微生物的培养与应用习题课白治平

微生物的培养与应用习题课平学校某省市第八十中学学科：生物（人教版）年级：高二下学期学习目标和内容学习目标巩固实验室微生物培养的基础知识学习内容微生物培养与应用习题讲解。1.防止外来杂菌的入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（）

A.实验室里可以用紫外线或化学药剂进行消毒B.接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C.在实验室中，不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染D.玻璃器皿和金属用具等可以采用干热灭菌【答案】

B【解析】B错误，灼烧应该用酒精灯火焰的外焰；A正确，对实验室消毒可用紫外线或化学药剂；C正确，基于安全考虑，防止被微生物感染，在实验室中吃东西、喝水等行为应该被禁止，且离开实验室时一定要洗手；D正确，能耐高保持干燥的玻璃器皿和金属用具等可以采用干热灭菌。微生物的实验室培养2.甲、乙、丙为三种微生物，下表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（）培养基粉状硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH4）2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCl20.5gⅠ＋＋＋＋－＋＋＋Ⅱ＋＋＋－＋＋＋＋Ⅲ＋＋＋＋＋＋＋＋注：“＋”表示培养基中加入了这种物质，“－”表示培养基中没有加入这种物质。【答案】

DA.甲、乙、丙都是异养微生物B.甲、乙都是自养微生物，丙是异养微生物C.甲是异养微生物，乙是固氮微生物，丙是自养微生物D.甲是固氮微生物，乙是自养微生物，丙是异养微生物微生物的实验室培养A.甲、乙、丙都是异养微生物B.甲、乙都是自养微生物，丙是异养微生物C.甲是异养微生物，乙是固氮微生物，丙是自养微生物D.甲是固氮微生物，乙是自养微生物，丙是异养微生物培养基粉状硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH4）2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCl20.5gⅠ＋＋＋＋－＋＋＋Ⅱ＋＋＋－＋＋＋＋Ⅲ＋＋＋＋＋＋＋＋【解析】Ⅰ是无氮培养基，适于培养或筛选固氮微生物；Ⅱ是不含有机碳源的培养基，能在其上正常生长繁殖的是自养微生物；Ⅲ营养成分全面是完全培养基，适合多种微生物的培养。根据“甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能”可以推断：甲是具有固氮能力的微生物，乙和丙不具有固氮能力；根据“乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能”可以推断：乙是自养型微生物，甲、丙不是自养型微生物；据题目信息可知，丙只能在Ⅲ中生长，结合前面的分析可一推断：丙是异养型微生物；微生物的实验室培养【答案】

D3.如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，错误的是（）A.该操作步骤是接种，方法是平板划线法B.除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端C.图中细菌密度最小的是5处D.该接种方法适用于细菌的计数【答案】

D【解析】图中所示的纯化方法是平板划线法，该方法要求连续划线多次，一次划线完成后，要对接种环进行灼烧灭菌，下一次划线要与上一次划线的末端交叉，随着划线次数增加，划线末端的菌体数量逐渐减少，直至划线末端细菌呈单个存在。平板划线法能得到单个菌体增殖形成的菌落所以该方法可用于纯化大肠杆菌等。微生物的实验室培养【思考】为什么平板划线法不适用于对微生物计数？选修一P18微生物的实验室培养4.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是（）A.都只能用于固体培养基接种B.都需要对菌液进行梯度稀释C.接种培养后均可获得单菌落D.接种工具使用后均需要灭菌【答案】

B【解析】B错误，平板划线法通过划线操作达到“稀释”菌种的目的；A正确，平板划线法和稀释涂布平板法都只能用于固体培养基接种；C正确，用平板划线法和稀释涂布平板法接种培养后均可获得单菌落；D正确，为防止污染环境和感染操具使用后均需要灭菌。微生物的实验室培养5.将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理，并放置在不同的境中，培养24小时后，所得结果如下表：根据上述实验结果所作出的判断，错误的是（）

