机能学实验设计兔子是否肾内是否存在乙酰胆碱能舒血管

1、.机能学实验设计大纲实验名称：兔肾内是否存在乙酰胆碱能舒血管纤维课题来源：自选设计班级：2011级临床医学本科6班设计人员：梁小龙设计日期：2013年4月14日指导老师：陈玮 一、实验设计的目的意义：实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问题的思路。目的与意义:在功能上探索肾内是否存在乙酰胆碱介导的舒血管神经纤维。本实验在功能上对肾内是否存在乙酰胆碱介导的舒血管神经纤维进行探索，通过（一）用一兔的心血管系统为另一兔的肾供血，即建立一个两兔的肾动静脉分别搭桥模型，排除再刺激本兔的迷走神经时其心血管系统和通过血液循环起作用的体液对其肾的影响；（二）根据交感与副交感拮抗支配的原理，用妥

2、阿苏林先阻断肾的肾上腺素受体，抑制交感神经活动，观察是否存在副交感活动；（三）注射阿托品阻断乙酰胆碱受体，观察是否出现副交感活动受抑制的现象。通过以上步骤从多角度观察是否存在乙酰胆碱介导的神经性舒血管作用，包括引起肾动静脉血压或尿量的变化。国内外研究现状：目前，国内外对肾的神经支配的研究绝大多数集中于交感神经，这方面的报道也比较多；运用多种方法技术，已能确定多种神经，递质及受体的存在，而且对其在肾内的各种作用了解得比较深入。存在的问题：至于对副交感的研究却较少，相关文献也不多，或仅仅提到。至今，形态学上尚未发现肾有副交感神经支配1,2；对于肾内是否有乙酰胆碱能舒血管纤维分布观点不一；虽然有报道

3、肾内存在乙酰胆碱及胆碱酯酶，但已证实其存在于交感神经纤维内3，因此也一直未能证实肾脏有乙酰胆碱介导的神经行舒血管效应，这样的情况似乎有异于人体内其他内脏器官的一般情况。解决问题的思路：用A兔的心血管系统为B兔的肾供血，刺激B兔的迷走神经；观察妥拉苏林、阿托品对A兔颈总动脉和动脉连通血压的影响。结果：刺激迷走神经，PL和PA均无变化；注射妥拉苏林，PL无立即改变，80秒后轻微上升；注射阿托品， PL无立即改变，分钟后PL和PA呈周期性同步的短暂下降。结论：肾内不存在乙酰胆碱能舒血管纤维。参考文献：1 姚泰主编，生理学（七年制规划教材），第1版.人民卫生出版社，20012姚泰主编，生理学，第5版，

4、人民卫生出版社，20003王子栋，徐有恒主编，植物性神经系统生理学基础与临床，第1版，科学出版社，1994.1-129398.4 陈克敏主编，实验生理科学教程，第1版，科学出版社，2001.5 陈主初，吴瑞生主编，实验动物学，第1版，湖南科学技术出版社，2001.6 杨世杰主编，药理学，第1版，人民卫生出版社，20017BarijiaasL,et al,light and Electron mieroscopic Localization of acetylchlinesterase activity in the rat renal nerve ,AmJAnat,1976,147,219-2

5、398 张荣宝主编，植物性神经系统生理与临床，第1版，人民卫生出版，1994,298-2999 吴德昌，孙毅久等编译，人体机能解剖学，第1版，科学技术出版社，1983.47110杨藻宸主编，药理学和药物治疗学，第1版，东南大学出版社,2000.149. 11王汝龙，金有豫主编，新编临床药物手册，第二版，重庆出版社,1999.382,4 二、实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题，实验材料，实验设计方法，实验结果，实验讨论，实验结论）。（一）实验设计目标，拟解决的关键问题设计目标：在功能上探索肾内是否存在乙酰胆碱介导的舒血管神经纤维拟解决的关键问题：在功能上肾内是否存在乙酰胆碱介导的舒血管

6、神经纤维进行探索（二）实验设计1、材料同一近交系的新西兰兔2只，BioLab-410计算机实时分析系统，哺乳类手术器械，压力换能器，电子刺激器，计滴器2、实验设计方法（1）通过交叉配血实验，确定两只兔子血型相同（分别标记为A，B），编为一组。从耳缘静脉注射1%戊巴比妥钠2、5ml/kg进行全麻。（2）A兔颈动脉插管用于测血压。（3）分离B兔左侧迷走神经。（4）分别进行腹腔手术，均分离其左肾动静脉。（5）插管连通A兔肾动脉近心端和B兔肾动脉远心端，以及A兔肾静脉近心端和B兔肾静脉远心端。（6）在肾动脉的连通管上安装两个三通，分别用于注药和接压力换能器间接测量肾动脉血压变化。（7）游离A兔右肾和B

7、兔左肾的输尿管，分别插管计尿滴。（8）待两兔血压及尿量稳定后，切断兔左侧迷走神经前后分别刺激其外周端，并记录血压及尿量变化。（）向B兔左肾的供血动脉注射2、5%妥拉苏林0、3ml/kg4,观察记录血压及尿量变化。（10）待血压及尿量变化稳定后，同法注射0、5%阿托品0、2ml/kg4,观察记录血压及尿量变化。3、实验结果 1、刺激迷走神经。PA-A兔颈动脉压，PL-连通管血压，均无变化。 2、切断迷走神经。PA、PL均无变化。 3、切断后刺激迷走神经外周端。、均无变化。 4、注射妥拉苏林后，PA无变化，PL在给药后一分钟后出现增高并维持3-4分钟。 5、注射阿托品，给药一分钟后，PA，PL同步呈周期性下降，并保持于注射前低的水平。4、讨论 刺激未切断的迷走神经，动脉连通管和A兔颈总动脉均无变化趋势，表明刺激迷走神经并没有对肾内血压造成变化，同时也没有产生影响血压的物质进入血液。即迷走神经并未进入肾内，胆汁从功能上，而为形态学上证明。 注射妥拉苏林，舒张血管，降血压，然而，注射后PL无下降，可能是因为肾的