丹参酮胶囊检验规范

丹参酮胶囊检验规范1范围本规范规定了丹参酮胶囊的检验方法、检验规则、判定规则及复检规则等内容，适用于丹参酮胶囊的原料进厂检验、生产过程中间品检验及成品出厂全项目检验，同时也适用于药品监管部门对市场流通批次丹参酮胶囊的监督抽检工作。本规范所涉及的检验项目均需在符合《药品生产质量管理规范》（GMP）要求的微生物限度、理化检验及中药有效成分分析实验室开展，检验人员需持有中药检验相关职业资格证书，且经过本规范专项培训并考核合格后方可上岗操作。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。《中华人民共和国药典》2025年版一部《药品生产质量管理规范》2010年修订版及后续补充规定GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法《中药制剂检验操作规程》国家药品监督管理局药品检验所编《微生物限度检查法指导原则》中国药典通则11073术语和定义3.1丹参酮胶囊以丹参提取物为主要原料，添加适宜辅料制成的硬胶囊剂，内容物为棕红色至棕褐色的颗粒或粉末，每粒装0.25g，含总丹参酮以丹参酮ⅡA（C₁₉H₁₈O₃）计不得少于10mg。3.2薄层色谱鉴别利用中药化学成分在固定相和流动相中的分配系数差异，通过对照品或对照药材与供试品在相同薄层板上展开后的斑点位置、颜色一致性，对药品真伪进行定性鉴别的方法。3.3含量均匀度小剂量或单剂量的固体制剂每片（粒）含量符合标示量的程度，是反映制剂生产工艺稳定性和批次间质量均一性的关键指标。3.4溶出度活性药物从片剂、胶囊剂等制剂在规定条件下溶出的速率和程度，是评价口服固体制剂体内生物利用度的重要体外替代指标。4检验项目及方法4.1性状检查取供试品10粒，除去囊壳，观察内容物的颜色、形态及气味。正常性状应为棕红色至棕褐色颗粒或粉末，无结块、受潮现象，具有丹参特有的微香，味微苦。检查过程中需注意观察是否存在异物、霉变斑点或异常酸败气味，如发现单粒内容物颜色偏差超过±20%或存在可见异物，直接判定性状项不合格。性状检查需在自然光下或照度不低于1000lx的日光灯下进行，避免在有色光源环境下操作导致颜色判断误差。4.2鉴别4.2.1薄层色谱鉴别取本品内容物0.5g，加乙醚20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参酮ⅡA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（19:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同的暗红色斑点。操作过程中需控制展开缸预饱和时间不少于15分钟，展开温度控制在20～25℃，相对湿度控制在40%～60%，避免因温度、湿度差异导致斑点Rf值偏差超过0.1。如出现斑点位置偏移或颜色差异，需重新配制供试品溶液及展开剂进行复测。4.2.2紫外光谱鉴别取本品内容物0.1g，加乙醇50ml，超声处理15分钟，滤过，取续滤液1ml，加乙醇稀释至10ml，照紫外-可见分光光度法（中国药典通则0401）测定，在228nm、252nm、270nm、280nm及357nm波长处应有最大吸收。吸收度比值要求：A₂₅₂nm/A₂₇₀nm应为1.30～1.50，A₂₈₀nm/A₃₅₇nm应为0.85～1.05，超出比值范围需重新取样复测，排除提取过程不完全或仪器波长校准偏差导致的结果异常。4.3检查4.3.1水分取本品内容物约1g，精密称定，照水分测定法（中国药典通则0832第二法，烘干法）测定，不得过9.0%。测定时需将供试品平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，疏松样品厚度不超过10mm，精密称定后在100～105℃干燥5小时，将瓶盖好，移至干燥器中冷却30分钟，精密称定重量，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量计算供试品中水分含量，平行两份样品测定结果的相对偏差不得过0.3%，超出偏差范围需重新测定。4.3.2装量差异取供试品20粒，分别精密称定每粒重量，倾出内容物（不得损失囊壳），硬胶囊囊壳用小刷或其他适宜的用具拭净，再分别精密称定囊壳重量，求出每粒内容物的装量与平均装量。每粒装量与平均装量相比较，超出装量差异限度（±10%）的不得多于2粒，并不得有1粒超出限度1倍。平均装量在0.3g以下的胶囊剂装量差异限度为±10%，0.3g及以上为±7.5%，本产品每粒标示装量为0.25g，故执行±10%的限度要求。测定过程中需避免内容物洒落，如出现单粒装量偏差异常，需检查胶囊是否存在渗漏、囊壳破裂等情况，排除操作误差后再进行结果判定。4.3.3崩解时限取供试品6粒，照崩解时限检查法（中国药典通则0921）检查，应在30分钟内全部崩解并通过筛网（囊壳碎片除外）。如1粒不能完全崩解，应另取6粒复试，均应符合规定。检查时介质为纯化水，温度控制在37℃±1℃，吊篮升降频率为每分钟30～32次。如供试品黏附于挡板上导致崩解延迟，可更换挡板后重新测定，仍不符合规定则判定崩解时限项不合格。肠溶胶囊需额外在人工胃液中检查2小时不得有裂缝或崩解现象，再转至人工肠液中检查1小时内应全部崩解，本产品为普通硬胶囊，无需进行肠溶条件考察。4.3.4微生物限度照微生物限度检查法（中国药典通则1107）检查，需氧菌总数每1g不得过10⁴cfu，霉菌和酵母菌总数每1g不得过10²cfu，不得检出大肠埃希菌，每10g不得检出沙门菌。检验过程需在万级洁净度的微生物实验室中进行，全部操作严格遵守无菌操作规程，同时做阴性对照和阳性对照试验，阴性对照不得有菌生长，阳性对照菌回收率应在70%～130%范围内，否则检验结果无效，需重新进行检验。微生物限度检验样品需从完整包装中随机抽取，取样过程避免环境微生物污染，取样量不少于10g。4.3.5含量均匀度取供试品1粒，将内容物倾入50ml量瓶中，囊壳用乙醇分次洗涤，洗液并入量瓶中，加乙醇适量，超声处理15分钟使丹参酮ⅡA溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（中国药典通则0401），在270nm波长处测定吸收度，按C₁₉H₁₈O₃的吸收系数（E₁%₁cm）为870计算每粒含量，应符合规定（中国药典通则0941）。