A.编号a和f比较可知，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊B.根据编号b和c的观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强C.将编号e和a的结果比较可知，0℃的环境不适合大肠杆菌生长D.若揭开编号f的盖子，24小时后培养基表面会出现浑浊编号abcdef处理方法接种大肠杆菌接种大肠杆菌，并覆盖一吸有抗生素X的圆纸片接种大肠杆菌，并覆盖一吸有抗生素Y的圆纸片接种大肠杆菌，表面全被醋覆盖接种大肠杆菌无接种菌40℃40℃40℃40℃0℃40℃观察结果全表面呈浑浊纸片现一片清晰区，其余表面呈浑浊全表面呈浑浊全表面清晰全表面清晰全表面清晰【答案】

B微生物的实验室培养【解析】B错误，b含有抗生素的纸片覆盖处的透明区叫抑菌圈，抑菌圈的大小与抗生素对细菌的抑制、杀伤作用有关。b有抑菌圈，c没有抑菌圈，说明抗生素X对大肠杆菌有抑制作用，抗生素Y对大肠杆菌没有抑制作用。抗生素的杀伤作用一般是针对某种或某类细菌的，仅通过对大肠杆菌的抑制作用不能判断抗生素X和Y的杀菌能力；根据上述实验结果所作出的判断，错误的是（）

A.编号a和f比较可知，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊B.根据编号b和c的观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强C.将编号e和a的结果比较可知，0℃的环境不适合大肠杆菌生长D.若揭开编号f的盖子，24小时后培养基表面会出现浑浊【答案】

BA正确，a、f的区别在于是否接种了大肠杆菌，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊；C正确，e、a形成对照，其变量是，可知0℃不适合大肠杆菌生长；D正确，空气中有多种微生物，f暴露在空气中后，空气中的细菌可能自然接种，菌体繁殖使培养基表面出现浑浊。微生物的实验室培养6.有一种传言“手机上的细菌比钮上多”。某人通过实验进行了检验，下图为实验方法和结果。

（1）该实验需制备培养基，培养基的营养成分一般包括水、碳源、

等。【答案】（1）氮源和无机盐【解析】（1）微生物培养基的营养成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐等。微生物的实验室培养回答下列相关问题：（2）在实验中需要排除培养基被污染对实验的影响，对于固体培养基常采用的方法是

。【答案】（2）设置空白对照组【解析】（2）将未接种的空白培养基与接种组在相同且适宜条件下一起培养，观察空白培养基上是否有菌落产生，若无菌落产生，则培养基未被污染；若有菌落产生，说明培养基被污染。微生物的实验室培养（3）据图，两实验组均采用

法接种，该方法需要

（填字母，多选）。

【答案】（3）稀释涂布平板BCDE

【解析】（3）根据图中菌落的分布可知两实验组均采用稀释涂布平板法接种，该方法需要酒精灯（操作都在酒精灯火焰旁进行）、移液管（吸取菌液）、涂布器（涂布菌液）、无菌水（稀释菌液），而接种环用于平板划线法。A.接种环B.酒精灯C.移液管D.涂布器E.无菌水微生物的实验室培养选修一P19（4）结果表明，手机屏幕和钮上都存在多种微生物。两组实验操作均正确且完全一致，但实验结果截然不同，你认为原因可能是

。【答案】（4）手机的取样和钮的取样都不相同（答案合理即可）【解析】（4）两实验组实验操作均正确且完全一致，但实验结果截然不同，原因可能出在取样过程：样本是否随机抽取、手机的取样和钮的取样操作过程、样本数量是否足够等。微生物的实验室培养（5）根据实验结果，为了保证健康，手机使用一段时间后，应对手机进行

