DB37-T6041-2026近海新污染物评价方法浮游植物毒性试验

37验Evaluationmethodofemergingpollutantsincoastalwaters—PhytoplanktontoxicityI本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件起草单位：山东省海洋发展研究会、中国海本文件主要起草人：赵妍、唐学玺、刘昕、郑永允、张碧涵、刘溱、宋强、于倩倩、王雅1近海新污染物评价方法浮游植物毒性试验GB/T6682分析实验室用水规格和GB/T21805—2025化学品藻类生长抑制SC/T9402—2010淡水浮游生YS/T1179.3—2023铝灰渣化学分析方法第3部分：碳、氮含量新污染物emergingpolluta纳入环境管理或者现有管理措施不足的有毒有害半数有效浓度halfeffectiveconcentra无可观察效应浓度noobservedeffectconcent24缩略语DMSO：二甲基亚砜（DimethylSulfoxidETRmax：最大电子传递速率（MaximumElectronTransportationRateNPQ：非光化学猝灭（Non-PhotochemicalQuench）PSII：光系统II（Photosyste指标（细胞密度）和光合指示指标（PSII光合作用参数、叶绿素浓度），d)血球计数板：计数室0.1mm3，深度误差不大于2％，大方格边长误差不大于1%;h)真空冷冻干燥机；）；）：3通过稀释贮备液制备设定浓度的试验溶液。不同溶解性新污染物的新污染物试验溶液浓度的检测见GB/T39665—2020、GB/选择山东近海并具有受试物敏感性的浮游植物种类，见附b)使用高温灭菌的培养容器。按照GB/T21805—2025中8.2.1设置不少于5个梯度，浓度梯度的间隔系数不小于3.2，每个浓度梯度设置3个平行。应同时设白对照组。若使用助溶剂，还应增设助溶剂对照组，并设置不少于3个平行，且在所有试验组中均等量％，4冰箱(-20℃),保存期不长于60d。c)提取液于4℃下离心(4500g,10min),上清液用于测定。a)取60mL浮游植物样品，离心(4500g,10(-80℃),保存期不长于60d。生长率(μ)按公式(2)计算：5t;——时间点i,单位为天(d)。TU值按公式(3)计算：叶绿素浓度按公式(4)～公式(6)计算： (4)Cchlb=21.03×E647-5.43×E664-2 (5)Cchlc=24.5细胞固碳速率按公式(7)计算：Cc——细胞中的含碳率，%;Mc——碳的相对分子质量。生物量生产力(P)按公式(8)计算：毒性级别高毒(+++)中毒(++)低毒(+)实际无毒(一)毒性级别快速降解物质低毒(+)实际无毒(一)不可快速降解物质低毒(++)多污染物毒性评价按照表3进行分级，按公式(9)和公式(10)计算：67毒性级别相加关系拮抗关系协同关系抑制作用与空白对照组相比，Fv/Fm、ETRm和斜率值降低；促进作用与空白对照组相比，Fv/Fm、ETRm和斜率值升高；与空白对照组相比，NPQ值降低叶绿素合成过程抑制作用与空白对照组相比，Chla、Chlb和Chlc浓度降低促进作用与空白对照组相比，Chla、Chlb暗反应过程固碳速率抑制作用与空白对照组相比降低促进作用82)理化特性：物理性状（如颜色、形态、气味）、溶解度、蒸汽压、分配系数、稳定性、2)试验设计：试验容器（材质、容量、型号）、培养体积和试验开始时的藻细胞密度；4)试验溶液的配置方法，包括溶剂的使用、溶液浓度的检测（包括检测限、回收率）；4)受试物对藻类的光合指示指标评价，如光反应过程评价、叶绿素合成过程评价及暗反应5)各受试组中任何对藻类种群生长、光合作用有显著刺激效应的结7)试验结果讨论，包括观察到的可能影响结果的事件，偏离试验准则的情况、后果及相关9不同溶解度的山东近海新污染物的分类及试验溶液储备液制备方溶解，或者采用超声（200W～300W，30min）、加热（根据试验样品性质等方法增溶。若使用助溶剂，终浓度应不高于NOEC值，且在试验组中浓度保持一致。若仍不能完全溶解，则实际溶解的样品浓度为最终贮备液浓度按照标准样品的浓度（液体样品）或式试验前将贮备液超声分散（200W~种的培养温度设为20℃±1℃,培养）～），ThalassiosiralespseudonanaPlatymonashelgolandica温度设为25℃±1℃,培养光照条件2AlexandriumtamarenseAlexandriumtamarense使用加Sia的设为20℃±1℃,培养光照条件设为22hProrocentrumminimumIsochrysisgalbana温度设为25℃±1℃,培养过程中设2M2O—Na2EDTA2O—2ONa2MoO42O2O2OMnCl22O——M2O—Na2EDT