SPFT-NMR基础上，得到特定的信息。（依赖于－个被调制FID信号）4、二维多脉冲－傅立叶NMR实验（2D－mPFT-NMR),得到二维NMR谱（堆积图或等高线图）。（依赖于两个FID信号的图谱）5、三维多脉冲－傅立叶NMR实验（3D－mPFT-NMR),得到三维NMR谱（堆积图或等高线图）。（依赖于三个FID信号的图谱）2021/5/272二维NMR的分类2D－NMR可以分为三大类：1、2D-J分解谱：（1）同核二维J分解谱（2）异核二维J分解谱2、2D-化学位移相关谱：同核化学位移相关谱（1H-1HCOSY)异核化学位移相关谱(1H-13CCOSY)异核远程相关谱(nJCHcorrelations等同于

HMBC谱

)3、多量子跃迁谱:HSQC谱(1H捡出的，异核单量子相干谱）HMQC谱(1H捡出的，异核多量子相干谱）HMBC谱(1H捡出的，异核多键相关谱）2021/5/273二维NMR图谱的表现形式1、堆积图2、等高线图

contour2021/5/274

多量子跃迁谱(

HSQC)的原理:2DNMR是两个独立频率变量的函数,共振吸收分布在由两个频率轴组成的平面上

,耦合常数在二维平面上展开,构成二位核磁共振平面图.

异核单量子相干谱只检测ΔM=±1的单量子跃迁,通过15N,1H的耦合关系(本文献)找出他们之间的连接关系.

2021/5/275文献所用方法简述1、实验部分：实验对照组1：15N,13C标记氧化型和还原型的cVIMP-Cys,分别测NMR。实验对照组2:15N标记的cVIMP-Cys,一组加入做标记的p97N,另一组不加.这组实验记录IcpIx/Iapo(加p97N组的峰高值与不加p97N组的峰高值的比值),并计算2021/5/276结果与讨论1、NMRSpectroscopyIndicatesthatcVIMP-CysIsPartially

Disordered（存在无规卷曲部分）进一步实验：目的：在单个残基水平上研究构象变化和结构特征。对49-71和124-189残基做标记，NMR图如下：2021/5/2772021/5/278A：氨基酸序列，黑色的未标记，蓝/绿表示氧化还原型可/不可转换的序列。B：蓝色的是氧化型，绿色的是还原型。箭头指示出有变化的峰。C、D：I、II区域放大图。虚线区：含NH2的侧链。内框：色氨酸信号。2021/5/279结论：标记区域具有很小的紧致的结构。对比发现二硫键对整个蛋白质的结构几乎没影响。173-189位残基的转换表明在C端有两个半胱氨酸。2021/5/2710A：用p97N滴定15N标记的cVIMP-Cys表明两个蛋白质