核苷酸酶的检测和临床意义课件_第1页
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文档简介

1、5-核苷酸酶(5-NT)的检测及其临床意义,1 .定义,5-核苷酸酶的全称是5-核苷酸磷酸水解酶(5-核苷酸酶,5-NU或5-NT)。5-核苷酸酶(5-NT)是一种具有低底物特异性的水解酶,可用于多种核苷酸。它主要参与核酸的分解代谢。能特异性催化核苷5-核苷酸酶和次黄嘌呤核苷酸。5-NT在人体运动、细胞生长和发育、纤维蛋白合成、增强表皮或内皮屏障功能、神经传递、淋巴细胞再循环和粘附、免疫反应等方面发挥重要作用。广泛分布于肝、胆、胰、肠、心、脑、肺、肾、垂体、甲状腺、前列腺、睾丸等器官和组织,位于细胞膜上,是肝胆系统血清中5-核苷酸酶的主要来源。它主要存在于肝内的胆管和窦腔。来源和途径,5-nt

2、必须用肝胆系统中的高浓度胆汁酸处理才能释放到血液中。检测方法,钼蓝比色法,化学发光酶偶联率法,4。实验原理:5-核苷酸酶(5-NT)催化5-次黄嘌呤核苷酸水解生成肌苷和氨,肌苷在嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作用下生成次黄嘌呤,次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶(XOD)作用下生成尿酸和过氧化氢(H2O2),H2O2、4-氨基安替比林(4-AA)和TOOS在过氧化物酶(POD)作用下生成醌亚氨基化合物。通过测量相应波长下的吸光度变化值,获得样品中5-NT的活性。(5)标本的收集和保存,(1)细胞培养:离心后收集上清液并在-20保存标本。2.血清:室温放置2小时或2-8放置24小时,1000 xg离心20分钟。

3、3.血浆:可使用乙二胺四乙酸或肝素作为抗凝剂,并在标本采集后30分钟内以1000 xg离心15分钟。4.2-8可储存24小时,而-20可储存一周,但应避免反复冻融。样品的溶血会影响最终的测试结果,因此溶血样品不适合本测试。参考范围、速率法:正常成人血清5-NT酶活为0-11U/L钼蓝双色法:健康成人5-NT酶活为2-17U/L,儿童略低。60岁以上的人的平均年龄大约是年轻人的两倍。在原发性和转移性肝癌、胆道癌、胰腺癌、胆道梗阻、胆管炎、急慢性肝炎、肝硬化和药物性肝损伤中,5-NT活性的增加是常见的。其活性增加了2 6倍,并与病情严重程度呈正相关。 5-NT是诊断肝脏肿瘤的非常敏感的酶学指标。在病变的早期,当肝功能、肝脏扫描和相关肝脏疾病为阴性时,这种酶的活性明显增加。对于甲胎蛋白阴性的病例,用甲胎蛋白辅助诊断肝癌的阳性率可达94%。特异性高,有助于判断碱性磷酸酶的添加是肝胆系统疾病还是骨髓系统疾病(如骨癌、骨肉瘤、骨转移癌、佝偻病等)。)。在肝胆和骨骼疾病中,碱性磷酸酶可能增加。除了肝胆系统疾病中5-NT的增加,骨骼系统疾病一般不增加。4.有助于肝细胞性黄疸和梗阻性黄疸的鉴别诊断。后者的5-NT显著高于前

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