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1、试剂盒试用报告基本情况单位名称吉林大学附属中学高中部试用人郭东岗申请试剂盒名称土壤中分解尿素的细菌的分离与计数试剂盒申请渠道1.洛阳会议 2.朋友推荐 3.教研组织 4.网络1、有无生物新课标实验室？2、有无相关仪器配备？3、是否开展过相关实验？有新课标实验室有实验相关的仪器设备（如超净工作台）未开展过该实验试用过程与结果实验名称：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验仪器及实验材料：实验仪器：超净工作台、取样铲、微量可调式移液器、试管、锥形瓶、恒温箱、培养皿、高压蒸汽灭菌器。实验材料：花盆土、无菌水、灭菌的信封、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数试剂盒（川布兰）。实验步骤：图1 培养基的配制（配

2、制尿素选择培养基和LB固体培养基使用川布兰公司土壤中分解尿素的细菌的分离与计数试剂盒）取样(取花盆土1g，放入灭过菌的信封中备用)样品的梯度稀释(在超净工作台中，将1g花盆土，加入到盛有99mL无菌水的锥形瓶中，震荡摇匀，制成102倍的稀释液；用移液器吸取1mL102倍的稀释液，加入到盛有9mL无菌水的试管中，震荡摇匀，制成103倍的稀释液；依次类推，配制出104、105、106、107倍的土壤稀释液)接种和培养(分别取102、103、104、105、106、107倍的土壤稀释液200uL，分别加到尿素培养基和LB固体培养基上，用涂布器将稀释液均匀涂布在培养基表面，静置10min后，放在37恒

3、温培养箱中培养24h)观察实验结果： 图2 102倍稀释尿素培养基 图3 102倍稀释LB固体培养基 图4 103倍稀释尿素培养基 图5 103倍稀释LB固体培养基实验结果分析：通过尿素培养基与LB固体培养基的培养结果的对照，可以明显观察到取自同一个稀释倍数的土壤稀释液接种到尿素选择培养基和LB固体培养基后得到的菌落数不同。鉴于两种培养基间的不同在于尿素培养基的氮源是尿素，因而可以确定在尿素培养基上具有能够分解尿素的微生物。若要从尿素选择培养基中的菌落中分离纯化出纯种尿素分解菌，则需要对培养基上的菌落做进一步的鉴定。使用试剂盒心得：优点：传统的试剂配制方法较为复杂，况且每次都要根据实际需要计算各种试剂的比例，在本实验中，若使用传统方法配制尿素固体培养基和LB固体培养基，中学生物实验教师需要大量时间来配制。川布兰公司的土壤中分解尿素的细菌的分离试剂盒中含有尿素培养基和LB固体培养基的成分，并且已经严格按照正常配方的比例混合均匀，这样就大大提高了实验教师的工作效率。不足：生物选修教材中已经提供了尿素培养基的配制方法，如果某些学校要求学生参与到培养基的配制过程中，这时使用试剂盒就不利于学生实验技能的训练。并且试剂盒中说明书中关于尿素培养基的尿素的加入方法与人教版教材中的不同（人教版是将尿素与其他试剂一起溶解，再进行高压灭菌），虽然说明书中的方法更科学，

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