《病原微生物实验室生物安全》习题

《病原微生物实验室生物安全》习题一、名词解释（共10题，每题3分，共30分）1.病原微生物2.高致病性病原微生物3.生物安全实验室4.生物气溶胶5.生物安全柜6.高效空气过滤器（HEPA）7.实验室获得性感染8.一级防护屏障9.二级防护屏障10.菌（毒）种保藏二、单项选择题（共20题，每题1分，共20分）1.我国将病原微生物分为四类，其分类依据不包括（）A.传染性B.感染后对个体的危害程度C.感染后对群体的危害程度D.体外培养难度2.下列病原微生物中，属于第一类病原微生物的是（）A.新型冠状病毒B.埃博拉病毒C.艾滋病病毒D.狂犬病病毒3.从事高致病性病原微生物实验活动的实验室最低防护等级为（）A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-44.生物安全二级（BSL-2）实验室主实验室如涉及气溶胶传播病原操作，相对于室外大气压的负压宜为（）A.0~-5PaB.-5~-10PaC.-10~-15PaD.-15~-20Pa5.生物安全三级（BSL-3）实验室主实验室相对于室外大气压的最小负压值不应小于（）A.-5PaB.-10PaC.-15PaD.-20Pa6.实验室获得性感染最主要的传播途径是（）A.经口摄入B.接触传播C.气溶胶吸入D.虫媒传播7.下列属于一级防护屏障组成部分的是（）A.实验室负压通风系统B.高压蒸汽灭菌器C.生物安全柜D.应急喷淋装置8.Ⅱ级A2型生物安全柜的循环风比例为（）A.30%B.50%C.70%D.100%9.用于压力蒸汽灭菌效果生物监测的指示菌是（）A.大肠杆菌B.金黄色葡萄球菌C.嗜热脂肪杆菌芽孢D.枯草杆菌黑色变种芽孢10.紫外线消毒的最有效波长范围是（）A.200~220nmB.250~270nmC.300~320nmD.350~370nm11.高致病性病原微生物菌（毒）种保藏应当实行的管理制度是（）A.单人单锁B.双人双锁C.三人三锁D.专人管理无锁存要求12.省内运输高致病性病原微生物样本的审批部门是（）A.县级卫生健康主管部门B.市级卫生健康主管部门C.省级卫生健康主管部门D.国务院卫生健康主管部门13.实验室生物安全的第一责任人是（）A.实验室操作人员B.实验室负责人C.单位生物安全委员会主任D.单位法定代表人14.下列关于生物安全柜摆放要求的说法，错误的是（）A.应远离实验室门口B.应远离空调送风口C.背面与墙面距离不应小于20cmD.顶部应留有至少30cm的维护空间15.下列消毒剂中，属于高水平消毒剂的是（）A.75%乙醇B.碘伏C.含氯消毒剂D.苯扎溴铵16.BSL-4实验室根据操作方式可分为两种类型，分别是（）A.正压服型和生物安全柜型B.负压型和正压型C.固定型和移动型D.科研型和临床型17.一级生物安全实验室（BSL-1）不需要配备的设备是（）A.实验台B.生物安全柜C.洗手池D.高压灭菌器18.下列不属于实验室感染性废物的是（）A.废弃的病原微生物样本B.接触过感染性物质的吸管C.实验用细胞培养物D.废弃的实验记录本（未接触感染性物质）19.个人防护装备的脱卸顺序中，最先脱卸的是（）A.护目镜B.外层手套C.防护服D.口罩20.三级、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动的审批主体是（）A.县级以上卫生健康主管部门B.市级以上卫生健康主管部门C.省级以上卫生健康主管部门D.国务院卫生健康主管部门三、多项选择题（共15题，每题2分，共30分，多选、少选、错选均不得分）1.下列病原微生物中，属于高致病性病原微生物的有（）A.鼠疫耶尔森菌B.霍乱弧菌C.新型冠状病毒D.大肠杆菌K12株E.