GBT 26352-2026 蜚蠊抗药性检测方法 德国小蠊生物测定法标准立项发展报告

StandardizationDevelopmentReport:BlattellagermanicaBioassayMethodforDetectionofInsecticideResistanceinCockroaches蜚蠊抗药性检测方法德国小蠊生物测定法标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:BlattellagermanicaBioassayMethodforDetectionofInsecticideResistanceinCockroaches摘要随着城市化进程的加速和全球气候变暖，蜚蠊（俗称蟑螂）作为重要的医学媒介生物，其传播疾病和引发过敏反应的风险日益受到公共卫生领域的高度关注。德国小蠊（*Blattellagermanica*）作为我国室内优势蜚蠊种群，其化学防治长期依赖拟除虫菊酯类、有机磷类等杀虫剂，由此导致的抗药性问题日趋严重，已成为制约媒介生物可持续控制的关键瓶颈。为规范和完善蜚蠊抗药性检测的技术体系，国家标准GB/T26352-2026《蜚蠊抗药性检测方法德国小蠊生物测定法》应运而生。本报告系统梳理了该标准的立项背景、编制原则、修订过程、核心技术内容及预期应用效果，重点介绍了标准中生物测定法的标准化操作流程、诊断剂量体系和质量控制要求。该标准的实施将为我国蜚蠊抗药性监测提供统一的技术依据，推动各地疾控机构和有害生物防制企业科学开展抗药性检测，为科学选药、合理用药和延缓抗药性发展提供重要的技术支撑，对提升我国病媒生物抗药性监测水平和公共卫生保障能力具有深远意义。关键词：蜚蠊；德国小蠊；抗药性检测；生物测定法；国家标准；病媒生物；化学防治Keywords:Cockroach;*Blattellagermanica*;InsecticideResistanceDetection;BioassayMethod;NationalStandard;DiseaseVector;ChemicalControl1引言1.1研究背景蜚蠊是世界上最古老且适应力极强的昆虫之一，隶属于蜚蠊目（Blattodea）。全球已知蜚蠊种类约5000余种，其中与人类生活环境密切相关的约20种。在我国，德国小蠊（*Blattellagermanica*）和黑胸大蠊（*Periplanetafuliginosa*）是室内优势种群，其中德国小蠊因其繁殖力强、生活史短、隐秘性好等特点，已成为我国城市人居环境中最难治理的卫生害虫之一。德国小蠊可机械性携带传播多种病原体，包括细菌（如沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌等）、病毒、原虫和寄生虫卵，同时其分泌物和排泄物中含有多种过敏原，可引发人群哮喘和过敏性皮炎等健康问题。随着城市化水平的不断提高和物流运输业的迅猛发展，德国小蠊的分布范围持续扩大，种群密度逐年上升，其危害已不局限于餐饮行业，而是扩展至居民住宅、医疗机构、学校、办公场所等多类公共场所，成为影响公共健康的重要媒介生物。1.2标准立项的必要性自20世纪80年代以来，化学杀虫剂一直是蜚蠊防治的主要手段。拟除虫菊酯类杀虫剂因其高效、低毒、广谱等优点被广泛使用，有机磷类和氨基甲酸酯类也在部分地区仍在使用。然而，长期、大量、不合理地使用化学杀虫剂，不可避免地导致德国小蠊对常用杀虫剂产生不同程度的抗药性。国内外大量研究证实，德国小蠊对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性倍数可达数十倍甚至数百倍，对有机磷类杀虫剂也存在不同程度的交互抗性。