临床检验操作规程编写要求

1、临床试验程序准备要求中华人民共和国卫生部2002-04-20批准2002-07-01实施范围1该标准规定了临床试验操作程序的设计、开发和使用的基本要求。本标准适用于所有各级医疗卫生单位，制定临床检查操作程序和临床检查产品供应商如何使用产品的说明。2总则2.1操作程序是检查系统的一部分，是临床检查的技术文件。确保检查结果准确可靠是必需的。2.2操作程序应作为指导检查员正确操作的依据。但是操作程序不能用于弥补测试方法设计的缺陷。2.3操作程序应包括质量管理内容，包括检查说明、明确的质量管理和修正作用系统等。这份书面文件是临床试验操作程序的组成部分。2.4操作程序应由主任或主管技术人员负责编写，内容

2、编写的意义明确(毋庸置疑)，完整。确保每个检查者都能理解，严格按照操作程序的正确说明操作。3操作过程的内容要求每个检查项目都必须有明确、完整的操作规程数据和准确的叙述。必须具备以下条件：3.1实验原理和/或测试目的(概述)；可能包括临床应用和/或实用性。3.2使用的标本种类和收集方法、患者准备要求、标本容器的要求、拒绝标本的规定、标本处理方法、标本储存规定、标本交付规定等。3.3使用的试剂、校正剂、调节剂、徽章及其他必要物品。所有材料都应注明供应商名称、产品编号、包装量、准备要求、使用和存储要求等。3.4使用特定要求和校准程序的装置供应商名称、型号。3.5执行每个步骤，直到报告结果。3.6调节

3、剂使用水平和频率，容限修正措施。3.7计算方法。3.8参考值范围。3.9操作性能摘要。例如：精确度、患者结果报告范围、方法比较等。3.10处理超出可报告范围的结果。3.11检查结果是危险的报警值处理。3.12方法的限制(例如，干扰因素和/或注意事项)。3.13参考文献。3.14其他必要内容。4专业风格和内容根据实验室的大小和功能，操作领域的形式也应该不同。小型(单个)实验室有包含所有内容的操作程序。在多个领域的大型综合实验室中，各专业和内容的操作程序应安排在各专业室组中。解除的操作程序将保留在部门主管或相应的位置。4.1程序手册的样式应根据实验室要求和结构确定。质量管理内容和相关检查项目操作程

4、序等都要包括在内。每个程序应包括第3章所述的内容。程序手册可以用粘结剂的形式设计，便于补充和修改。4.1.1每个项目过程都需要从l页开始创建为自己的书，因此可以轻松更改。4.1.2为了便于参考，请尽可能使用图表或表格。4.1.3使用编号系统以便于访问。4.1.4部分查找卡、流程图、供应商产品索引等可以用作反映最新趋势的程序附录。4.1.5建议使用计算机创建过程简化编辑和修订过程。4.2使用领域的对象4.2.1行政和业务负责人根据程序的特定要求进行质量控制。程序还反映了实验室测试技术水平。4.2.2熟练检查员应随时对照操作规定，检查实际运行状况，保证检查质量。及时纠正发生的问题。在进行不熟悉的项

5、目检查时，没有人按领域进行指导不知道的检查。4.2.3新的检查院及研修院可以从程序中学习详细内容，严格按照规定实际操作。5使用产品文档作为直接程序的要求5.1供应商通常提供详细的产品使用说明。但是，只有在正确使用特定等级和型号仪器、指定试剂、指定校准产品(包括制造商和品种的一致性)以及特定各个阶段的操作步骤，并定期对设备进行维护和校准的情况下，实验室才能直接使用供应商产品手册作为自己的操作程序。如果5.2实验室对供应商法规要求进行了更改和修改，则产品文档不能直接用作实验室的操作过程。5.3直接引用的产品说明书必须是中文使用指南，不能使用外国说明。应包括第3章所叙述的内容。6操作程序格式要求实验

6、室中不同类型、个别项目、个别操作方法的程序必须确定单一格式。6.1在每一项目、每种方法的操作过程第1页的顶部注明：6.l.1操作程序项目名称。6.1.2操作程序的单位和部门。6.1.3文件编号。6.1.4版。6.1.5页顺序和总页数。6.1.6批准实施日期。6.1.7程序有效期和审查计划。6.1.8程序分发部门和/或个人。6.1.9领域作者、审批人和保管人。6.1.10程序修订记录。6.2以后，每一页的眉毛都有操作程序和文件号码，印有水平线。每个页面的右下足迹都有页面顺序。6.3定期审查或发现时应部分修改或更新，并注明新确认的年份和版本。董事或主管签字。7操作程序更改7.1在使用和审查中，如果

