免疫与健康课件模板-014(共17)

1、免疫与健康 课件模板-14,免疫与健康：七、LAK细胞,七、LAK细胞：,1982年，有人发现，如在外周血单个核细胞的培养液中加入白细胞间介素II（IL2），再培养46天，就能诱导出一种非特异性的杀伤细胞，这种细胞可以对CTL、NK细胞不能杀伤的多种肿瘤细胞具有杀伤作用。这种细胞称为淋巴因子激活的杀伤细胞，简称LAK细胞。 现在已弄清LAK细胞的前身是NK细胞和T淋巴细胞，它们在IL2的作用下，可被诱导成为具有广谱的抗瘤活性，可以成为溶解多种肿瘤细胞的LAK。,免疫与健康：七、LAK细胞,七、LAK细胞：,随着培养和分离淋巴细胞方法的改进，现已可培养出多种各有特点的LAK细胞，如：ALAK细胞

2、，这种将脾或外周血中的单个核细胞悬液，先除去单核/巨噬细胞，然后在塑料培养瓶中用IL2活化培养，收集贴壁的细胞，然后再用IL2培养，得到粘附性的ALAK细胞，它具有更高效的杀伤肿瘤细胞的作用。,免疫与健康：七、LAK细胞,七、LAK细胞：,PHALAK细胞，这是用健康“O”型供血者的外周血单个核细胞，经植物凝集素（PHA）预刺激48小时，然后用IL2诱导的LAK细胞。PHALAK具有增殖能力强，细胞毒活性高的特点。肿瘤浸润的淋巴细胞（TIL细胞）：这是从肿瘤的活检和切除的肿瘤标本或从肿瘤浸润胸腹腔渗出液中以及转移的淋巴结中，先分离出较单纯的TIL，其中所含的少量肿瘤细胞，可在培养过程中（23周

3、后）逐渐死亡。,免疫与健康：七、LAK细胞,七、LAK细胞：,随后的培养条件与LAK相同，待其增殖到一定数量后，即可回输到患者自身中。TIL细胞的最大特点是对肿瘤具有特异的杀伤作用。CD3LAK：它的前体细胞的来源以及准备与LAK相同，只是需要在细胞培养中加入CD3（CD3是T淋巴细胞的表面标志抗原）的单抗，由于CD3单抗能识别CD3分子，两者结合，即可刺激T淋巴细胞活化、分裂增殖。,免疫与健康：七、LAK细胞,七、LAK细胞：,T细胞一经被CD3激活后，只需要低浓度的IL2，就可维持T细胞的活跃增殖。细胞扩增至一定数量后，即可应用于治疗。 目前LAK细胞的治疗方案多与IL2联合应用。该疗法对

4、某些病人可产生一些副作用，如引起寒战、发热这种副作用一般均属暂时性和可逆性，静注杜冷丁即可奏效，停止治疗可很快消失。,免疫与健康：八、TIL细胞,八、TIL细胞：,早在100年前Eurlich就报告了人和动物肿瘤组织中有淋巴细胞的浸润，这些浸润的淋巴细胞被认为是一种机体对肿瘤细胞特异性免疫反应。1986年Rosenberg等从小鼠肿瘤中分离出浸润淋巴细胞，将它在体外用白细胞介素II（IL2）扩增到一定数量后，重新输回到长瘤的小鼠后，能有效地控制肝、肺转移灶的生长，甚至可使有些小鼠的转移灶和原发灶的肿瘤完全消退。,免疫与健康：八、TIL细胞,八、TIL细胞：,这种淋巴细胞称为肿瘤浸润淋巴细胞（T

