T-SHNX 002-2025 生乳中16种杀菌剂残留量的测定 气相色谱-串联质谱法

ICS67.100.01SHNXDeterminationof16fungicidesresiduesinrawmiT/SHNX002—2025本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由上海奶业行业协会提出并归口。本文件起草单位：上海市农产品质量安全中心、上海市动物疫病预防控制中心、光明牧业有限公司、光明乳业股份有限公司、上海市质量监督检验技术研究院、上海奶业行业协会、上海必诺检测技术服务有限公司、上海农林职业技术学院。本文件主要起草人：祁兵、沈斯文、王敏、王霞、沈秀平、曹莹、吴剑平、朱伟、徐致远、郑小平、陈晶、陈小弟、金佳伟。1T/SHNX002—2025生乳中16种杀菌剂残留量的测定气相色谱-串联质谱法本文件规定了生乳中嘧霉胺、阿拉酸式苯-S-甲基、三唑酮、戊菌唑、氟吡菌酰胺、三唑醇、醚菌酯、腈菌唑、吡噻菌胺、氟吡菌胺、苯菌酮、异丙噻菌胺、吡唑萘菌胺、联苯吡菌胺、苯并烯氟菌唑和嘧菌酯残留量的气相色谱-串联质谱测定方法。本文件适用于生牛乳中嘧霉胺、阿拉酸式苯-S-甲基、三唑酮、戊菌唑、氟吡菌酰胺、三唑醇、醚菌酯、腈菌唑、吡噻菌胺、氟吡菌胺、苯菌酮、异丙噻菌胺、吡唑萘菌胺、联苯吡菌胺、苯并烯氟菌唑和嘧菌酯残留量的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理试样中的杀菌剂用乙腈超声提取，提取液经分散固相萃取净化，净化液经浓缩后，气相色谱-串联质谱仪测定，基质匹配外标法定量。5试剂或材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯。5.1试剂5.1.1丙酮：色谱纯。5.1.2乙腈：色谱纯。5.1.3乙酸乙酯：色谱纯。5.1.4无水硫酸钠。5.1.5氯化钠。5.2标准品16种杀菌剂标准品信息参见附录A中表A.1，纯度≥98%。5.3标准溶液配制5.3.1标准储备液（1000mg/L称取10mg（精确至0.1mg）标准品，分别用丙酮溶解并定容至10mL，避光置于－18℃以下条件保存，有效期1年。5.3.2混合标准溶液（5mg/L准确吸取50μL各标准储备液于10mL容量瓶中，用丙酮稀释并定2T/SHNX002—2025容至刻度，避光－18℃以下条件保存，有效期1个月。5.3.3混合标准工作液：准确吸取混合标准溶液适量，用乙酸乙酯稀释成质量浓度为0.005mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L的系列混合标准工作溶液。现用现配。5.4材料5.4.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：粒径40μm～60μm。5.4.2十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：粒径40μm～60μm。5.4.3有机相微孔滤膜：0.22μm孔径，尼龙材质。6仪器和设备6.1气相色谱-串联质谱仪：配有电子轰击源（EI）。6.2分析天平：感量0.01mg和0.01g。6.3涡旋混合仪。6.4超声波仪。6.5冷冻离心机：转速≥5000r/min。6.6氮吹仪。7试样的制备与保存7.1试样的制备取适量新鲜或解冻的空白或供试试样，混匀。a)取混匀后的供试样品，作为供试试样；b)取混匀后的空白样品，作为空白试样。7.2试样的保存-18℃及以下保存。8测定步骤8.1提取与净化称取10.00g供试试样于50mL离心管中，精确加入10mL乙腈涡旋混匀，超声提取5min后，加入10g无水硫酸钠、1.5g氯化钠，剧烈振荡1min，4℃条件下5000r/min离心5min，吸取4mL上清液至含有1g无水硫酸钠、100mgPSA、120mgC18的离心管中，涡旋混匀1min，4℃条件下5000r/min离心5min。精确吸取2mL上清液，置于40℃水浴中氮气吹干，精确加入1mL乙酸乙酯溶解，混匀，过有机相微孔滤膜，供气相色谱-串联质谱仪测定。8.2基质匹配标准工作曲线的制备选择空白试样按照8.1步骤进行前处理，置于40℃水浴中氮气吹干，分别加入系列混合标准工作溶液1mL溶解残渣，过有机相微孔滤膜，制备0.005mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L的系列基质匹配标准工作溶液，供气相色谱-串联质谱仪测定。以待测物定量离子峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线，拟合回归方程并计算回归系数。8.3测定8.3.1气相色谱参考条件3T/SHNX002—2025a)色谱柱：14%腈丙基苯基-86%二甲基聚硅氧烷石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm），或b)色谱柱升温程序：60℃保持1min，然后以25℃/min程序升温至210℃,再以10℃/min升温至300℃,保持7min；c)载气：氦气，纯度≥99.999%，流速1.2mL/min；d)进样口温度：280℃;e)进样量：1μL；f)进样方式：不分流进样。8.3.2质谱参考条件a)电子轰击源：70eV；b)离子源温度：280℃;c)传输线温度：280℃;d)溶剂延迟：4min；e)多反应监测：每种杀菌剂分别选择一对定量离子、一对定性离子。每种杀菌剂的保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压，参见表1。表116种杀菌剂的保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压VV12354567898.3.3定性测定在相同测试条件下，试样溶液中目标待测物与校正标准溶液中的保留时间偏差在±0.1min以内；且检测到的相对离子丰度，应与浓度相当的校正标准溶液相对离子丰度一致，其允许偏差为±40%。空白基质匹配标准溶液特征离子质量色谱图见附录B中图B.2。8.4平行试验按8.1～8.3对同一试样进行平行试验测定。8.5空白试验4T/SHNX002—2025除不加试样外，均按8.1～8.3进行测定。9结果计算试样中各待测物残留量以质量分数ω计，单位为毫克每千克（mg/kg），按公式（1）计算。ρ——从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中被测物的质量浓度，单位为毫克每升（mg/LV）；V2——样品溶液最终体积，单位为毫升（mL）；V3——吸取用于浓缩的提取液体积，单位为毫升（mL）；）；10检测方法的灵敏度、准确度、精密度10.1灵敏度本方法各待测物的检出限为0.005mg/kg，定量限为0.01mg/kg。10.2准确度本方法在0.01mg/kg～0.1mg/kg添加浓度水平上的回收率为60%～120%。10.3精密度在重复性条件下，获得的2次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值不大于该算术平均值的15%。1T/SHNX002—202516种杀菌剂标准品的信息表A.116种杀菌剂标准品的信息1234567892T/SHNX002—2025空白基质匹配标准溶液色谱图0.90.80.70.60.50.40.30.20.106878448131625220202122保留时间/min图B.116种杀菌剂的GC-MS/MS总离子流色谱图(0.1mg/L)1——嘧霉胺2——阿拉酸式苯-S-甲基3——三唑酮4——戊菌唑5——氟吡菌酰胺6——三唑醇7——醚菌酯8——腈菌唑9——吡噻菌胺1