抗药性的产生和发展严重削弱了化学防治的效果，导致用药量不断加大、防治成本持续上升，同时增加了杀虫剂对环境和人体健康的风险。因此，开展系统的抗药性监测和检测，科学掌握德国小蠊对不同杀虫剂的抗性水平和时空分布动态，是制定合理防治策略、指导科学用药、延缓抗药性发展的基础和前提。然而，此前我国各地在蜚蠊抗药性检测工作中缺乏统一的技术标准，各检测机构在供试虫源选择、试虫饲养方法、生物测定操作流程、诊断剂量设定、结果判定标准等方面存在较大差异，导致检测结果的可比性和科学性不足，难以形成有效的区域间数据共享和趋势研判。因此，制定统一的蜚蠊抗药性检测方法国家标准具有极为迫切的现实需求。1.3国内外相关标准概况在国际层面，世界卫生组织（WHO）曾发布昆虫抗药性检测的指导性文件，推荐使用诊断剂量法和区分剂量法进行媒介昆虫的抗药性生物测定，但其主要针对蚊虫等卫生害虫。美国昆虫学会（ESA）和害虫管理专业人员协会（NPMA）亦发布了相关抗药性检测的指南，但各国因杀虫剂使用种类、害虫抗性机制及地域差异，检测方法不尽相同。在蜚蠊抗药性检测方面，国际上尚缺乏统一、系统的标准化检测方法文件。在国内，全国爱国卫生运动委员会办公室曾于20世纪90年代后期组织全国病媒生物抗药性监测工作，各地根据实际情况选用了不同的检测方法。原卫生部发布的《病媒生物抗药性监测方案》为各地开展监测提供了一定的参考框架，但在具体的检测技术操作层面仍存在标准化不足的问题。GB/T26352-2026正是在此背景下立项并启动修订工作，旨在建立一套与国际接轨又适应我国国情的蜚蠊抗药性检测标准。1.4标准修订与编制过程GB/T26352-2026是在原GB/T26352-2010《蜚蠊抗药性检测方法德国小蠊生物测定法》的基础上进行的修订更新。原标准自实施以来，为全国蜚蠊抗药性监测工作提供了重要的技术规范，在推动病媒生物防制工作科学化、规范化方面发挥了积极作用。随着抗药性检测技术研究的深入和实践经验的积累，以及新型杀虫剂的推广应用，有必要对原标准进行系统的修订和完善。修订工作由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所牵头组织实施，联合全国各省市疾病预防控制中心、高等院校和科研院所的多位专家组成标准修订工作组。工作组在全面回顾原标准实施情况的基础上，充分吸收近年来国内外抗药性检测研究的最新成果，结合我国各地蜚蠊抗药性监测的实践经验和技术需求，经过多轮专家论证、征求意见和技术审查，最终形成标准修订送审稿。该标准由国家标准化管理委员会于2026年5月25日正式发布，将于2026年12月1日起正式实施，届时将替代原有的GB/T26352-2010。2标准编制原则与依据标准的编制工作遵循了以下基本原则：（1）科学性原则。标准编制以昆虫毒理学、害虫抗药性遗传学和生物统计学的基本原理为理论基石，充分借鉴国内外抗药性检测的先进研究成果和技术方法，确保检测方法的科学性和检测结果的可靠性。每一种检测方法的选择和各项技术参数的确定，均有充分的实验数据和理论依据支撑。（2）实用性原则。标准在保证科学性的前提下，兼顾我国各级疾控机构和有害生物防制机构的检测条件和技术水平，在方法设计上尽量做到操作简便、设备要求适中，确保各级检测机构有能力实施。同时为不同条件的实验室提供可选的方法路径，充分体现标准的适用性和可操作性。（3）规范性原则。标准对供试虫源的标准、试虫的饲养条件、杀虫剂诊断剂量的确定、生物测定操作流程、数据统计分析和结果判定等各个环节，均做出严格而明确的技术规定，确保不同检测机构之间检测结果具有良好的可比性和可重复性。