葡萄的组织培养.ppt

1、葡萄的组织培养，本节的主要内容，介绍葡萄品种葡萄的组织培养问题，是葡萄科(vitaceae )葡萄属(vitis )落叶木质藤本莓果树。 葡萄科有14个属968种植物，葡萄属植物中有经济价值的约20多种。 成熟的浆果中含有15%25%的葡萄糖和果糖，以及很多对人体有益的矿物质和维生素。 葡萄是多年生果树，以嫁接、扦插等无性方式繁殖，长期无性繁殖会导致多种病毒的积累。 用葡萄鉴定的病毒达到55种以上，其中扇叶病、卷叶病、茎痘病和栓皮病放流最广。 葡萄品种，红葡萄品种白葡萄品种，赤霞珠/解百纳，蛇龙珠/解百纳，香奈儿/霞多丽，雷司令官，葡萄组织培养的顺序，(1)材料，通过外植体消毒和接种，将大树和

2、插枝伸长到57片叶软的前端，长度为510厘米用自来水清洗35分钟，在70%酒精中浸渍3040秒，用蒸馏水清洗23次，再加入0.5%氯化水银溶液中消毒710分钟，最后用无菌水清洗56次。 在无菌条件下分离约2mm的茎尖，接种到培养基中。 (二)培养基的制备，葡萄茎尖分化培养基为MS培养基(无机盐减半为好)，添加BA12、NAA0.01、LH100、蔗糖2%、琼脂0.6%，B5培养基愈伤组织化严重，茎尖生长差。 (3)茎尖分化、接种生存的茎尖一个月左右，幼叶和侧芽开始分化，两个月左右，侧芽的增殖形成芽丛。 由于品种不同，对BA和NAA的反应不同，所以生长有明显差异，巨峰、大粒白香蕉、红霞玉等品种，

3、前端优势强，侧芽生长势弱，虽然增殖率低，但成苗率高的白羽、白雅、白谢希、贵人香等多种品种侧芽分生能力强(4)茎尖苗的生长，在茎尖分化培养中产生的苗的生长率低，苗的生长困难，密集生长的芽丛，在可以将分化培养基中的BA浓度降低到0.5的同时，添加GA30.2的话，1个月的培养，可以生长成23cm高的幼茎。 另外，对幼茎的伸长进行黑暗处理，也有提高苗的成长率的效果。 (5)把苗搅拌移植，试管苗成长后，转移到温室和塑料的大绷带上，在自然光下搅拌苗。 要求温度为2025，两周后打开试管栓，接受自然光、温度、湿度训练45天。 用镊子夹着叶柄从培养基中取出苗，洗掉培养基的残留物，直接种在温室和隧道中小拱形中

4、的沙土和粗砂中，流入底水。 架子里的湿度保持在90%左右。 10厘米以下地温在15左右稳定，光为40005000勒克斯。 1520天后幼叶变成绿色时，可移植到大田，成活率达80%以上。 小屋内温度过高时，要拉上通风和芦苇窗帘，冷却，喷洒冷水，提高小屋内空气湿度和土壤湿度，保持壮苗的适当条件。 问题是，探索在组织培养中为什么会发生玻璃化现象。如何解决呢？ 玻璃化的意思是，植物材料持续体外繁殖时，一部分培养物的柔软的茎和叶变成半透明的腌制状的现象通常被称为玻璃化。 玻璃化的试管苗叫做玻璃化苗。 玻璃化苗的症状有：1.试管苗微小肿胀，失绿，茎叶表皮没有蜡质层，没有功能性气孔，叶、嫩尖是水晶透明或半透明的2 .叶片蜷缩竖向卷曲，脆弱易坏的3 .组织发育不全或畸形体内的水分量高，干物质等的含量1 .适当控制培养机中无机营养成分；2 .适当提高培养