埃博拉病毒2.生物安全实验室的核心防护目标包括（）A.保护实验操作人员B.保护实验室外环境C.保护实验样本不受污染D.提高实验操作效率E.降低实验成本3.下列属于二级防护屏障组成部分的有（）A.实验室围护结构B.通风空调系统C.个人防护装备D.废水废物处理系统E.生物安全柜4.Ⅱ级生物安全柜的亚型包括（）A.选择B.A2型C.B1型D.B2型E.C型5.实验室获得性感染的常见原因包括（）A.操作不规范产生气溶胶B.个人防护装备使用不当C.意外刺伤、割伤D.菌（毒）种管理混乱E.实验室通风系统故障6.压力蒸汽灭菌的效果监测方法包括（）A.物理监测B.化学监测C.生物监测D.感官监测E.采样监测7.高致病性病原微生物菌（毒）种运输的三层包装体系包括（）A.主容器B.辅助包装C.外层运输包装D.保温包装E.防震包装8.下列属于BSL-3实验室必备设施的有（）A.双门互锁缓冲间B.负压通风系统C.淋浴装置D.生物安全柜E.独立的废水处理系统9.实验室感染性废物的处理原则包括（）A.分类收集B.就地消毒C.专人转运D.集中处置E.可与生活垃圾混合10.生物安全实验室个人防护装备包括（）A.防护服B.防护口罩C.护目镜/面屏D.手套E.鞋套11.下列关于菌（毒）种保藏的说法，正确的有（）A.保藏机构应当具备相应的生物安全防护等级B.应当建立菌（毒）种台账，定期核查C.高致病性菌（毒）种应当实行双人双锁管理D.可私自向其他单位赠送菌（毒）种E.销毁菌（毒）种应当履行审批手续12.实验室生物安全管理制度应当包括（）A.生物安全责任制B.标准操作规程（SOP）C.人员培训考核制度D.健康监测制度E.应急处置制度13.下列消毒方法中，可用于实验室空气消毒的有（）A.紫外线照射B.过氧乙酸熏蒸C.过氧化氢喷雾D.75%乙醇喷洒E.含氯消毒剂拖地14.实验室发生感染性物质泄漏时，正确的处置措施包括（）A.立即停止实验，保持现场B.穿戴好个人防护装备后进行消毒C.用布或纸巾覆盖泄漏区域，倒上消毒剂作用足够时间D.直接用抹布擦拭干净即可E.按规定上报实验室负责人15.下列关于生物安全柜使用的说法，正确的有（）A.使用前应提前30分钟开启运行B.操作时应将物品尽量放在操作台面前部C.避免阻挡进风栅和出风栅D.每次使用后应消毒内表面E.每年至少进行一次性能校准四、判断题（共10题，每题1分，共10分，正确打√，错误打×）1.第四类病原微生物是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。（）2.二级生物安全实验室可以从事少量高致病性病原微生物的实验活动。（）3.生物安全柜的主要作用是保护操作人员、样本和环境。（）4.高致病性病原微生物样本可以通过公共交通工具运输。（）5.实验室负责人是实验室生物安全的第一责任人。（）6.紫外线消毒可用于实验室物体表面和空气的消毒。（）7.实验过程中，手套破损后只需再加戴一双手套即可继续操作。（）8.生物安全实验室的废水应当先消毒灭菌，达到排放标准后再排入市政管网。（）9.Ⅲ级生物安全柜是完全密闭的、气密性最高的生物安全柜。（）10.实验室生物安全事件分为一般、较大、重大、特别重大四个等级。（）五、简答题（共5题，每题8分，共40分）1.简述我国病原微生物的分类依据及具体分类内容。2.简述四级生物安全实验室（BSL-1~BSL-4）的基本适用范围。3.简述实验室获得性感染的主要防控措施。4.简述高致病性病原微生物菌（毒）种及样本运输的核心要求。5.简述生物安全柜的日常使用注意事项。六、案例分析题（共2题，每题15分，共30分）1.