（4）先进性原则。标准修订工作充分跟踪国际抗药性检测技术的发展趋势，参考了WHO推荐的抗药性检测最新指南，积极吸纳分子检测技术和微量滴度法等新方法的研究进展，体现标准的技术前瞻性。（5）协调性原则。标准在技术内容和术语定义方面，与GB/T27770-2011《病媒生物密度控制水平蜚蠊》、GB/T31717-2015《病媒生物综合管理技术规范蜚蠊》等现行国家标准保持协调一致。3标准主要技术内容3.1术语和定义标准对以下核心术语做出了科学界定：德国小蠊（*Blattellagermanica*）：属蜚蠊目、姬蠊科、小蠊属，是世界范围内分布最广、最难防治的室内卫生害虫之一。成虫体长10~15mm，呈茶褐色，前胸背板有两条平行黑色纵带。德国小蠊雌虫一生可产卵鞘4~8个，每鞘含卵约30~48粒，世代周期短，环境适应力强。抗药性（insecticideresistance）：昆虫等靶标生物对杀虫剂产生耐受力的演化现象，即原本敏感的种群在持续接触杀虫剂的选择压力下，逐渐发展出能够耐受足以杀死同种正常敏感个体剂量的杀虫剂的能力，且这种能力具有可遗传性。生物测定法（bioassay）：利用活的生物体（或其离体组织、细胞等）来检测待测物（杀虫剂）的生物活性或毒性效应的实验方法，是抗药性检测中最基本、最直接的检测手段。诊断剂量（diagnosticdose）：能够区分敏感个体和抗性个体的特定杀虫剂剂量/浓度，通常以敏感品系剂量-死亡率回归线中LC₉₉（杀死99%敏感个体的剂量）的2倍值来界定。致死中浓度（LC₅₀）：在规定的实验条件下，杀死50%供试昆虫所需的杀虫剂浓度。抗性倍数（resistanceratio，RR）：田间种群与敏感品系的LC₅₀的比值，用于量化抗性水平，即RR=田间品系LC₅₀/敏感品系LC₅₀。敏感基线（susceptibilitybaseline）：对杀虫剂敏感的标准化验品系，在特定测定方法下对特定杀虫剂固有的敏感水平，通常以LC₅₀值及其95%置信区间来表示。3.2供试昆虫标准对供试德国小蠊的来源和标准化饲养做出了严格规定。敏感品系的标准化：标准要求采用国际公认或国内经严格筛选验证的敏感品系作为参比对照，其LC₅₀值必须处于标准规定的敏感基线范围内。敏感品系在实验室条件下常年饲养，不得接触任何杀虫剂，以防止实验室品系产生抗药性。饲养条件应满足温度26±1℃、相对湿度60%±5%、光照周期12L:12D的标准化要求。野外种群采集：检测种群应采集自需要进行抗药性监测的目标区域，采集时需记录采集地点的环境信息（室内/室外、场所类型）、采集方法和采集数量。每个采样点的德国小蠊采集量原则上不低于100只（含各虫态），确保有足够的个体建立实验室种群供检测使用。采集后应在尽可能短的时间内（不宜超过两代）开展抗药性检测，以避免实验室饲养条件引起的适合度改变影响检测结果的真实性。3.3生物测定方法标准核心部分规定了德国小蠊抗药性检测的三种生物测定方法及其适用条件。（1）药膜法（残留接触法）：该方法是目前国内外应用最广泛的蜚蠊抗药性检测方法，适用于大多数常用杀虫剂剂型的抗药性检测。其基本原理是：将规定剂量的杀虫剂原药（或标准品）用有机溶剂（如丙酮）溶解，均匀涂布于玻璃培养皿或玻璃板表面，待溶剂挥发后形成均匀的药膜，然后将供试德国小蠊成虫置于药膜表面接触一定时间，记录其击倒和死亡情况。标准对药膜的制备方法、杀虫剂剂量系列设置（预实验确定范围）、试虫接触时间（通常为1~5小时，依据杀虫剂品种而定）、恢复观察时间（24h或48h后记录最终死亡率）、重复次数（每个浓度至少设3个重复，每个重复不少于10只成虫）等均做出了具体规定。