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文档简介
1、实验问题7:为什么我们经常使用密度为1.077土壤和0.002的分层液体来分离人类单核细胞?答:这与人体外周血中各种成分的密度有关。血小板:1.030-1.035,淋巴细胞:1.075-1.090,粒细胞: 1.092,红细胞:1.093。因此,当血液叠加在1.077土0.002的分层溶液上时,离心后,单核细胞将处于血浆和分离液之间,从而达到分离的目的。实验8:中性粒细胞吞噬作用的检测;临床微生物学和免疫学系;1.实验目的:掌握中性粒细胞吞噬试验的原理。熟悉中性粒细胞吞噬试验的操作方法。第二,实验原理,中性粒细胞具有吞噬细菌和外来颗粒的能力。在体外将嗜中性粒细胞与细菌或外来颗粒一起孵育后,它们
2、可以被嗜中性粒细胞吞咽和摄入。显微镜下,中性粒细胞中有细菌或外来颗粒。第二,实验原理,计算嗜中性粒细胞吞噬细菌或外来颗粒在嗜中性粒细胞总数中的百分比,以及每个嗜中性粒细胞吞噬细菌或外来颗粒的平均数量,这可以反映嗜中性粒细胞的吞噬功能。三。实验设备、标本:人抗凝血吞噬细胞:金黄色葡萄球菌培养基:肉汤培养基试剂:瑞士-姬姆萨染料溶液、无菌生理盐水设备:柠檬酸钠抗凝管、试管、载玻片、培养箱、显微镜等。吞噬细胞的制备:将金黄色葡萄球菌接种于肉汤培养基中12h,然后在4下保存备用。2.准备测试样品:柠檬酸钠抗凝1毫升。4。实验步骤、实验步骤、混合培养:在1毫升抗凝剂中加入3-5滴金黄色葡萄球菌悬液,混匀
3、,放入37水浴中,孵育30分钟,每10分钟摇匀一次。制备细胞玻片,瑞吉染色:油显微镜观察:计数200个中性粒细胞,记录吞噬细菌的细胞数和每个中性粒细胞吞噬的细菌数。5.从结果来看,嗜中性粒细胞核深染,分成叶,细胞质微红,细菌呈紫色,-,吞噬百分率(%)=100%吞噬指数=参考区间:吞噬率(915.8)%;吞噬指数大于1,计数中性粒细胞吞噬细菌,计数中性粒细胞,计数中性粒细胞,计数中性粒细胞,-,6。注意事项,1。抗凝剂的选择:肝素抗凝时,白细胞着色差,瑞吉染色后易出现深蓝色背景;乙二胺四乙酸影响白细胞的吞噬功能。构树钠是最合适的抗凝剂。2.细菌浓度和培养温度:3。血涂片质量:7。应用和评估。该试验可用于检测具有吞噬功能障碍的疾病,如NBT(硝基蓝四唑还原试验),该试验可在一定程度上反映机体的免疫功能,也可用于筛选具有免疫调节活性的药物。该方法操作简单,不需要特殊设备,节省时间,成本低。然而
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