案例背景：某区县人民医院检验科微生物室工作人员刘某，在BSL-2实验室进行肺结核患者痰标本抗酸染色操作时，为图方便未佩戴N95口罩，仅佩戴一次性医用外科口罩，且未在生物安全柜内操作，直接在开放实验台上进行涂片、加热固定等操作，过程中产生大量气溶胶。1个月后刘某出现低热、盗汗、咳嗽等症状，经胸部CT及痰涂片检查诊断为活动性肺结核，经流行病学调查排除社区感染可能，判定为实验室获得性感染。问题：（1）请指出该事件中存在的主要生物安全隐患（8分）；（2）针对该事件应采取哪些整改措施（7分）？2.案例背景：某农业大学动物医学院实验室为开展科研项目，拟从省内某动物疫病防控中心引进一株口蹄疫病毒毒株（属于一类动物病原微生物）。实验室负责人赵某安排未经过生物安全培训的三年级本科生林某负责运输事宜，林某将毒株装入普通离心管后放在书包内，乘坐城市公交前往学校。学校现有BSL-2实验室，拟将毒株保存在实验室普通冷藏冰箱中，由赵某一人保管冰箱钥匙，使用时自行取用。问题：（1）请指出该案例中违反病原微生物生物安全管理规定的行为（9分）；（2）请简述高致病性动物病原微生物毒株引进、运输、保藏的正确流程（6分）？参考答案一、名词解释1.病原微生物：是指能够侵犯人体或动物机体，引起感染甚至传染病的微生物，包括细菌、病毒、真菌、立克次体、寄生虫等。我国根据其传染性、感染后对个体或群体的危害程度，将其分为四类。2.高致病性病原微生物：是指第一类和第二类病原微生物的统称，这类微生物致病性强、传播风险高，感染后易引发严重甚至致死性疾病，且部分可通过气溶胶传播，对公共卫生安全威胁较大。3.生物安全实验室：是指通过防护屏障和管理措施，能够避免或控制被操作的有害生物因子危害，达到生物安全要求的实验室，按防护等级从低到高分为BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4四级。4.生物气溶胶：是指悬浮于空气中的含有生物性粒子的气溶胶，包括病毒、细菌、真菌、毒素等颗粒，粒径多在0.1~10μm之间，可通过呼吸道侵入人体，是实验室获得性感染最主要的传播途径。5.生物安全柜：是指具备气流控制及高效空气过滤功能的负压排风净化设备，用于操作具有感染性的实验样本，可保护操作人员、实验样本和周围环境免受感染性气溶胶的危害，分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级三种类型。6.高效空气过滤器（HEPA）：是指对粒径≥0.3μm的颗粒过滤效率≥99.97%的空气过滤器，是生物安全实验室通风系统和生物安全柜的核心部件，可有效截留空气中的病原微生物颗粒。7.实验室获得性感染：是指实验室工作人员在实验活动过程中，因接触病原微生物而发生的感染，包括因操作不当、防护不到位、意外事故等原因导致的感染。8.一级防护屏障：是指直接阻挡病原微生物接触操作人员的防护设施和装备，是生物安全防护的第一道防线，主要包括生物安全柜等隔离设备和个人防护装备。9.二级防护屏障：是指为防止病原微生物扩散到实验室外环境而设置的实验室结构和设施系统，是生物安全防护的第二道防线，主要包括实验室围护结构、负压通风系统、消毒灭菌系统、废水废物处理系统、应急设施等。10.菌（毒）种保藏：是指将病原微生物的菌株、毒株通过特定方法长期保存，保持其原有生物学特性和活性，满足科研、教学、检验、疫苗研发等需求的活动，需严格遵守生物安全管理规定。二、单项选择题1.D2.B3.C4.B5.B6.C7.C8.C9.C10.B11.B12.C13.B14.C15.C16.A17.B18.D19.B20.C三、多项选择题1.ABCE2.ABC3.ABD4.ABCD5.ABCDE6.ABC7.ABC8.ABCDE9.ABCD10.ABCDE11.ABCE12.ABCDE13.ABC14.ABCE15.ACDE四、判断题1.