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文档简介
1、抗体(antiody,ab) p29-39,第4章,医学免疫学,演讲:吕春雪,西隆,非典战役的英雄人物江苏元教授,西隆,I,正义1,抗体(,概述,艾米丽邦贝林(1845-1917年),20世纪80年代末开始发现抗体,1937年,电泳将血清白蛋白分成白蛋白、1、2、丙种球蛋白等成分,抗体活性主要存在于区域,并可扩展到区域和2球蛋白,2,免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig):具有抗体活性或化学结构类似抗体的球蛋白。概念其他Ab不一定是Ig,Ig不一定是Ab(Ig包含Ab)Ab是生物学概念。Ig是化学结构概念,第二,ab和Ig的区别和连接,概述,第一个抗体的结构,一个抗体的基本结构,抗体
2、分子的基本结构,四肽链结构:的相同双链(h链)和两个相同的轻链(l链)用二硫键连接。(a)重链和轻链,h链:分子量约为50-75kD,450-550氨基酸残链3360分子量约为25kD,约为214氨基酸残链,重链(h链)类和子类,IgA : IgA2,链链,光链(l链)类型和亚型,l链常数区域氨基酸,链常数区域单个氨基酸:14,每种类型的Ab光链没有链和链的功能差异,(b)可变区域和常数,高应变区(hypervariAbleregion,HVR),CDR共同形成Ig的Ag结合部分,以确定ab的特异性,识别和组合Ag。骨骼区域(frameworkregion,FR),恒定区域(constantr
3、egion,C区域):H链和l链是接近C末端的剩馀氨基酸的数量、种类、排序顺序相对稳定,称为恒定区域。l链:VL,CLH链:IgG,IgA,IgD:VH,CH1,CH2,CH3IgM,IgE:VH,CH1,CH2,CH3,CH4,(c)铰区:位于CH1和CH2之间,富脯氨酸,易弯曲,fab段有利于同时连接两个不同距离的外延;容易受到木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。有助于Ab分子变形,暴露补体结合部位。五种类型的Ab或子类型的转枢区域不同。*IgG、IgA和IgD具有铰链区域。*IgM和IgE没有铰链区,2,抗体的辅助成分,(a) j链(joiningchain):血浆细胞合成,将单个Ab分子连接成
4、聚合物。(b)分泌片段(secretorypiece,SP)*保护sIgA的铰链区域,防止蛋白质水解酶降解;*在粘膜下向粘膜表面输送IgA二聚体,3,抗体分子水解片段的目的:研究Ab的结构和功能,研究特定Ab多肽片段(papain)的水解IgG 2 fab片段(fragmentantigenbinding,抗原结合片段)1个Fc片段*用作生物制品:通过去除Fc段减少过敏反应发生。双节抗体具有多样性和免疫原性,多样性:自然界中存在的抗原数量多,每个抗原分子的结构非常复杂,包含多种抗原表位。每个抗原表位理论上可以诱导产生特定的抗体,对同一抗原表位可以产生不同种类的抗体。Ab的免疫原性:Ab是双重性
5、。可以是抗体或抗原,三种不同类型的抗原表位(a)同种类型:同一种类抗体分子中存在的表位是同一种类所有个别Ab分子共有的抗原特异性标记,作为种状标记存在于AbC区域。第3章的IgG,第4章的IgG,C区,第3章的IgG,羊,羊抗第3章的IgG抗体,所有人的IgG,结合,(b)等形式:不同对象间Ab分子具有的不同抗原特异性标记,个人类型存在于同一基因座的不同等位基因编码的AbC区域,都是同源的。第3章的IgG,第4章的IgG,(3)独特(idiotope,Id):同一属,同一个体源的抗体分子,CDR区域氨基酸序列的差异,显示不同免疫原性,每个Ab分子都有唯一的抗原特异性标记,其表位置是唯一的位置存
6、在于v区。独特类型可以刺激异种、同种、自生成的相应Ab,即抗毒型抗体(AId或Ab2),同一体内,不同抗体,v区抗原特异性,伤寒抗体,痢疾抗体,v区,Ab2,Ab2负反馈调节Ab1Ab1,Ab3负反馈调节Ab2,第三抗抗体功能,第一,识别抗原:v区的功能,对特定抗原的识别和结合起决定性作用的v区CDR,实用意义3360*中和效果:中和毒素、病毒、细菌吸附预防*体液免疫反应:BCR IgA和IgE中的聚集体激活补体旁路途径,1,调理效果:当与细菌等微粒抗原结合时,IgG通过Fc段与巨噬细胞和中性粒细胞表面对应的FcR结合,促进吞噬细胞的吞噬作用。 第三,Fc受体:c区功能,2,抗体依赖的细胞介导
