CN119488606A 靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米颗粒及其制备方法和应用 （重庆医科大学附属口腔医院）

靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米颗粒及其制备方法本发明公开了一种靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米部烷基链溶液的制备，(4)制备疏水段和中间段水段多肽的连接复合物溶液混合，透析去除合物的两亲性自组装及三种多肽复合物的共组高ROS的微环境，释放内皮屏障修复肽修复内皮21.一种靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米颗粒的(1)亲水段头部多功能肽溶液的制备，所述多肽为C端半胱氨酸修饰的黏附分子靶向屏障修复肽序列为MPPILRFDHPFLFIIFEEHTQSPIFVGKVVDPTHKC，补体拮抗肽序列为Ac_Cys_(3)疏水端尾部烷基链溶液的制备，取末端修饰两个赖氨酸的碳十六烷基链(C16_2.根据权利要求1所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多3.根据权利要求2所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多4.根据权利要求3所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多5.根据权利要求4所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多6.根据权利要求5所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多37.一种权利要求1_6任一项所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米颗粒的制备方法制备得到的靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三8.一种权利要求7所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米颗粒在制备治疗急性炎症相关疾病药物中毒血症或急性肺损伤或急性呼吸窘迫综合征或急性肝衰竭4募集级联的三段式自组装复合多肽纳米颗粒及其制备方法和构和自组装纳米结构为研究人员研究它们在生物医学方面的广泛应用提供了无数的可能由于C16为基序的分子链具有优异的生物相容性和可修饰性，它可以作为药物传递系统和[0003]内皮细胞依靠机械和体液因子维持内皮屏障功能，避免液体和溶质的不适当流接以细胞旁方式穿过内皮屏障，这些细胞_细胞连接是由内皮细胞的粘附连接(adhesionjunction,AJ)和紧密连接(tightjunction,TJ)两种主要的蛋白质复合物形成的。内皮屏管细胞粘附分子_1(VCAM_1)是整合素VLA4(α4β1)在内皮细胞的受体，正常条件下内皮细胞中不表达，受炎症刺激后活化的内皮细胞高表达VCAM_1以响应细胞因子(例如TNF_α和5(ECs)上的VCAM_1，可以达到靶向炎症内皮细胞的目的。文献中描述了各种靶向VCAM_1、明对细胞表面的ICAM_1受体具有高亲和力。由Fuior等人描述的VCAM_1亲和肽成功地将脂控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米颗粒的制备方法第二目的在于提供该靶皮屏障修复肽序列为MPPILRFDHPFLFIIFEEHTQSPIFVGKVVDPTHKC，补体拮抗肽序列为Ac_6[0010](4)制备疏水段和中间段的连接复合物，将疏水段尾部烷基链溶液与中间段连接体ROS响应缩硫酮溶液混合反应得到疏水段与中间复合物溶液从有机相变成水相，促进复合物的两亲性自组装及三种多肽复合物的共组装，[0016]本发明的PB缓冲液配制为：称取1.20g无水磷酸二氢钠(NaH2PO4，MW119.98)、接体的马来酰亚胺基团与亲水段头部多肽末[0022]一种所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米颗粒的制备方法制备得到的靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合[0023]三段式自组装复合多肽纳米颗粒为多肽药物的自组装策略提供一种可参考的模[0024]免疫激活、白细胞浸润和内皮屏障破坏导致血管渗透性7可促细胞间紧密连接重塑恢复血管渗透性；补体拮抗肽下调粒细胞跨内皮过程的介质分[0025]一种所述靶向修复内皮屏障并调控免疫募集级联的三段式自组装复合多肽纳米[0026]急性炎症相关疾病是以内皮屏障受损、免疫失衡为主导因素的急性炎症相关疾[0027]急性炎症相关疾病为疾病为严重的脓毒血症或急性肺损伤或急性呼吸窘迫综合[0028]有益效果：(1)本发明的三段式复合智能多肽纳米颗粒最内层为烷基链构建的疏[0029](2)该方法使多组分多肽分子共价连接在同一颗粒内部，从多角度有效地应对复[0030](3)本发明制备的三段式复合智能多肽纳米颗粒材料，利用炎症状态下的病理特[0031](4)本发明制备的三段式复合智能多肽纳米颗粒材料通过精准调控内皮细胞参与[0033]图2为所制备的三段式自组装复合多肽纳米颗8[0043]亲水段头部多功能肽溶液的制备：称取C端半胱氨酸修饰的黏附分子靶向肽(序[0045]疏水端尾部烷基链溶液的制备：称取1mg末端修饰两个赖氨酸的碳十六烷基链[0046]将1ml的疏水段尾部烷基链溶液与1ml的中间段连接体酮缩硫醇溶液混合(等体积[0047]加入配置好的黏附分子靶向肽溶液1ml，再次三乙胺调PH至7.2，常温避光摇床[0052]疏水端尾部烷基链溶液的制备：称取1mg末端修饰两个赖氨酸的碳十六烷基链9[0053]将1ml的疏水段尾部烷基链溶液与1ml的中间段连接体酮缩硫醇溶液混合(等体积[0054]加入配置好的内皮屏障修复肽溶液1ml，再次三乙胺调PH至7.2，常温避光摇床[0058]疏水端尾部烷基链溶液的制备：称取1mg末端修饰两个赖氨酸的碳十六烷基链[0059]将1ml的疏水段尾部烷基链溶液与1ml的中间段连接体酮缩硫醇溶液混合(等体积[0062]从图2中可以看出，三种多肽的复合多肽纳米颗粒在自组装模拟中表现出优秀的[0065]如图5所示，选用HUVEC细胞构建的内皮屏障作为体外研究模型。使用DCFH_DA探颗粒可显著提升内皮屏障中紧密连接的主要组成