7、需要变更或更新领域，必须修改充分的实验资料，并明确必须修改的具体内容。7.2作者修改完毕后，由实验室负责人审阅，经审查同意，修改稿用新版本替换原程序，并通知各有关部门。7.3实验室负责人应将原版本、新版本程序及实验数据合并为领域修改文件，单独存档。附录a检查程序范例1例1:血清总胆固醇(TC)测定A1.1 l页面标题内容血清总胆固醇(TC)的测定(酶，CHOD-PAP法)XX医院检查科。操作规程文件编号：CGXXXX第三版共XX页从1999年1月20日开始实施这个程序每两年复审一次审阅日期：XXXX年XX月XX日复审者：XXX(签名)学科作者：XXX审批人：XXX批准日期：1999年1月19日

8、文档分发部门和/或个人：医疗科；(签名)保管人：XXX院长办公室；(签名)保管人：XXX医院档案室；(签名)保管人：XXX检查科；董事(签名):XXX临床化学实验室：XXX(签名)A 1.2原理血清中的胆固醇酯(CE)由胆固醇酯水解酶(CEH)水解为自由胆固醇(Chol)，由胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成 4-胆固醇，产生氧化氢，由氧化酶(POD)催化醌移民的最大吸收为500nm左右，吸光度与标本总胆固醇成正比。反应式如下：胆固醇酯H2OCEH胆固醇玻璃脂肪酸胆固醇02CHOD4-胆固醇10 H2022h 2024-氨基安替比林苯酚福特敞口4H2OA 1.3抽样收集和处理特别是在血脂分析中，要

9、强调“分析前”各环节的质量控制。A 1.3.1被检查者(体检对象或患者)的准备：总胆固醇不一定使用空腹皮。测量甘油三酯、脂蛋白、载脂蛋白的患者要空腹12小时，24小时不喝酒后采集血样。体检对象抽血前的两周内，要保持平时的饮食习惯，最近体重稳定，应该是急性性病、创伤、手术等意外情况。怀孕后期可能会提高各种血脂，因此，分娩后或结束母乳喂养后3个月进行检查，才能反映基本的血脂水平。确认是否使用了影响血脂的药物，如低脂药、避孕药、噻嗪、受体阻断剂、免疫抑制剂、特定降压药、降糖药、胰岛素和其他激素制剂，根据使用中的药物的特性，要在数天或数周内停止使用药物，否则要记录药物使用情况。身体检查对象及前瞻性观察

10、者的血脂发生季节性变化，因此也要注意采血的季节，为了比较前后，要在每年同一季节进行检查。应该嘱咐被检查对象在抽血前24小时不要做剧烈运动。A 1.3.2静脉采血：如果不是病床上的患者，通常在采血时就位。姿势影响血管内外水分分布，因此影响血脂水平。例如，5min可以将血脂浓度提高5%，15min可以提高到16%，因此在采血前至少要静置5min。一般从肘静脉采集血液，使用止血带的时间不到1分钟，穿刺成功后立即释放止血带。5min静脉阻断可使甘油三酯增加10 15%。A 1.3.3抗凝剂：在我国大量使用血清进行血脂检测。使用血浆时，最好使用EDTA na 2 (1mg/ml)抗凝剂。抗凝血浆的总胆固

11、醇及甘油三酯水平比血清低约3%，使用EDTA的血浆水平越低，就越明显。但是肝素抗凝剂不影响血浆中的水平。A 1.3.4标本处理：血液标本应尽快送到实验室。在室温下放置30分钟 45米in后，离心血清或血浆，然后放入干净的试管印章保管。4C保管在室温下不超过3h，稳定4天。设置-70C可以长期存档，但不能重复冻融。A 1.4试剂A 1.4.1酶试剂：本学使用XX公司XX产品编号工具包作为干粉试剂。使用前用水再溶解，即可使用。每瓶干粉重溶为XXml。溶解后试剂的主要成分如下：磷酸盐缓冲液ph 7.70.4 mol/l假单胞菌胆固醇酯水解酶800U/L诺卡地亚胆固醇氧化酶400U/L辣根过氧化物酶1