√2.×3.√4.×5.√6.√7.×8.√9.√10.√五、简答题1.答：我国病原微生物的分类依据为病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，共分为四类：（1）第一类病原微生物：是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物，如埃博拉病毒、天花病毒等。（2）第二类病原微生物：是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物，如新型冠状病毒、鼠疫耶尔森菌、霍乱弧菌等。（3）第三类病原微生物：是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物，如金黄色葡萄球菌、普通型流感病毒等。（4）第四类病原微生物：是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物，如大肠杆菌K12株、非致病性酵母等。其中第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。2.答：生物安全实验室按防护等级从低到高分为四级，适用范围如下：（1）BSL-1实验室：适用于操作第四类病原微生物，即对健康成年人无致病性、对环境危害极低的微生物，实验操作可在开放实验台上进行，无需特殊防护设施。（2）BSL-2实验室：适用于操作第三类病原微生物，即中等致病性、传播风险有限、感染后多为轻症且有有效防治手段的微生物；如涉及少量可能产生气溶胶的操作，需在生物安全柜内进行。（3）BSL-3实验室：适用于操作第二类病原微生物，即高致病性、可通过气溶胶传播、感染后易引发严重疾病的微生物，需具备负压通风、生物安全柜等防护设施，人员需穿戴高级别个人防护装备。（4）BSL-4实验室：适用于操作第一类病原微生物，即极高致病性、无有效治疗和预防手段、传播风险极高的微生物，需采用最高等级的防护措施，如正压防护服或全封闭Ⅲ级生物安全柜。3.答：实验室获得性感染的主要防控措施包括以下几个方面：（1）硬件设施建设：根据操作病原的危害等级配置相应等级的生物安全实验室，配备生物安全柜、高压灭菌器、个人防护装备等防护设备，定期维护校准，确保一级、二级防护屏障功能完好。（2）管理制度建设：建立健全生物安全责任制，明确实验室负责人为第一责任人；制定完善的标准操作规程（SOP）、菌（毒）种管理制度、废物处理制度、健康监测制度、应急处置制度等，定期开展生物安全自查。（3）人员培训考核：所有进入实验室的人员必须经过生物安全知识和操作技能培训，考核合格后方可上岗；定期开展复训和应急演练，提升人员防护意识和应急处置能力。（4）操作行为规范：严格遵守生物安全操作规程，所有可能产生气溶胶的操作均需在生物安全柜内进行；正确佩戴和使用个人防护装备，严禁在实验室内饮食、吸烟、存放私人物品；避免锐器损伤，使用后的锐器直接放入锐器盒。（5）健康监测管理：建立实验室人员健康档案，定期开展职业相关传染病筛查；人员出现与操作病原相关的可疑症状时，应及时报告、就医，排查感染风险，必要时采取医学隔离措施。（6）意外事件处置：制定完善的意外事件应急预案，发生感染性物质泄漏、锐器伤等意外时，立即按规范处置并上报，必要时开展医学观察和预防用药。4.答：高致病性病原微生物菌（毒）种及样本运输的核心要求包括：（1）审批要求：运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本必须经过卫生健康（或兽医）主管部门批准，省内运输由省级主管部门审批，跨省运输或运往境外由国务院主管部门审批。