《编制说明-金银花胡萝卜微管蚜抗药性监测技术规程》

中国农药工业协会团体标准《金银花胡萝卜微管蚜抗药性监测技术规程》编制说明一、标准编制背景(一)任务来源、起草单位与起草人由中国医学科学院药用植物研究所、中国农业大学、中国农业科学院植物保护研究所、江苏康缘生态农业发展有限公司承担“金银花胡萝卜微管蚜抗药性监测技术规程”的制定工作。中国农药工业协会负责整个标准制定的组织实施和技术把关，拟定工作方案，修改标准草案形成标准征求意见稿，并负责征求各相关单位、专家和社会公众意见并提出相应的处理意见，编制标准送审稿，组织召开标准审定会，修改形成标准报批稿，并上报标准。中国医学科学院药用植物研究所等单位负责调研和评价金银花胡萝卜微管蚜抗药性监测技术，收集相关资料和试验样品，开展验证试验，起草标准草稿，参与征求意见的处理、标准送审稿编制和标准审定会等。表1主要起草人员信息及任务分工姓名单位职称专业特长分工魏红爽中国医学科学院药用植物研究所副研究员昆虫抗药性检测与分析项目负责人，负责组织标准起草、资料收集、建立分析方法、文本完成、市场调研、数据处理、收集和汇总各企业意见，标准评审汇报等工作郭昆中国医学科学院药用植物研究所研究员市场调研与昆虫采样协助项目负责人组织标准起草、资料收集、建立分析方法、文本完成、市场调研、数据处理、收集和汇总各企业意见，标准评审汇报等工作徐常青中国医学科学院药用植物研究所研究员药用植物保护协助项目负责人组织标准起草、资料收集、建立分析方法、文本完成、市场调研、数据处理、收集和汇总各企业意见，标准评审汇报等工作刘赛中国医学科学院药用植物研究所副研究员药用植物保护负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见谭树乾中国农业大学副教授农业害虫与昆虫防治负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见乔海莉中国医学科学院药用植物研究所研究员药用植物保护负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见郑永权中国农业科学院植物保护研究所研究员农药学负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见潘兴鲁中国农业科学院植物保护研究所副研究员农药学负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见高功江苏康缘生态农业发展有限公司高级农艺师金银花栽培与管理负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见高会军江苏康缘生态农业发展有限公司高级农艺师金银花栽培与管理负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见徐荣中国医学科学院药用植物研究所研究员金银花栽培与管理负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见赵士文中国医学科学院药用植物研究所博士金银花栽培与管理负责提供样品、产品质量台账和企业标准，对建立分析方法及指标的确认及反馈征求意见（二）标准起草的背景与意义农药是防治有害生物的重要生产资料，但过量或不合理的使用，不仅造成有害生物抗药性和防治成本的增加，同时对农产品安全、人类健康和环境构成威胁。金银花是我国药食两用的中药材，具有清热、解毒等功效。然而在金银花生长过程中，胡萝卜微管蚜发生尤为严重，因此在种植期各个阶段常需要施用农药，以防治蚜虫和提高产量，但也引起了农药滥用等一系列问题，对环境安全、食品安全造成了巨大挑战。随着田间常用药剂的不合理使用，导致蚜虫抗药性日益增强，且越防越重。综合考虑金银花蚜虫抗药性情况，以叶片浸渍法和玻璃管药膜法来检测金银花蚜虫对常用杀虫剂的抗药性，制定金银花蚜虫抗药性监测技术规程。该技术规程可指导田间金银花蚜虫抗药性检测的方法及参考其相对敏感基线评估蚜虫抗药性水平标准，减少农药使用量，延缓害虫抗药性发展，有利于保护生态环境，保障人民健康和金银花安全。