5、IL），它是一种新型的抗肿瘤效应细胞，具有高效、特异、副作用小等优点。经测试TIL细胞的抗肿瘤效果是LAK的50100倍，如把TIL细胞回输到体内血液及肿瘤中可以存留达二月之久，因此它有着巨大的潜在治疗价值。TIL已应用于临床，主要治疗皮肤、肾、肺、头颈部、肝、卵巢部位的原发或继发肿瘤。,免疫与健康：八、TIL细胞,八、TIL细胞：,Rosenberg对20例恶性黑色素瘤患者先使用CTX化疗，然后用患者自体TIL和IL2治疗，结果有60例的病人获明显的疗效，发生在肺、肝、肾、皮肤和皮下部位的癌肿均可缩小，并维持达213个月。,免疫与健康：九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法,九、肿瘤的第四种疗法肿

6、瘤生物疗法：,自80年代中期以来，肿瘤生物治疗已成为继手术、化疗和放疗之后的第四种肿瘤方法，它已被广泛研究和用于临床，并取得一定疗效。肿瘤生物治疗主要包括肿瘤免疫治疗和基因治疗两大方面，前者包括抗癌效应细胞的激活，细胞因子的诱发，抗癌抗体（即导向治疗）的筛选、新型疫苗的研制，这些都与免疫学理论的发展和分子生物技术的进步密切相关。,免疫与健康：九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法,九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法：,而基因治疗（或称转基因治疗）虽然难度很大，但它是生物治疗的方向，让这些细胞自然增长，分泌有效因子，以调节各种抗癌免疫活性细胞或直接作用于癌细胞，这应是治疗微小转移灶和防止复发最理想的手段

7、。对此已在多方面进行深入、细致地研究。现将当前肿瘤生物治疗研究中有待深入探讨的问题简介如下： 1、肿瘤生物治疗中的“特异性”问题 “特异性”应该说是肿瘤生物治疗的中心环节，也是这一治疗方法能否获得成功的关键。,免疫与健康：九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法,九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法：,目前研究主要集中于以下几方面：一是肿瘤抗原肽的研究，通过CTL、TIL克隆来寻找、分离、筛选鉴定肿瘤特异的抗原肽。二是增强肿瘤抗原性的研究，从细胞、分子、基因水平探讨提高其免疫原性，使它能对机体产生强的免疫反应，并以此为线索来制备肿瘤特异性瘤苗。三是有效地提高激活T细胞所需条件（因子）的研究。,免疫与健康：

8、九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法,九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法：,四是用免疫调节剂、细胞因子、免疫佐剂等来打破肿瘤对机体的免疫抑制。 2、效应细胞抗癌活性的再扩大。NK细胞抗癌作用的再扩大。新近研究表明，NK细胞与T、B细胞是由共同的前体细胞发育而来，它不仅对靶细胞有溶解杀伤作用，更主要的是通过分泌多种细胞因子对巨噬细胞、粒细胞和树突状细胞的调节，因此能加强机体的天然免疫力。,免疫与健康：九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法,九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法：,新抗癌细胞因子的发现与研制：现在发现的细胞因子已不下数十种、仅白细胞间介素已达18种之多。细胞因子及其所构成的网络，不仅在激活免疫细胞

9、、诱生细胞因子和调节整个抗癌免疫反应和造血系统中起着重要的作用，有的还具有直接抑制肿瘤细胞的增殖、转移等功能，因此是肿瘤生物治疗的重要制剂。目前重组的白细胞间介素II（IL2）、红细胞生成素（EPO）、粒细胞集落刺激因子（GCSF）、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GMCSF）以及、和干扰素（IFN、IFN、IFN）等细胞因子已批准上市。,免疫与健康：九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法,九、肿瘤的第四种疗法肿瘤生物疗法：,新近发现的IL15和IL18在抗肿瘤免疫中均有潜在的应用前景，正在积极研究开发。此外，肿瘤生物治疗合理方案的制定，基础和临床研究的密切配合以及基因治疗等都有进一步深入研究。,免疫与

