基因工程、细胞工程、胚胎工程流程图_第1页
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文档简介

1、特定的生物(全部或部分DNA)、限制酶、多个DNA片段、多个重组DNA、受体细菌的不同个体、分别导入、DNA连接酶、载体、群体(基因组或部分基因库)、(其他对象有不同的DNA片段)、(从基因组库中提取目的基因,制备目的基因:2。利用PCR技术扩增目的基因,(1)逆转录方法:以转录目标基因的信使RNA为模板,逆转为互补的单链DNA,然后通过酶作用合成双链DNA,获得所需的基因。目的基因的mRNA,杂交双链(单链RNA/单链DNA),单链DNA,逆转录酶,双链DNA(目的基因),3,人工合成目的基因(DNA合成器),已知的核苷酸序列,以及,(2)根据已知氨基酸序列的DNA合成方法:根据已知蛋白质的

2、氨基酸序列估计相应的信使RNA序列,然后根据碱基互补配对原则估计其结构基因的核苷酸序列,然后通过化学方法以单核苷酸为原料合成目的基因。蛋白质的氨基酸序列,mRNA的核苷酸序列,基因的核苷酸序列,推测,推测,目的基因,化学合成,蛋白质的氨基酸排列顺序可以使用测序自动完成。如何构建?如何导入?如何检测?细胞培养,1 .基因工程流程图:(将重组DNA分子引入农杆菌,农杆菌感染植物细胞),1 .目的基因为植物细胞,双子叶裸子植物,子叶,3。目的基因导入微生物细胞,2,目的基因导入动物细胞(常用受精卵),2。蛋白质工程流程图:注意蛋白质三维结构,氨基酸序列多肽链,基因DNA,mRNA,1 1,植物组织培

3、养技术,技术原理,培养条件,特性,优点等。营养,激素,营养,激素,杂交植物,融合原生质体AB,细胞壁再生,脱分化,愈伤组织,再分化,2。植物细胞杂交技术,1 .植物细胞融合,2 .植物组织培养,植物细胞a,原生质体b,原生质体a,杂交细胞AB,去壁,人工诱导,标记融合完成,植物细胞b,去壁,酶解,融合内容:膜,质量,核聚变。(杂交细胞筛选),融合原理:膜流动性;动物胚胎或年轻动物的组织,器官,胰蛋白酶处理,单细胞,加培养液,制造,细胞悬浮,不灭细胞,原理:细胞增值,无限代,作用:去除组织间蛋白质,认为最终能培养成有机体3360动物细胞培养?1 .动物细胞培养过程:不行,部分细胞遗传物质变化,原

4、代培养,随着细胞数量的增加,细胞分裂附着生长表面相互接触时抑制分裂增殖细胞接触,传代培养,动物细胞培养条件,1,无菌,无毒环境3360(添加一定量抗生素,定期更换培养液)。)3,温度和PH 33636.5(-)0.5度,7.2-7.44,气体环境(注意作用)O2和CO2(95%空气和5%CO2),O2需要细胞代谢,CO2需要培养液克隆动物的生成过程:3。动物细胞融合,杂交,克隆培养和抗体检测,4。单克隆抗体的制备,1,植物组织培养与动物细胞培养的比较,2,植物细胞杂交与动物细胞融合的差异,主要是准备单克隆抗体,获取混合植物,获取,使用,物理,化学方法(左),惰性病毒,物理(离心,振动,电刺激) 体外培养,精子采集,体外受精,早期胚胎培养,受体牛,(期间:1)超排卵(试剂)2)体内卵子采集(工具)3)从屠宰中的卵巢中

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