二、主要工作过程为向中国农药工业协会提出标准制定建议与申请，2022年1月成立了以中国医学科学院药用植物研究所、中国农业大学、中国农业科学院植物保护研究所、江苏康缘生态农业发展有限公司为起草单位的编制小组。2022年1月至2025年5月，开展了本标准的验证试验。2025年5月至2025年10月，完成了标准草稿的编写，主要起草人包括：魏红爽、郭昆、徐常青、刘赛、谭树乾、乔海莉、郑永权、潘兴鲁、高功、高会军、徐荣、赵士文。2025年9月，向中国农药工业协会提出了标准制定建议与申请，并于同年10月获得中国农药工业协会团体标准立项支持。2025年10月，将标准征求意见稿呈报中国农药工业协会，并发送至21家单位征求意见，在中国农药工业协会标准网（）公开征求社会意见。2025年11月，对收到的反馈意见进行整理分析，提出处理建议，对标准征求意见稿进行修改、补充试验数据，形成标准送审稿。在北京组织召开标准审查会，根据审查会上专家和代表们所提出的意见和建议，对标准送审稿进行修改和完善，形成标准报批稿并上报农业农村部主管部门。三、标准编制原则及主要技术内容的确定1.标准编制原则标准编制遵循“先进性、实用性、统一性、规范性”的原则，尽可能与国际接轨，注重标准的通用性、适用性、配套性和可操作性。确保标准既保持技术上的先进性，又具有经济上的合理性。标准制定过程中严格遵守国家有关方针、政策、法规和规章，严格执行强制性国家标准和行业标准。与同体系标准和相关的各种基础标准以及配套使用的基础标准等相关标准相衔接，遵循政策和协调统一性原则。本文件制定过程中严格按照GB/T1.1-2020的规定编写，力求做到技术内容的叙述正确无误；文字表达准确、简明、易懂；标准的构成严谨合理；内容编排、层次划分等符合逻辑与规定。主要技术内容的确定叶片浸渍法将带有供试昆虫的植物叶片浸渍在药液中，昆虫通过接触药液和取食叶片，计算昆虫死亡率的生物测定的方法。玻璃管药膜法将丙酮等溶剂均匀涂布到玻璃管内壁，昆虫通过与玻璃管内壁接触，计算昆虫死亡率的生物测定方法。2.3药剂配制用电子天平准确称取一定量的原药，用丙酮等有机溶剂溶解，配制成一定浓度的母液。用移液器吸取一定量的母液到玻璃烧杯中，用0.05%TritonX-100的水溶液按照等比梯度设置5个~7个系列浓度。每个浓度的药液量不少于50mL。2.4药剂处理与结果调查2.4.1叶片浸渍法将带有无翅成蚜金银花苗的叶片，分别浸入配制好的不同浓度药液中，20s后取出晾干，叶柄用浸水的脱脂棉包裹保湿，放入铺有干净滤纸的玻璃培养皿里，放入人工气候培养箱里饲养，饲养条件为室内（26±1）℃、相对湿度70%±5%、光暗周期16L:8D。按照配置好的剂量由低到高的顺序重复上述操作。每个处理重复4次，每个重复不少于10头蚜虫，以0.05%TritonX-100的水溶液作为空白对照。药剂处理后24h（拟除虫菊酯类和新烟碱类）、48h（磺酰亚胺类、抗生素类、和吡啶类）检查结果并记录蚜虫死亡情况，在体视显微镜下用毛笔轻触蚜虫无反应或有明显的中毒症状（不取食或抽搐等）则视为死亡。2.4.2玻璃管药膜法从配制好药液中吸取250μL加入到玻璃管中（浓度换算为μg/cm2内表面积），立即用小型滚瓶机滚均，待丙酮等溶剂挥发后用于测定。对照组用丙酮等溶剂的溶液处理。选择健康一致的无翅成蚜进行试验，每个制备好的药膜管放置10头蚜虫，每个处理重复4次。条件为室内（26±1）℃、相对湿度70%±5%、光暗周期16L:8D。所有的药剂在处理24h后，检查并记录蚜虫死亡情况，在体视显微镜下用毛笔轻触蚜虫无反应或有明显的中毒症状（不取食或抽搐等）则视为死亡。2.5死亡率计算方法根据检查数据，计算各处理的校正死亡率。若对照死亡率<5%，无需校正；对照死亡率>20%，试验需重做；对照死亡率在5%~20%，应按公式（1）和（2）进行校正，计算结果均保留到小数点后2位。P式中：P1—死亡率，单位为百分率（%）；N—表示处理总虫数，单位为头；K—表示死亡虫数，单位为头。P式中：P2—校正死亡率，单位为百分率（%）；P1—处理死亡率，单位为百分率（%）；P0—对照死亡率，单位为百分率（%）。