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文档简介
1、培养液中酵母菌种群数量的变化,方案设计过程,(一)提出问题:培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的? (二)作出假设:环境中的资源和空间有限的条件下,酵母菌种群的数量呈S型增长。 (三)设计实验 全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组。 分别用等量培养液,在相同适宜环境中培养等量酵母菌。 每天用血球计数板,采用抽样检测的方法计数一个小方格内的酵母菌数量并作记录,连续7天。 7天后,各组向全班汇报本小组7天的数据,算出每一天数据的全班平均值,根据平均值画出酵母菌种群数量的增长曲线。,血细胞计数板,血球计数板的结构,血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器,由一块比普通载玻片厚的特制
2、玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。,1mm,1mm,方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的 一个大方格为计数室,供微生物计数用。,方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。,大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm1mm0.1mm,其容积为0.1mm3; 大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,即2mm2mm0.1mm,其容积为0.4mm3,计数室通常也有两种规格:,1625型: 即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格,2516型: 即大方格内分为25中格,
3、每一中格又分为16小格。,不管计数室是哪一种构造,其每一大方格都是由1625=2516=400个小方格组成。,计数:,1625型: 一般取四角的四个中方格(100个小方格)计数,2516型: 一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。,计算:,以1mm1mm0.1mm型为例:,计数室容积为0.1mm3,每个个小方格细胞总数 40010000稀释倍数,酵母细胞个数1mL =,例1:通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm1mm0.1mm方格,由400个小方格组成。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。,2108
4、,练习:在用血球计数板(2mm2mm方格)对某一稀释50倍样品进行计数时,发现在一个计数室内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵菌 个,2x107,1.加样品: 将清洁干燥的血球计数板的计数室上 加盖专用的盖玻片,用吸管吸取稀释后的 酵母菌悬液,滴于盖玻片边缘,让培养液 自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止 产生气泡。多余培养液可用滤纸吸去。,操作注意事项:,2.计数: 稍待片刻(约5min),待酵母菌细胞全部 沉降到计数室底部后,将计数板放在载物台的 中央,先在低倍镜下找到计数室所在位置后, 再转换高倍镜观察、计数并记录。,对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数,一般可采取“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则处理,另两边不计数。,3. 取样:从试管中吸出培养液进行计数之前,将试管轻轻震荡几次。使酵母菌在试管里分布均匀,提高计数的代表性和准确性。后期取样要稀释,否则数量过多无法计数。,怎样记录结果?记录表怎样设计?
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