05DNA限制性酶谱分析_第1页
05DNA限制性酶谱分析_第2页
05DNA限制性酶谱分析_第3页
05DNA限制性酶谱分析_第4页
05DNA限制性酶谱分析_第5页
已阅读5页，还剩9页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验5 限制性酶切分析,一. 实验目的 通过本实验了解限制性内切酶的作用原理，限制性酶切技术及限制性酶切图谱的分析方法。,二. 实验原理 限制性内切酶是一类能识别并切割双链DNA分子中特定核苷酸序列的核酸内切酶。,限制性酶切反应体系的组成 1，DNA 2，缓冲液 提供限制性酶作用所需的离子浓度及种类；提供限制性酶作用所需的 pH值 3，限制性内切酶,限制性酶切图谱的分析,DNA在限制性酶切后往往会形成多条片段，从片段的数量和大小大致可以推断DNA限制性酶切位点的多少及相对位置。 我们往往利用DNA分子量Marker读出酶切片段的大小。,DNA分子量Marker,100 bp Marker,三. 实验方法 1在0.5 ml 离心管中混和如下试剂()： DNA： 2 l 10酶切缓冲液： 2 l 无菌水： 14 l HindIII： 1 l EcoRI 1 l 237水浴 45 min,2在0.5 ml 离心管中混和如下试剂(20l)： PUC19 2l 10酶切缓冲液： 2 l 无菌水： 14 l HindIII： 1 l EcoRI 1 l 237水浴 45 min,3取10l反应液，1琼脂糖凝胶电泳检测，同时以 DNA（EcoRI/HindIII）作为分子量Marker 4.记录实验结果：对照分子量Marker，记录所得片

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 技术指导

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论