2.6回归方程和致死中浓度或致死中量的计算方法采用PoloPlus等统计软件进行概率值分析法，计算每个药剂的回归方程、LC50及其95%置信限、斜率（b）及其标准误。2.7抗药性水平的计算与评估2.7.1金银花花胡萝卜微管蚜对部分杀虫剂的相对敏感基线。表1金银花蚜虫对部分杀虫剂的相对敏感基线（叶片浸渍法）杀虫剂处理时间h斜率±标准误LC50（95%置信限）mg/L吡虫啉242.487±0.2100.610（0.514~0.716）啶虫脒242.049±0.1711.357（1.109~1.653）噻虫嗪240.879±0.0881.438（0.533~2.704）噻虫胺240.532±0.0440.237（0.107~0.442）联苯菊酯242.216±0.2140.604（0.498~0.734）高效氯氟氰菊酯240.634±0.0470.122（0.082~0.174）吡蚜酮480.559±0.0622.154（1.275~3.460）氟啶虫酰胺480.712±0.0581.905（1.264~2.726）阿维菌素480.814±0.0750.412（0.159~0.783）表2金银花蚜虫对部分杀虫剂的相对敏感基线（玻璃管药膜法）杀虫剂处理时间h斜率±标准误LC50（95%置信限）ng/cm2吡虫啉241.126±0.0865.427（4.125~7.040）啶虫脒240.820±0.0715.671（3.879~7.964）噻虫嗪241.016±0.0813.152（1.899~4.725）噻虫胺240.783±0.0642.988（1.915~4.330）联苯菊酯241.064±0.0876.939（5.086~9.335)高效氯氟氰菊酯240.681±0.0673.229（2.012~4.850）吡蚜酮240.670±0.0572.782（1.811~3.999）氟啶虫酰胺240.502±0.0504.132（2.076~7.118）阿维菌素240.683±0.0553.030（1.796~4.664）注：玻璃管直径1.8cm，高9cm，内表面积为53.411cm2，每管内添加250μL药液，杀虫剂的实际用量（ng/cm2）=杀虫剂质量浓度（na/μL）×200（μL）/玻璃管内表面积（cm2）。2.7.2抗药性倍数的计算根据相对敏感基线和测试种群的LC50值，按公式（3）计算测试种群的抗性倍数。RR=T式中：RR—测试种群的抗性倍数；T—测试种群的LC50；S—相对敏感种群的LC50。2.7.3抗药性水平的评估根据抗性倍数的计算结果，按照表1中害虫抗药性水平的分级标准，对测试种群的抗药性水平做出评估。表1害虫抗药性水平分级标准抗药性水平分级抗性倍数（RR），倍低水平抗性5.0＜RR≤10.0中等水平抗性10.0＜RR≤100.0高等水平抗性RR＞100.02.8建立抗药性监测档案金银花胡萝卜微管蚜抗药性监测应对采集地点、时间、作物生育期、当地用药水平、生物测定方法及结果、抗性倍数等数据资料进行归档,建立抗药性监测档案。根据金银花胡萝卜微管蚜抗药性监测需求,相关杀虫剂抗性监测档案保存至少10年。三、试验验证的分析、综合报告，技术经济论证，预期的经济效益、社会效益和生态效益XXX四、与国际、国外同类标准技术内容的对比情况。本标准制定中未采用国际标准，但引用和参考了以下国内标准：GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T 1154.6-2008农药室内生物测定试验准则第6部分：杀虫活性试验浸虫法NY/T1154.8-2007农药室内生物测定试验准则杀虫剂第8部分：滤纸药膜法NY/T2726－2015小麦蚜虫抗药性技术规程玻璃管药膜法NY/T1667.3农药登记管理术语第3部分：农药药效六、与有关法律、行政法规及相关标准的关系本文件的编制依据了现行的法律、法规和国家强制性标准，与现有标准、制定中标准是协调配套的，没有与其他行业、领域交叉、不协调的情况。七、重大分歧意见的处理经过和依据本文件在编写过程中尚无大的意见分