维生素C负荷试验

1、维生素C负荷试验摘要：负荷试验是评定人体水溶性维生素营养水平方法之一。其方法是先给被测者大剂量维生素，然后测定一定时间内尿中该维生素排出量。若被测者体内有充足的该维生素储备，大剂量摄入后则将从尿中大量排出，反之，被测者的该维生素营养状况较差，因而组织中储备贫乏，摄入大剂量后组织将大部分或全部储留，则尿中排出量减少。 进行维生素C负荷试验时，被测者空腹，排尿后服维生素C500mg，饮水量可视季节而定，收集服用药后四小时尿。在尿瓶中应先加入1克草酸，使尿液pH保持在3-5，维生素C稳定而不被破坏。还原型维生素C其强还原性可还原染料2，6-二氯酚靛酚，该染料在酸性溶液中呈红色，被还原后失去红色，其溶

2、液中过量，滴一滴染料时呈红色。在无杂质干扰时，被测溶液中维生素C还原的染料量与维生素C浓度成正比。关键词：维生素C、尿液、负荷量1 材料与方法1.1实验材料与设备1.1.1实验材料及试剂1.1.1.1实验材料维生素C、220ml尿液(W)1.1.1.2实验试剂：(1) 1%草酸称取草酸10克，溶解于100ml蒸馏水中。(2) 2，6-二氯酚靛酚溶液 称取NaHCO3 40.2mg,溶解于200ml沸水中，待冷，称取2，6-二氯酚靛酚染料50mg溶液于上述NaHCO3溶液中，冰箱内过夜，次日过滤在250ml容量瓶中，蒸馏水稀释至刻度，摇匀，置棕色瓶中，冷藏保存。 标定：取已标定过的维生素C溶液2

3、ml及1%草酸溶液5ml于锥形瓶中。以待标定的染料滴定，呈淡红色，15秒内不退色为终点。(3) 维生素C溶液称取维生素C粉末20mg，以1%草酸稀释至100ml，冷藏保存。标定：吸取以上维生素C溶液2ml于锥形瓶中，加入6% KI溶液0.5ml，1%淀粉溶液2滴，再以标准的0.0010N KIO3溶液滴定至终点淡兰色。(4) 0. 1000N KIO3溶液：精确称取干燥的KIO3 0.3567克，用蒸馏水稀释至100ml。(5) 0.0010N KIO3溶液：取上述溶液1ml，用水稀释至100ml，次溶液1ml相当于维生素C 0.088mg。(6) 1%淀粉溶液：称取可溶性淀粉0.5mg，加水

4、一滴，搅拌成糊状倒入50ml沸水中，混匀。冷藏待用。(7) KI 溶液：称取KI 0.6g，溶解于10ml水中，临用时配置。1.1.2实验仪器及设备烧杯、容量瓶、锥形瓶、酸式滴定管、刻度吸管、量筒1.2 实验方法步骤（1） 留尿，在留尿样前在烧杯中先放入0.2-0.3g草酸。（2） 保留约50ml尿样在小烧杯中，其余弃入厕所。（3） 取2ml尿样，以10%草酸稀释至15ml，用2，6-二氯酚靛酚滴定，至出现淡红色15秒内部褪色为终点，记录染料用量。2 实验数据记录与处理2.1 实验结果 表2-1 实验结果记录表项目实验结果尿液量（ml）220消耗0.0010N KIO3溶液的量（ml）3.12

5、标定维生素消耗染料ml数3.56标定尿液消耗染料ml数0.792.2 数据处理2.2.1 维生素C浓度维生素C浓度（mg/ml）=消耗0.0010N KIO3溶液ml数*0.088（mg/ml） 所取维生素C ml数 =3.12*0.088/2 =0.13728 mg/ml2.2.2 T的计算T（1ml染料/维生素Cmg数）=维生素C溶液浓度（mg/ml）*维生素C溶液ml数/消耗染料ml数 =0.13728*2/3.56 =0.077122.2.3 尿中维生素C含量尿中维生素C含量（mg/4小时）=VT*尿量（ml） WV: 滴定尿样时所用染料的ml数T：1ml染料相当于维生素C mg数（m

6、g/ml）W：滴定时取尿样ml数尿中维生素C含量（mg/4小时）=0.79*0.07712*220/2 =6.7 mg/4小时3 注意事项 （1） 收取尿样应调节pH至3-5，以保持尿中维生素C。（2） 取样后立即测定，操作过程迅速。（3） 所有试剂应用蒸馏水配制，滴定过程中应避免接触金属离子。（4） 尿样用1%草酸稀释，稀释倍数视尿中维生素C含量而定，负荷尿为5-10倍，最好用去燃料量为1-4ml，结果较为准确，否则可加大或减少尿样量。4 结论负荷试验是评定人体水溶性维生素营养水平方法之一。其方法是先给被测者大剂量维生素，然后测定一定时间内尿中该维生素排出量。若被测者体内有充足的该维生素储备，大剂量摄入后则将从尿中大量排出，反之，被测者的该维生素营养状况较差，因而组织中储备贫乏，摄入大剂量后组织将大部分或全部储留，则尿中排出量减少。测得尿中维生素C含量为6.7 mg/4小时，口服500mg维生素C，4小时尿中排出