（2）微量滴点法（点滴法）：适用于测定杀虫剂对德国小蠊的毒力水平和建立LC₅₀。该方法使用微量进样器或微量点滴仪，将一定体积（通常为1μL）的杀虫剂药液准确滴加于德国小蠊成虫的前胸背板或腹部腹面，处理后置于正常饲养条件下观察。该方法对操作精度的要求较高，但对评估杀虫剂的固有毒力和精确建立毒力回归线具有特殊价值。标准对供试试虫的选择（羽化后2~5天健康成虫，雌雄各半）、麻醉方式（CO₂或冰浴麻醉，避免影响试虫活力）、点滴部位和药液体积、溶剂选择（丙酮为主，兼虑助溶剂）、温度控制（操作过程保持25±1℃）等进行了严格规定。（3）药饵法（摄食法）：针对胃毒型杀虫剂或以饵剂形式使用的杀虫剂产品，标准推荐采用药饵法进行抗药性检测。即将杀虫剂按一定浓度梯度掺入标准饵料（如面包屑、饼干粉或商品化饵料基质），供德国小蠊成虫自由取食一定时间后移入正常饲养条件观察死亡率。该方法模拟现场实际应用场景，适用于以胃毒作用为主的杀虫剂检测，但要求对试虫进行饥饿处理（12~24h），并严格控制取食时间和取食量，以减少个体间摄入量的差异。3.4抗性判定标准标准建立了明确的抗药性水平判定标准。在获得剂量-死亡率数据后，通过机率值分析法（Probit分析）计算毒力回归线Y=a+bX、LC₅₀值及其95%置信区间，并依据抗性倍数（RR）将抗性水平划分为以下四级：-敏感（RR<5）：该种群对被测杀虫剂处于敏感状态，该杀虫剂仍可作为防治该区域德国小蠊的优选药剂，但应密切监测抗性动态变化；-低度抗性（5≤RR<10）：表明该种群已开始产生抗性，应限制该杀虫剂的单一、连续使用数量，建议与其他作用机制的杀虫剂交替轮用；-中度抗性（10≤RR<40）：表明该种群已产生显著的抗药性，田间防治效果可能已出现下降，应暂停使用该类杀虫剂进行防治，需更换不同作用机制的杀虫剂；-高度抗性（RR≥40）：表明该种群对该杀虫剂已产生严重抗药性，常规剂量防治基本无效，应停止使用同类杀虫剂并采取综合治理措施。对于使用诊断剂量法的快速检测，标准规定以诊断剂量处理后的死亡率≥98%判定为敏感，死亡率在90%~98%之间判定为初步抗性（需进一步精确测定LC₅₀进行确认），死亡率<90%则判定为已产生抗性需要说明的是，抗性倍数的分级界限值参考了WHO的相关建议，并充分考虑了我国德国小蠊抗药性监测数据的实际分布特征。4主要修订单位——中国疾病预防控制中心传染病预防控制所介绍中国疾病预防控制中心传染病预防控制所（以下简称“传染病预防控制所”）是本次国家标准修订工作的牵头承担单位。该所是中国疾病预防控制中心下属的核心专业机构之一，是国家传染病预防控制和突发公共卫生事件应急处置的技术指导中心。传染病预防控制所在病媒生物防制领域具有深厚的历史积淀和技术积累，设有的病媒生物防制室在病媒生物抗药性监测与防控技术研究方面居于国内领先水平。该室长期承担全国病媒生物抗药性监测网的技术指导和质量管理职能，积累了覆盖全国各省市、长达数十年的蜚蠊抗药性监测数据，建立了系统的德国小蠊敏感品系（如“中国疾病预防控制中心敏感品系”）的标准化饲养和保种体系，繁殖了多种常用杀虫剂的诊断剂量库，为我国蜚蠊抗药性监测和研究奠定了坚实的基础。近年来，该所主导或参与制修订了多项病媒生物防制领域的国家标准和行业标准，包括蜚蠊密度监测方法、蜚蠊抗药性检测方法及卫生杀虫剂药效评价方法等。在本次标准修订过程中，传染病预防控制所组织全国12个省市疾病预防控制中心开展了多中心协同验证实验，共计完成了来自全国不同地理区域的德国小蠊野外种群对6类常用杀虫剂的抗药性同步检测，采集了丰富的第一手实验数据，为标准中诊断剂量的修正确证和方法参数的优化提供了坚实的实证基础。同时，该所根据国内外抗药性监测技术的最新