（2）包装要求：采用三层包装体系，主容器为密封、防水、防破损的样本管，表面标注样本信息；辅助包装为防水、防渗漏的密封容器，主容器与辅助包装之间填充缓冲材料；外层为坚固的运输箱，表面印有生物危险标识、警示用语和相关信息。（3）人员要求：由2名以上经过专业培训、掌握生物安全防护知识的工作人员护送，随身携带审批文件，运输过程中全程看管，不得擅自离开。（4）运输工具要求：优先采用陆路运输，不得使用公共汽车、火车、民航客机等公共交通工具；运输工具应当具备相应的防护条件，配备消毒用品和应急处置装备。（5）交接要求：接收单位必须具备相应等级的生物安全防护资质，接收时核对样本信息、包装完整性，确认无误后签收，剩余样本按规定销毁或退回原单位。5.答：生物安全柜的日常使用注意事项包括：（1）摆放与环境：生物安全柜应放置在远离门、窗、空调送风口及人员频繁活动的区域，避免气流扰动影响柜内气流稳定性；柜的两侧、背面应留有至少30cm的维修空间，顶部留有至少30cm的管道连接空间。（2）使用前检查：使用前应检查生物安全柜的风速、压力、指示灯是否正常，确认高效过滤器未失效；提前开启风机运行30分钟，使柜内气流稳定并完成自净。（3）操作规范：操作时将实验物品尽量放在操作台后部或两侧，避免阻挡前后进风栅；动作轻柔，减少不必要的移动，避免产生气溶胶；玻璃门高度不得超过规定限值，严禁将头伸入柜内；实验过程中尽量减少手臂进出柜的次数。（4）消毒清洁：每次使用前后，用75%乙醇或有效氯含量为1000mg/L的含氯消毒剂擦拭柜内所有表面（包括操作台、内壁、玻璃门内侧等）；必要时采用紫外线照射或过氧化氢熏蒸消毒；柜内产生的废物及时放入专用废物袋，经消毒后取出。（5）维护校准：定期更换高效空气过滤器，每年至少由具备资质的机构进行一次性能校准（包括风速、气流模式、过滤效率、气密性等），确保性能符合标准要求；出现故障时立即停止使用，由专业人员维修。六、案例分析题1.答：（1）该事件中存在的主要生物安全隐患包括：①操作防护措施不到位：结核分枝杆菌可通过气溶胶传播，痰涂片加热固定操作需在生物安全柜内进行，本次操作直接在开放实验台上开展，未采取气溶胶隔离防护措施。②个人防护装备不符合要求：操作经呼吸道传播的高致病性病原微生物时，未佩戴N95及以上级别的防护口罩，仅佩戴防护效果不足的一次性医用外科口罩，无法有效阻挡气溶胶吸入。③操作流程不规范：操作人员未严格遵守生物安全操作规程，为图方便简化防护流程，反映出实验室生物安全管理存在漏洞，人员操作行为缺乏监督。④人员培训不到位：工作人员生物安全防护意识薄弱，对气溶胶传播风险认识不足，未掌握正确的病原操作防护方法。⑤健康监测机制不完善：实验室未建立针对性的职业健康监测制度，未定期开展结核病筛查，未能及时发现感染风险并采取干预措施。（答对4点及以上即可得8分，每点2分）（2）针对该事件应采取的整改措施包括：①硬件设施升级：立即配置符合要求的Ⅱ级生物安全柜，用于结核分枝杆菌等可经气溶胶传播的病原微生物操作，确保所有产生气溶胶的操作均在防护设备内开展。②完善管理制度：修订生物安全操作规程，明确不同等级病原微生物的操作要求和防护标准；建立个人防护装备使用监督检查制度，对违规操作行为严肃处理。③强化人员培训：组织所有实验室工作人员开展生物安全专项培训，重点培训气溶胶防控、个人防护装备使用、意外事件处置等内容，考核合格后方可上岗，定期开展应急演练。④健全健康监测：建立工作人员职业健康档案，定期开展结核病等职业相关传染病筛查；工作人员出现可疑症状时及时报告、就医，排查感染风险，必要时采取医学观察措施。⑤落实生物安全责任制：明确实验室负责人为生物安全第一责任人，每月开展生物安全隐患排查，及时发现并整改问题，确保各项防护措施落实到位。（答对4点及以上即可得7分，每点1-