含量均匀度的A+2.2S值应不大于15.0，如超出范围需另取20粒复试，结合初复试结果进行判定。4.3.6溶出度取供试品，照溶出度与释放度测定法（中国药典通则0931第二法，桨法），以0.5%十二烷基硫酸钠溶液900ml为溶出介质，转速为每分钟75转，依法操作，经45分钟时，取溶液10ml，滤过，精密量取续滤液适量，用溶出介质定量稀释制成每1ml中约含丹参酮ⅡA10μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典通则0401），在270nm波长处测定吸收度；另取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，加溶出介质溶解并定量稀释制成每1ml中约含10μg的溶液，同法测定，计算每粒的溶出量。限度为标示量的75%，应符合规定。溶出度测定过程需保证溶出介质温度恒定在37℃±0.5℃，转速偏差不超过±2转/分钟，取样位置在桨叶上方至液面中间处，避免取样时吸入未溶解的颗粒导致结果偏差。4.3.7有关物质照高效液相色谱法（中国药典通则0512）测定。色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（82:18）为流动相；检测波长为270nm。理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于3000。取本品内容物适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含丹参酮ⅡA0.2mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置200ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照溶液。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%；再精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍（0.25%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍（1.0%）。4.4含量测定照高效液相色谱法（中国药典通则0512）测定。4.4.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（80:20）为流动相；检测波长为270nm；柱温为30℃；流速为1.0ml/min。理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于4000，丹参酮ⅡA峰与相邻杂质峰的分离度应大于1.5。4.4.2对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得。对照品溶液需避光保存，配制后在24小时内使用，超过时间需重新配制。4.4.3供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，研细，取约0.1g，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇40ml，超声处理（功率250W，频率40kHz）20分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。供试品溶液制备全过程需避光操作，避免丹参酮类成分见光分解导致测定结果偏低。4.4.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每粒含总丹参酮以丹参酮ⅡA（C₁₉H₁₈O₃）计，不得少于10.0mg。含量测定需做平行两份样品，两份测定结果的相对偏差不得过2.0%，超出偏差范围需重新取样测定。5检验规则5.1组批与取样同一批原料、同一生产班次、同一台生产设备生产的连续生产的丹参酮胶囊为一个检验批，成品检验批最大批量不得超过100万粒。取样需按照《药品抽样指导原则》进行，每批取样量为全项检验用量的3倍，其中1/3用于检验，1/3用于留样，1/3用于复检。取样时需从批产品的不同部位随机抽取，至少抽取20个独立包装，取样过程需填写取样记录，注明取样日期、批次、数量、取样人等信息。5.2出厂检验每批产品需经企业质量检验部门按照本规范进行全项检验，检验合格并出具检验报告书后方可出厂销售。出厂检验项目包括性状、鉴别、水分、装量差异、崩解时限、微生物限度、含量测定，如为长期生产的稳定批次，经企业质量负责人批准，有关物质、含量均匀度、溶出度可每10批抽检1次，但每年至少覆盖全部生产批次2次以上。5.3型式检验有下列情况之一时，需进行全项目型式检验：新产品投产前的试生产批次；生产工艺发生重大变更，包括原料产地变更、提取工艺调整、辅料种类或用量变更等；生产设备更换或重大维修后恢复生产的首批产品；停产6个月以上恢复生产时；国家药品监督管理部门提出型式检验要求时；企业每年至少进行1次全项目型式检验，覆盖所有生产规格的产品。6判定规则检验项目全部符合本规范要求时，判定该批产品为合格产品。如有不符合本规范要求的项目，除微生物限度项外，可从同一批次产品中加倍取样对不合格项目进行复检，复检结果符合要求时，判定该批产品为合格产品；如复检结果仍不符合要求，判定该批产品为不合格产品。微生物限度项不符合要求时，直接判定为不合格产品，不得进行复检。检验结果判定需由2名具有中级以上检验职称的人员进行复核，确认无误后出具检验报告。7复检规则申请复检的单位需在收到检验结果之日起7个工作日内向检验机构提出书面复检申请，说明复检理由。检验机构受理复检申请后，需使用留存的同批次样品进行复检，复检过程需由未参与初检的检验人员操作，复检结果为最终检验结论。有下列情况之一的，不予受理复检：超过复检申请期限的；复检项目为微生物限度的；样品已超过有效期的；留样样品不足检验用量的；已进行过复检并出具复检结论的。8检验记录与报