12、000U/L胆汁酸钠3mmol/L4-氨基安替比林0.5mmol/L苯酚3.5mmol/L聚氧乙烯表面活性剂3g/LA1.4.2总胆固醇校准血清：XX企业也提供，产品编号为XX。A1.4.3试剂和校准血清的稳定性：4 不储存的试剂稳定到有效期。可溶性试剂可在2 8稳定7天，在15 25稳定3天。如果试剂在稳定期间出现明显的粉红色，请不要使用o，扔掉具有500nm到520nm过滤器的A1.5仪器，XX型号光电比色计。A1.6任务标本是及时分离的空腹血清和肝素或EDTA抗凝血浆。该法是终点法。试管和标准管分别添加标本和标准血清10uL，酶试剂1.00mL后，在37 放置10min，或在20 251

13、0分钟后用比色法调0，用波长500nm或520nm稳定颜色至少60分钟。A.1.7计算a测量C=c0 - (a1)a标准格式：血清总胆固醇浓度，C测定mmol/l；样品管的吸光度测定；a标准标准管吸光度；Co矫正血清总胆固醇浓度，mmol/l；a，1.8操作性能A 1.8.1精确度：批次内CV1.5%，批次间cv 2.5%；A 1.8.2准确度：如果校准了设定为基准方法(ALBK方法)的血清，则该方法的测量结果基本上与ALBK方法一致。A 1.8.3灵敏度：如果总胆固醇为5.2 mmol/l，则比色吸光度A500nm约为0.30-0.35。A 1.8.4可报告范围：血清对酶试剂的比率为1: 1

14、00时，测定限度为13mmol/l。A 1.8.5特异性：血清中的各种非胆固醇甾醇可能与此试剂有某种颜色。在普通人的血清中，非胆固醇约占总胆固醇的1%，这在通常的测定中是无法估量其影响的。A 1.8.6干扰：血红蛋白高于2g/L时可能引起积极干扰；胆红素170umol/L有明显的负干扰。抗坏血酸和甲基多巴的血液浓度高于治疗水平时，也降低了结果。高甘油三酯血症(血清混浊)一般在本法(血清和试验容量1: 100点)中没有明显影响。州1本法是中国医学会检查学会推荐的测量总胆固醇的惯例方法(见中国医学检查杂志1995，18: 185)。2试剂中有两种酶-胆固醇酯水解酶和胆固醇氧化酶的质量很重要。必须能

15、有效水解各种脂肪酸的胆固醇酯(某些微生物来源的酯酶不易水解花生糖酯)，胆固醇的氧化必须完整。血清标本对总胆固醇的反应速度要在选择工具包时进行测试，好的试剂一般在5min内(部分1 2分钟)，反应可以到达终点。反应在10分钟内未完成的试剂，不应使用，因为初级酶质量不好或酶太少，会导致高胆固醇结果低。本法所用试剂以标本和酶试剂的使用比例为l: 100，可报告范围最高为13mmo1/L，过高标本比例可降低测定限度。如果标本的总胆固醇浓度超过13 mmol/l，用生理盐水稀释后再测定。目前临床上几乎不需要玻璃胆固醇测定。如果需要测定玻璃胆固醇，最容易的就是酶法，即从上述总胆固醇试剂中去除酯水解酶；一般

16、来说，玻璃胆固醇约占胆固醇的30%。3总胆固醇的测定需要标准化，必须有符合国际标准、准确可靠的标准参考物质(SRM)。(1)如果总胆固醇用酶法测定，血清中的大部分胆固醇都会酯化。而且血清基质对酶反应有很大影响，不能用纯胆固醇溶液作为标准。世界国家标准与技术研究院(NIST)提供的代号SRM909，参照血清作为总胆固醇测定的主要标准。我国也建立了国家一级标准GBW09138“人类血清胆固醇标准物质”。为了确保检查结果准确可靠，上述工具包必须具有可在上述参考血清中追溯的校准血清。2)总胆固醇值管理产品不能用作标准。3)本法使用的校准血清是液体，使用前要充分混合。A1.9参考值人口中血脂水平取决于生活因素，特别是饮食营养，因此各地区调查的参考值高低应根据冠心病的流行病学研究及临床经验来决定。1.制定高胆固醇分割标准。欧洲和美国制定的标准大体相同，40岁以上人口总胆固醇水平的划分大致可以定为：适当级别5.17 mm01/l(200mg/D1)；边缘级别5.17mm01/l至6.46 mmol/l (201mg/dl至219mg/dl)；高胆固醇血症6.47mm01/L(220mg/dl)。A1.10临床意义影响总胆固醇水平