处理。【答案】（5）消毒【解析】（5）使用过程中，人的手部主要接触的是手机的外表，实验结果说明在手机外表确实有细菌，为了保证健康，每隔一段时间，应该对手机外表进行消毒处理，在消毒过程中要注意避免损害手机的做法。还有一条预防疾病的有效措施就是勤洗手。微生物的实验室培养7.沙门氏菌是一类常见的食品致病菌，可使人得肠胃炎、伤寒等，食品安全法要求其限量值为0，即样品中不得检出这类致病菌。现要检测某批次的火腿肠中是否含有沙门氏菌，要先用到1号培养基。请回答下列问题：（1）抽取火腿肠检测样品要遵循

原则。1号培养基从物理性质上看属于

培养基；检测样品要先用1号培养基培养，目的是

。【答案】（1）随机性液体增加沙门氏菌（目的菌）的数量【解析】（1）取样应遵循随机性原则。由于1号培养基不含琼脂，因此为液体培养基；液体培养基中营养物质和菌体的接触更充分，有利于沙门氏菌的生长繁殖，增加其数量。1号培养基成分含量(/1000mL)牛肉膏5g蛋白胨5g三号胆盐3.5g柠檬酸钠8.5g煌绿0.00033g乳糖10g三号胆盐、柠檬酸钠和煌绿可抑制大多数菌群，但不影响沙门氏菌的生长微生物的实验室培养（2）如图

（填“A”或“B”）表示采用平板划线法分离细菌，操作时，接种环通过

灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是

。【答案】（2）B灼烧将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落【解析】（2）接种环等金属用具直接在酒精灯外焰灼烧，达到彻底灭菌的效果。由图可知，B为平板划线法得到的结果，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落，每次划线后都要对接种环灼烧灭菌。微生物的实验室培养（3）接种好的培养皿在恒培养时要

（填“正”或“倒”）置，目的是①避免水分过快蒸发；②

。培养基上产生的单个菌落在生态学中被称为

。【答案】（3）倒防止冷凝水滴落在培养基上种群【解析】（3）一套培养皿由皿底和皿盖组成，皿底盛放培养基。接种好的培养皿在恒培养时一般要倒置——皿底在上，这样做可以避免培养基中的水分过快蒸发，还可以防止冷凝水滴落在培养基上，培养基表面积水会影响菌落生长。由单个菌体形成的单个菌落在生态学中被称为种群。微生物的实验室培养1.在微生物学中，将允种类的微生物生长，同时抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做（）【答案】

C【解析】选择培养基允的目标微生物生长繁殖，同时抑制或杀死其他微生物。A.鉴别培养基 B.加富培养基 C.选择培养基 D.基础培养基土壤中分解尿素的细菌的分离与计数选修一P22基础培养基：按一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质配制的培养基。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数鉴别培养基：在培养基中添加与目的菌的无色代发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基。加富培养基：也称营养培养基，即在培养基中加入有利于某种微生物生长繁殖所需的营养物质，使这类微生物的增殖速度比其他微生物快，从而使这类微生物能够在混有多种微生物的情况下占优势地位的培养基。这些特殊营养物质包括血浆、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。2.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是（）【答案】

C【解析】分离土壤中分解尿素的细菌，使用的是选择培养基——尿素作为唯一的氮源，所以不能添加硝酸盐，分解尿素的细菌属于异养生物，培养基中要有有机碳源。选择培养可用固体培养基也可用液体培养基，液体选择培养基有利于目的菌的生长繁殖，固体选择培养基便于获得单菌落。选项尿素琼脂葡萄糖硝酸盐A＋＋＋＋B－－－－C＋＋＋－D＋－－＋注：“＋”表示加入，“－”表示不加。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数3．产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）A．一个细菌、液体培养基 B.菌、液体培养基C．一个细菌、固体培养基 D.菌、固体培养基【答案】