10、健康：十、肿瘤疫苗,十、肿瘤疫苗：,疫苗如乙肝疫苗、狂犬病疫苗等，在控制传染病方面具有独特的预防作用，这是众所周知的事实。但肿瘤疫苗却用于治疗，它是利用肿瘤细胞或肿瘤抗原物质诱导机体的特异性细胞免疫和体液免疫反应，增强机体的抗癌能力，阻止肿瘤的生长、扩散和复发，因此称它为肿瘤特异性主动免疫治疗，它已经经历了100年的研究历程。,免疫与健康：十、肿瘤疫苗,十、肿瘤疫苗：,近年来，随着分子生物学理论的研究和生物工程技术的进步，更受到人们的重视。许多科学家和临床医师在不同层次上，有用不同的形式以求获得最有效、最方便、最经济的疫苗制剂，现简介如下： 1、肿瘤细胞及其衍生物疫苗：即原始的肿瘤疫苗，它是以

11、灭活的自身肿瘤细胞或其粗提物作为抗原，加佐剂后进行免疫治疗。,免疫与健康：十、肿瘤疫苗,十、肿瘤疫苗：,2、应用分子生物学方法制备出肿瘤相关抗原（TAA）、肿瘤特异抗原（TSA）以及肿瘤抗原肽疫苗来进行免疫治疗。 3、肿瘤基因疫苗，这是通过基因重组技术，将目的基因导入受体细胞所制备的疫苗，也是目前发展最快，倍受人们重视的一个研究领域。这种疫苗具有以下优点：可以提高机体抗瘤能力：如将某些免疫增强基因导入免疫细胞，使这些外源基因在免疫细胞中表达，再回输到病人体内，这样就可加强机体免疫系统的功能，特别是使输入的免疫活性细胞在肿瘤局部区域分泌出高浓度的细胞因子，以促进对肿瘤细胞的杀伤。,免疫与健康：十

12、、肿瘤疫苗,十、肿瘤疫苗：,增强肿瘤细胞的免疫原性：把可增强肿瘤细胞抗原性的有关基因导入肿瘤细胞，使免疫细胞易于识别，不能逃避免疫监视并促进细胞毒性T淋巴细胞的抗瘤活性。表达产物的直接杀瘤活性：如将肿瘤坏死因子（TNF）的基因，导入TIL或肿瘤细胸，使之能在体内持续的分泌TNF，以此杀伤肿瘤细胞。值得注意的是，许多新型瘤苗的研究尚处于初创阶段，虽取得较理想的效果，但大多在动物中进行。,免疫与健康：十、肿瘤疫苗,十、肿瘤疫苗：,在临床试验方面，到1997年初，世界上总共记录有2103例基因治疗病例，但尚有不少问题需要进一步研究解决，相信随着肿瘤免疫学的发展和实验技术的进步，以及治疗方案的合理设计

13、肿瘤疫苗一定会成为强有力的肿瘤治疗手段。,免疫与健康：十一、生物导弹与肿瘤导向治疗,十一、生物导弹与肿瘤导向治疗：,众所周知，导弹的主要部件一是能追踪目标的导航系统，二是摧毁特定的目标。应用这一原理制备出一种能追踪肿瘤而又能专一性地杀伤肿瘤的“武器”，我们就称之谓“生物导弹”，它的基本部件是能特异地识别肿瘤抗原目标的抗体以及在抗体的末端接上杀伤瘤细胞的毒性药物。这样从理论上讲，只要我们研制出有可识别肿瘤细胞的抗体，并使它带上药物就可大功告成。,免疫与健康：十一、生物导弹与肿瘤导向治疗,十一、生物导弹与肿瘤导向治疗：,但事实上并不那么简单，首先是抗体问题，早期人们是用纯度及特异性相对较高的肿瘤抗