7、细胞毒性(antiody-dependent cell-mediated cytoxicity,ADCC)3360 IgG与感染肿瘤或病毒的目标细胞结合后,通过Fc段NK细胞,IgE的Fc段可以与肥大细胞和嗜碱细胞表面的高亲和力IgEFc受体(fclefc r)结合致敏。同样的过敏原会重新进入身体,与致敏目标细胞表面的特定IgE结合,会导致脱颗粒,释放像组胺这样的生物活性介质,引起第一型过敏反应。3,介导类过敏反应,4,通过胎盘和粘膜:c区功能,通过胎盘:IgG意思:新生儿抗感染粘膜通过:sIgA意思:粘膜部分抗感染,第4节抗体特性和功能,1,IgG单体分子,4个子类别血清含量最高,约占血清总
8、Ig的75%。半衰期最长(20 23天),是再次反应的主要抗体;也是抗感染的主要抗体。是唯一能通过胎盘的抗体;细胞表面FcR和调理,ADCC可以结合SPA纯化抗体,免疫诊断参与II,III过敏反应,2,IgM1,5 10%血清Ig含量。2、两种形态的存在单体:MIG m在b细胞表面表达,构成BCR分泌类型:五聚体,分子量最大;3、个体发育首次合成和分泌ab;4、IgM不能通过胎盘脐血IgM通知胎儿宫内感染;5,首次体液免疫反应中最早的Ab -早期抗感染;6、半衰期:5天-血清中特定IgM的增加表明最近感染;7、补体激活能力;8、自身抗体(如类风湿因子),天然血型Ab为IgM;1 .两种类型:血
9、清-单体,血清;分泌-二聚体,由j链连接,包含由上皮细胞合成的SP,通过分泌上皮细胞分泌为外部分泌溶液;占血清Ab含量的10 15%。3,虱子,3。粘膜部分抗感染免疫的主要Ab:抗感染:阻止病原体粘在细胞表面,毒素为4。婴幼儿从母体初乳中获得sIgA是重要的自然人工免疫。,4,IgD1。单体分子;存在形态:分泌:血清,功能障碍;膜结合型:构成BCR,是b细胞发育和成熟的重要标志。未成熟b细胞:mIgM成熟b细胞:mIgM mIgD3。0.2%的血清Ig含量;半衰期:3天。米格,米格,成熟的b细胞,未成熟的b细胞,5,IgE1。单体分子;血清含量最低(0.002%的Ig);半衰期:2天;粘膜下淋
10、巴组织的浆细胞分泌;亲细胞抗体,介导I型超敏反应;6.过敏性疾病和特定寄生虫感染患者血清中特异性IgE水平上升。第5节人工准备抗体,1,抗血清的制备-多克隆抗体2,单克隆抗体技术3,基因工程抗体,1,意思:多b细胞克隆产生的抗原物质的多个抗原表位的多种抗体混合物。包含多种特定抗体的:免疫血清的优点:综合多种来源,容易准备。缺点:特异性不高,容易发生交叉反应。一个、多克隆抗体、两个、单克隆抗体(单克隆抗体,mAb),以及单个抗原表位的特定抗体。定义:杂交瘤细胞:骨髓瘤细胞-无限增殖;免疫b细胞-特定抗体的合成、分泌。混合肿瘤技术:HAT培养基-超黄嘌呤(h)甲氨蝶呤(a)胸腺嘧啶核苷(t),每个
11、异种肿瘤细胞b细胞和骨髓瘤细胞融合,单克隆抗体的制备过程,抗原(多表位)免疫小鼠骨髓瘤细胞培养脾细胞骨髓瘤细胞融合HAT第三,基因工程抗体原理:利用DNA重组和蛋白质工程技术,在基因水平上切割、接合或转化Ig分子,将其重组为新的抗体分子的人。根本出发点:解决抗体的鼠标来源问题的优点:人性化或完全人类抗体,均质化和产业化生产;缺点:亲和力弱,效价不高。掌握基因工程抗体,测试问题1,抗体的结构和功能。2、比较和熟悉各种抗体的异同。3、简述人工抗体的制备方法。60,1。木瓜蛋白酶水解IgG为a. fab部分B. fc部分c.f (ab) 2部分d.pfc 部分e .以上,2 .Ab的连续区域介于A.
12、VL与CH1之间B. VH与CH1之间C.CH1与CH2之间D.CH2与CH3之间E.CH3与CH4之间,3 .以下5种Ab的特性中有错误的是,a. IgG是通过胎盘唯一的免疫球蛋白B. siga,大部分是二聚体C. IgM的分子量最大的。免疫反应中最早的是IgGE.正常血清的IgE含量最低,4 .抗体的超带是A.VH和CHB .VL和VHC。Fc段D.VH和CLE。在CL和CH中,5 .未成熟b淋巴细胞的mIg类别为a.mIg mb.miggc.migde.migd,6 .对IgE特性的说明,以下正确的A.IgE是5类ig中最低的B.IgE是CH4区C.IgE,其型超敏反应D.IgE有亲细胞性e。IGE是系统发育中最先发生的,1 .血清中最高的Ab是最低的Ab。第5类Ab中分子量最大的是;参与粘膜免疫主要是
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