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ICS65.020.20DB23黑龙江省市场监督管理局发布DB23/T2629—2020本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。本标准由黑龙江省农业农村厅提出。本标准由黑龙江省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位:东北农业大学、哈尔滨圭璜科技有限公司。本标准主要起草人:王金刚、周爱民、张琦、杨涛、曲波、杨雅涵、刘恩慧、乔坤、龚束芳。DB23/T2629—20201尖叶石竹组培苗生产技术规程本标准规定尖叶石竹(DianthusspiculifoliusSchur)组培苗生产的环境与设备消毒、培养基配制、外植体制备、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、培养条件、移栽及生产档案。本标准适用于尖叶石竹的组培苗生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/TLY/TNY/T6001-1985育苗技术规程1882-2010林木组织培养育苗技术规程2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程3环境与设备消毒3.1接种室消毒接种室消毒按NY/T2306-2013中8.6进行。3.2培养室消毒培养室消毒按NY/T2306-2013中8.7进行。3.3超净工作台消毒超净工作台消毒按NY/T2306-2013中8.5、8.6进行。3.4接种器具消毒接种器具按NY/T2306-2013中8.4进行。4培养基配制4.1母液配制培养基母液配制按NY/T2306-2013中7.3执行。4.2培养基配制4.2.1培养基配方培养基配制成分如下:DB23/T2629—20202a)初代培养基:MS+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L,pH值5.8;b)继代增殖培养基:MS+0.2mg/L6-BA+4mg/LKT+0.02mg/LIAA+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L,pH值5.8;c)生根培养基:1/2MS+1.0mg/LIBA+0.01mg/LNAA+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L,pH值5.8。4.2.2培养基配制方法培养基配制方法按NY/T2306-2013中7.4执行。4.3培养基灭菌及保存培养基灭菌及保存方法按LY/T1882-2010中4.2进行。5外植体制备5.1外植体选择选取当年生的嫩茎作为外植体,宜晴天进行。5.2外植体消毒外植体的处理:选取生长良好的茎段,自来水冲洗3h,75%酒精中浸泡消毒5s,2%次氯酸钠消毒3min,再用蒸馏水冲洗4~5次,用滤纸吸干水分。6初代培养将消毒后的外植体切成1cm~2cm的茎段,每段至少带有1个~2个叶芽,将切好的外植体接种到诱导培养基中,注明接种物名称和日期,培养21d~28d,记录诱导情况。7继代培养分化的不定芽接入继代增殖培养基中,约8个/瓶,培养28d~35d,每个茎段萌发出5个~8个不定芽,分割新长出的不定芽,可按需求重复继代。8壮苗培养切取继代增殖培养中长1.0cm以上的不定芽,转接至壮苗培养基中,约8个/瓶,培养14d~21d。9生根培养壮苗培养基中组培苗长到2.0cm以上高度时,将小苗转入生根培养基中,约10株/瓶,培养7d~10d,当小苗基部长出健壮的不定根3条以上,大部分苗根长为0.5cm~2.0cm时,即可进行移栽。10培养条件无菌培养室白天的温度控制在23±2℃,夜间不低于15℃,相对空气湿度控制在60%~80%,光照强度为2000Lux~3000Lux,光照时间为12h/d~14h/d,黑暗时间为10h/d~12h/d。DB23/T2629—202011移栽11.1移栽基质的制备基质选择草炭土和蛭石混合,体积比约为1:1,栽植前用0.5%的高锰酸钾溶液浇透消毒24h。11.2驯化移栽将生根培养瓶转移到过渡培养间,半开瓶口1d~2d后,敞开瓶口炼苗2d~3d后可移栽。11.3组培苗移栽将幼苗取出,用清水洗净附着在根上的培养基,用清水喷湿,可进行移栽,移栽后压实小苗周围的基质,浇透水,覆70%遮阳网。11.4移栽苗管理保证温室内幼苗水分供需平衡,育苗水分管理按GB/T6001中执行。移栽5d~7d后,去掉遮阳网,浇1/2MS营养液1次,温度22
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