CN119490961A 一种促进干细胞造血分化的方法及其应用 (深圳市济因生物科技有限公司)_第1页
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文档简介

道六联社区坪山大道2007号创新广场本发明提供了一种促进干细胞造血分化的蛋白去乙酰化酶抑制剂的培养基对干细胞进行剂的培养基包括培养基I、培养基II和培养基组蛋白去乙酰化酶抑制剂选自丁酸钠或丙戊酸2mLBMP4和10_100ng/mLACTIVINmLbFGF和5_100ng/mLV优选地,所述培养基III按终浓度计包括:1_1000μM组蛋白去乙酰化酶抑制剂、5_3所述培养基III按终浓度计包括:1_1000μM组蛋白去乙酰化酶抑制剂、5_100ng/mL10.权利要求1_8中任一项所述的促进干细胞造血分化的方法和/或权利要求9所述的促进干细胞造血分化的培养基在定向造血分化中4有待改进,因此,提供一种提升造血分化效率的造血分化的方法,促进人多能干细胞诱导分化成CD31+CD34+的内皮细胞以及CD31+CD43+的造血前体细胞。发明人发现对于干细胞的造血分化,添加与不添加丁酸钠或丙戊酸钠对干细胞的造血分化的效率具有很大影其他的组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠或丙戊酸钠这两种物质在促进干细胞造血分化具5[0015]所述培养基III包括基础培养基、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、bFGF、VEGF和基II和培养基III中的终浓度各自独立的为100_培养基II和培养基III中的终浓度各自独立的为1_67[0048]优选地,将接种后的干细胞预先在含有8_10μMY27632的mTeSR1培养基培养10_BMP4和10_100ng/mLACTI2_100ng/mLBMP4和10_100ng[0060]第三方面,本发明提供第一方面所述的促进干细胞造血分化的方法和/或第二方面所述的促进干细胞造血分化的培养基在定向造血分化中[0065]图2是人诱导多能干细胞分化产生的CD31+CD34+的内皮细胞以及CD31+CD43+的造8[0067]实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描[0070]预先将所述诱导多能干细胞接种在12_well培养板中(培养板预先使用GrowthFactorReducedMatrigel(BD)包被过夜),所述诱导多能干细胞的接种密度为1.5×105[0076]本对比例提供一种促进干细胞造血分化的方法,本对比例与实施例1的区别仅在[0078]图2为人诱导多能干细胞分化产生的CD31+CD34+的内皮细胞以及CD31+CD43+的造血前体细胞的流式统计结果对比图;图2中A为人诱导多能干细胞分化产生的CD31+CD34+的的结果也进一步说明在造血分化的培养基中加入组蛋白去乙酰化酶抑制剂后人诱导多能干细胞分化产生更多的CD31+CD34+的内皮细胞以及产生更多的CD31+CD43+的造血前体细9CD31+CD43+的造血前体细胞统计结果%59.97±3.9622.91±1.6341.78±1.5623.48±1.221.53±1.762.6±0.499.96±1.285.5±0.64[0107]通过实施例1与实

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