C【解析】菌落是一个细菌的子细胞群体，一般在固体培养基上形成，有一定的形态结构，肉眼可见。菌落可作为菌种鉴别的重要依据。土壤中分解尿素的细菌的分离与计数选修一P24土壤中分解尿素的细菌的分离与计数4.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（）A.在用移液管吸取菌液进行梯度稀释时，可用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀B.对4号试管中的稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为5号试管的10倍C.5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×108D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低【答案】

C土壤中分解尿素的细菌的分离与计数【解析】C错误，5号试管的结果表明每克土壤中菌株数为（168＋175＋167）÷3÷0.1×106＝1.7×109；【答案】

CA正确，在用移液管吸取菌液进行梯度稀释时，可用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，目的是使菌液与水充分混匀；B正确，对4号试管中的稀释液进行平板培养，理论上得到的平均菌落数可能是5号试管的10倍；土壤中分解尿素的细菌的分离与计数D正确，用稀释涂布平板法得到的结果往往比活菌的实际数目低，因为有可能多个细菌形成一个菌落。选修一P225.下列有关微生物分离、培养和计数的叙述，正确的是（）A.分离土壤中微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养B.测定土壤中细菌数量时，一般选用103～107倍的稀释液C.测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法或平板划线法进行计数D.统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落【答案】

D【解析】D正确，统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落。A错误，分离土壤中微生物时，若对土壤样品进行灭菌会杀死土壤微生物，分离培养不可能完成；B错误，由于土壤中各类微生物的数量不同，在进行分离和计数时，就需要按照不同的稀释度分别进行涂布，测定土壤中细菌的数量一般选择104、105、106倍的稀释液，也可通过预实验选择合适的稀释梯度；

C错误，平板划线法可用于纯化培养，但不能用于计数；土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.下列关于纤维素酶的说法，错误的

（）A.纤维素酶是一种复合酶，能将纤维素分解为葡萄糖B.纤维素酶的组成单位是氨基酸C.纤维素酶在微生物细胞内合成并发挥作用D.筛选可产生纤维素酶的微生物，应在富含纤维素的环境中取土样A正确；B正确，纤维素酶的本质是蛋白质，基本单位为氨基酸；D正确，筛选可产生纤维素酶的微生物，应在富含纤维素的环境中取土样。分解纤维素的微生物的分离【答案】

C【解析】C错误，纤维素酶在微生物细胞内合成，分泌到细胞外分解纤维素；选修一P272.下列关于纤维素酶的说法，错误的（）A.纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分B.纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C.纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D.葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡糖【答案】

D【解析】D错误，纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，C1酶、Cx酶使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖．纤维素是细胞壁的主要成分，因此利用纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁；分解纤维素的微生物的分离3.在“分解纤维素的微生物的分离”实验中，下列有关选择培养时用液体培养基的目的是（）A.用液体培养基可以使菌体充分利用培养基中的营养B.纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C.用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌D.用液体培养基可获得大量菌体【答案】D【解析】用液体培养基振荡培养可以保证充分供氧，也利于纤维素分解菌充分利用纤维素等营养，促进纤维素分解菌的生长和分裂，可以起到对纤维素分解菌的扩大培养和富集作用，获得大量的菌体。分解纤维素的微生物的分离选修一P294.下列关于纤维素分解菌分离实验的说法不正确的是（）A.通常采用刚果红染色法筛选纤维素分解菌B.从土壤中分离含量较多的微生物时，选择培某省市略C.该实验用到选择和鉴别培养基D.在用刚果红染色法中，若将微生物培养在事先加入刚果红的培养基上，出现透明圈的菌落肯定为所需菌种【答案】D【解析】D错误，出现透明圈的菌落不一定是纤维素分解菌,不能排除某些具有降解色素的能力微生物在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈；A正确；B、C正确，从土壤中分离含量较多的微生物时，选择培某省市略，但需要进行鉴别培养；分解纤维素的微生物的分离选修一P28选修一P30分解纤维素的微生物的分离5.蓝色牛仔裤常选用质地较粗的棉布料，