抑菌试验ppt课件

1、实验三牛津杯法抗菌试验(杯盘法)，扩散法包括纸片法、牛津杯法和冲孔法。 扩散法操作简单，成本低，被许多实验室和基础单位采用，所以稀释法包括试管稀释法和微量稀释法，通过在含有不同浓度药物的培养基上测定细菌的生长情况，判断最低抗菌浓度(MIC )。 简称扩散法、药敏试验、抗菌药敏试验、药敏试验，试验敏感性不可预测的分离菌株，测试抗菌药在体外对病原微生物是否有抑制作用，指导治疗药的选择和区域内常见病原菌耐药性的变迁，有助于经验治疗，药敏试验方法主要是其中扩散法是手工测定方法，通过测定药物纸片或牛津杯固体培养基上抗菌环的大小，判断细菌对该药物是否敏感。 稀释法包括试管稀释法和微量稀释法，通过在含有不同

2、浓度药物的培养基内测定细菌生长情况，判断最低抗菌浓度(MIC )。 扩散法由于操作简单、成本低，已被许多实验室和基层机构采用。 扩散法也包括纸片法、牛津杯法、打孔法。 将培养基放入培养皿中培养，另一方面，试验菌(指示菌)开始繁殖，另一方面，抗生素呈球面扩散，形成减少的梯度浓度，离杯子越近，抗生素浓度越大，离杯子越远，抗生素浓度越小。 牛津杯周围抗菌浓度范围内的细菌生长得到抑制，形成了透明的抗菌圈。 抗菌环的大小反映了细菌对测定药物的灵敏度(药物敏感性实验)和药物对指示细菌的抗菌度(抗菌试验)。 一、实验原理、抗生素浓度越高，抗菌圈越大。 在抗菌圈的边缘，琼脂培养基中含有的抗菌物质的浓度是该菌悬

3、浊液中对这种指示菌的最低抗菌浓度(MIC )。 抗菌圈的直径与药物检查菌的最低抗菌浓度呈负相关，也就是说抗菌圈越大，MIC越小。 一、实验原理、二、实验材料培养基：牛肉糊胨固体培养基菌种：大肠菌(E.coli )黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus )枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis )药品：阿莫西林、黄芪多糖，其他：奥克酒精灯、涂层器、移液管、1mL、200uL枪头、恒温培养箱、超清洁桌、接种环、“牛津杯”是装有测定的抗生素的不锈钢制的小管，小管的内径为6mm、外径为8mm、高度为10mm的圆牛津杯，三，实验操作，1 .倒板：加热到灭菌后的琼脂培养基完全溶

4、解，倒入培养皿中，每盘约20ml，凝固。 2 .标记：菌种、牛津杯配置位置、药物及其浓度3 .菌悬浊液的调制：用生理盐水洗涤试管内的菌苔并稀释。 4 .菌液涂布：在平板表面吸入1mL菌液，用涂布器均匀涂布。 5 .放置牛津杯：在培养基表面垂直放置牛津杯，轻轻加压使其与培养基接触。 6 .放入待检查的药液：在杯子里放入不同稀释度的药液或待检查的样品。 7 .孵化：饱腹后，在37 下培养1618 h。 8 .结果报告：用毫刻度测定抗菌环直径，参照表的标准，根据敏感(s )、中介(I )、耐药性(r )，以牛津杯周围肉眼看不到生长物的区域作为抗菌环，从抗菌环直径的大小判断细菌对抗菌药的敏感性。 药物敏感性试验结果的判定标准：抗菌轮径(mm)20极敏感15-20高敏感10-14中敏感10低敏感0敏感，注意事项，在超清洁桌或酒精灯旁操作平板，必须使牛津杯直立， 保证杯内抗菌物质均匀地向四方扩散的牛津杯均匀地放置在培养基上，位置适度，防止抑制轮重叠，可以在平盘中央1个，外周等间隔地放置5-6个。思考问题、青霉素、头孢菌素类药物的抗菌机制如何？药敏试验、抗菌药