14、原免疫小鼠后的完整抗体（即由识别抗原簇的Fab片段和Fc片段所组成的免疫球蛋白）,使它的“尾端”（Fc片段）携带上放射性核素碘（125I）；1975年杂交瘤技术的建立及单克隆抗体的问世，使单抗与放射性核素的结合，推动了肿瘤导向治疗的进展。,免疫与健康：十一、生物导弹与肿瘤导向治疗,十一、生物导弹与肿瘤导向治疗：,然而，经过一段时间的实验，单抗与多抗在体内治疗的结果，并没有明显的差别，其主要原因是：单抗和多抗都是完整抗体，它们一旦进入机体，就会被正常组织交叉吸附，不能相对集中地到达靶肿瘤；而且不容易清除和排出体外；由于完整抗体的分子量大，不易通过机体的生理屏障（如结缔组织等）进入肿瘤中心部位；由

15、于完整的抗体都来源于小鼠，对人体来说是一种异性蛋白，所以可在体内产生抗抗体而被中和。,免疫与健康：十一、生物导弹与肿瘤导向治疗,十一、生物导弹与肿瘤导向治疗：,由于存在以上问题，因此使完整抗体用于导向治疗受到限制。 根据以上存在的问题，近十年来科学家们已设法研究制出应用小分子量的抗体片段，而且设法用人人杂交瘤来制备人人单克隆抗体，目前又用基因工程的方法来制备出基因工程抗体，这是一种不含Fc片段的Fab小分子多肽，并建立了双功能抗体技术。,免疫与健康：十一、生物导弹与肿瘤导向治疗,十一、生物导弹与肿瘤导向治疗：,后者有特异性识别的双臂（即把两个Fab片段结合在一起），因此有双重识别能力，即既可以

16、与肿瘤结合，又可与药物弹头相连接。由于基因工程抗体不含Fc片段，因此减少了非特异吸附，并可将鼠源性成分减少到最低限度；小分子的基因工程产物，有利于杀瘤物质进入肿瘤内部且不易被宿主识别为异物而产生抗抗体；这种双功能抗体，使弹头直接命中瘤细胞，若将双功能抗体与LAK，TIL细胞联合应用，则可获得更大的效应，从而有效地控制恶性肿瘤的发展。,免疫与健康：十二、超声免疫肿瘤,十二、超声免疫肿瘤：,新近发现超声可杀灭肿瘤细胞，破坏肿瘤组织，抑制肿瘤的增殖，这在体内外都得到了证明。那么超声为什么可以治疗肿瘤呢？原来超声所产生的热效应和空化效应能诱发机体的免疫反应，这对杀灭残留癌细胞可起很好的作用。 肿瘤细胞

17、致死温度临界点在42.543，正常细胞则为45。现已证明肿瘤局部热疗可以诱发机体的免疫反应。,免疫与健康：十二、超声免疫肿瘤,十二、超声免疫肿瘤：,有人用小鼠为实验对象，测定热疗前后自然杀伤细胞活性的变化、并观察肺部转移率、转移结节的大小及原发灶生长情况。结果在热疗后NK活性有不同程度的提高。原发肿瘤不仅生长速度下降，而且体积逐渐缩小。动物的肺转移率显著低于对照组。对肿瘤病人的热疗也表明可诱发机体免疫功能的加强。 肿瘤热疗诱机体免疫功能增强的主要机理包括：热疗后肿瘤细胞变性和坏死的分解产物被机体吸收后，可作为一中抗原刺激体的免疫系统，从而产生抗肿瘤的免疫力；热疗可破坏或解除肿瘤细胞所分泌的多种免疫抑制因子，使机体恢复对肿瘤的免疫应答反应。,免疫与健康：十二、超声免疫肿瘤,十二、超声免疫肿瘤：,热刺激不仅可增加肿瘤细胞各种细胞因子（如白细胞间介I、II和肿瘤坏死因子等）受体的活性，以利由免疫细胞所分泌的细胞因子对肿瘤的杀伤；而且还可改变肿瘤细胞抗原的表达，增加热休克蛋白的合成，从而增强机体抗肿瘤的