CN119506480A 结合感染性滴度和感染性常数的病毒载体感染性测算方法 （中国计量科学研究院）_第1页
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号结合感染性滴度和感染性常数的病毒载体合感染性滴度和感染性常数的病毒载体感染性测算方法。所述的测算方法包括如下步骤11）细胞培养和计数12）病毒载体稀释样品制备；感染性滴度和感染性常数的病毒感染性测算方2转导效率和所述的第二病毒载体稀释样品对体稀释样品对细胞的感染复数mu，所述的第二病毒载体稀释样品对细胞的感染复数,r-第三病毒载体稀释样品对细胞的感染复数mk和体稀释样品对细胞的转导效率和/或所述的第二病毒载体稀释样品对细胞的转导效率35.根据权利要求1_3之一所述的测算方法，其特征在于：所述的细胞选自HEK293T、中加入的细胞数量为1x104~1x106个。4[0005]传统常用的病毒载体感染性测试方法包括TCID50测试法、噬斑测[0007]qPCR测试法通过测定病毒载体基因组和宿主细胞基因组的拷贝数比值作为MOI5[0010]以上表明对病毒，尤其是病毒载体的感染性测试仍然缺乏一种准确而全面的方[0011]本发明的目的是提供一种结合感染性滴度和感染性常数的病毒载体感染性测算细胞的转导的完成时间tr：病毒载体稀释样品对细胞的感染复数mu，所述的第二病毒载体稀释样品对细胞的感染复数mz=4m1，所述的第二病毒载体稀释样品对细胞的相同的感染6r-所述的第三病毒载体稀释样品对细胞的感染复数mk和转导效率和/或所述的第二病毒载体稀释样品对细胞的转导效率采用的是流式细胞仪检测[0033]1，取转导开始后培养72小时的细胞，利用[0038]1，取转导开始后培养72小时的细胞，利用[0048]1，取转导开始后培养72小时的细胞，利用针对病毒转7所述的第三病毒载体稀释样品由同一病毒载体样品或于相同保存条件的同一批次病毒载[0060]图1为实施例1中荧光细胞计数仪对HEK293T细胞进行病毒载体转导后进行自动识别和计数的代表性图片，其中a为明场细胞成像图；b为明场细胞自动识别与计数图；c为8胎牛血清，1%青霉素/链霉素溶液次日，细胞汇合度达到约70%时，利用转染试剂牛血清的DMEM补加至300μl，然后分别加入到弃去旧培养基的步骤1所得的剩余培养了细培养基终止消化，将各孔细胞吹吸分散，然后将各孔细胞分别转移到不同的1.5

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