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文档简介
1、第九章 种子健康测定,种子健康测定(seed health testing)的目的是测定种子样品的健康状况,并由此推测一批种子的健康状况。通常种子健康状况是以种子带病和种子虫害率表示。,第一节 种子健康测定的意义 第二节 种子病害测定 第三节 种子虫害测定 第四节 种子健康测定的程序,第一节 种子健康测定的意义,1. 了解种子的健康状况,确定种子的利用价值 2. 防止危害性病虫的传播 健康测定的内容:病害,虫害,第二节种子病害测定,常用的病害测定方法有 1)肉眼检验、 2)过筛检验、 3)洗涤检验、 4)滤纸培养检验、 5)琼脂培养检验、 6)离体胚检验、 7)漏斗法检验,一、肉眼检验 借助肉
2、眼或低倍放大镜进行检验。 适用于有较大病原体或种子外表有明显症状的病害。如小麦线虫病虫瘿、腥黑穗病菌瘿、小麦赤霉病、水稻稻瘟病、玉米粒腐病、甘薯黑斑病、马铃薯晚疫病等。 检验方法是从送验样品中分出一半种子作试样,放在白纸或玻璃板上,检出病原体或病粒,称其重或计其粒数,按下列公式计算感染病害百分率。 病害感染率=病粒或病原体的数量(g)/试验样品的重量(g)100%,二、过筛检验 适用于较大病原体,其形状、大小与种子不同,可用筛子分离。如菌瘿、病核、虫瘿及赤霉病粒等。 检验方法是从送验样品中分出一半种子作试样,用规定孔径的筛子过筛,不同作物种子所用筛孔不同取筛子按孔径大小叠好(孔径上层大,下层小
3、),将试样倒人上层筛内,筛理2min,最好用电动筛选器进行。然后将各层筛上物倒入白瓷盆内,摊成薄层用肉眼或1015倍扩大镜检查。将底层的细小筛出物倒于黑底玻板上,用5060倍双目扩大镜检查,拣出病原体并称重,计算病原体含量百分率。,三、洗涤检验(洗涤+显微镜检测) 多用于种子表面带病而肉眼看不见的种子病害,如麦类腥、黑穗病、稻粒黑粉病、稻干尖线虫病、棉花、红麻炭疽病等。 从送验样品中分取试样两份,每份3g,分别倒人小三角瓶内,注入蒸馏水10ml,加以剧烈振荡(用定时振荡器),光滑种子振荡10min,粗糙种子振荡10min,将悬浮液倒入离心管内,用每分钟1000转速度离心5min,吸去上清液,留
4、1ml悬浮液于管底,稍加振荡,立即用清洁细玻棒将悬浮液分别滴在510片载玻皮上,盖上盖玻片,逐片用放大40500倍的显微镜检查,每片检查10个视野,记载病原体种类及每视野的孢子数,并计算每粒种子孢子负荷量。,四、滤纸培养检验 适用的病害有稻瘟病、稻胡麻叶斑病、麦类斑点病、雪腐病、镛刀菌、小麦颖枯病、大豆荚枯病、各种作物炭疽病等。可根据种子上的特有症状或种子上的分生孢子和菌丝体鉴别。 ()稻瘟病取试样400粒,置于23层湿润滤纸上,培养皿直径9cm,每皿置25粒种子,在22昼夜光照12h条件下培养7天检查。在1250倍放大镜下检查每粒种子上的分生孢子。稻瘟病则在颖壳土产生小形的不明显的灰至绿色分
5、生孢子,着生在密集而纤细的分生孢子梗上,它通常很少覆盖整粒种子。如有怀疑可用200倍显微镜检查核实,典型的生分孢子为倒梨形、透明、基部具短齿、分二隔,常有尖锐的顶端。 (二)菜豆炭疽病取试样400粒,预先用1有效氯的次氯酸钠浸种10min,然后将每50粒种子置于3545cm的双层湿滤纸上,再用一层湿滤纸覆盖,纸巾纵向折叠二次,并用聚乙烯薄膜覆盖,于20黑暗培养7天。检查时剥去种皮,观察子叶边缘清晰的黑色斑点,用25倍立体显微镜观察,记录有分生孢子盘的种子数,在分生孢子盘上长有具隔膜的黑色刚毛。,五、琼脂培养检验 适用于潜伏在种子内部的病原菌,如玉米干腐病、小麦斑点病、亚麻灰霉病、豌豆褐斑病等。
6、 ()豌豆褐斑病取试样400粒,用次氯酸钠消毒。在培养皿内放人麦芽或马铃薯葡萄糖琼脂,每皿置10粒种子,于20黑暗培养7天,用肉眼检查种子外盖满的大量白色菌丝体。对有怀疑的菌落可用25倍扩大镜下观察,根据菌落边缘的波状菌丝体确定。 (二)亚麻灰理病取试样400粒。培养皿内放人含有2琼脂和1麦芽汁的麦芽琼脂,每皿放10粒种子,于20黑暗培养7天。于第5天和第7天用肉眼观察幼根,其上存在软腐,并为大量灰色菌丝体覆盖。如有怀疑可用200倍显微镜检查,根据有分隔的带状菌丝和分生孢子梗的簇生分枝来确定。,六、漏斗法检验 此法专用于水稻干尖线虫病。水稻干尖线虫病只在叶尖上形成尾巴状物,而不形成虫瘿,种子带
7、病时不易看出,可用漏斗法检查。 检验方法:将一漏斗夹在支架上,于漏斗上放一钢丝网或纱布,漏斗下部装有胶管及夹子。取一定量的水稻种子剪碎,放人铜丝网或纱布中然后加水于漏斗内,使样品浸于水中,冬季应将漏斗及样品置于28恒温箱内,经24h后,用离心管装在漏斗管下端,打开夹子,取出底部少量溶液(此处浓度最高,含线虫最多),进行离心,用显微镜检查有无线虫及其含量。,对不同的病害,用不同的方法: 1. 对较大的病原体 过筛 肉眼 2. 对种子外表有明显症状的 肉眼 3. 表面带菌但看不见的 洗涤 滤纸培养 4. 种子内部的病原菌 琼脂培养 5. 胚内病菌 离体胚培养,第三节 种子虫害测定,常用的虫害测定方
8、法有肉眼检验、过筛检验、剖粒检验、染色检验和比重检验。,一、肉眼检验 害虫自由活动在种子堆中或种子受害虫损伤后有明显特征的适用。 从送验样品种分出一半种子作试样,把种子倒在预先用酒精擦净的瓷盘内或玻璃桌上。冬季则须将种子放在1825加温2030min,使害虫恢复活动,进行逐粒观察,将害虫及受害种子拣出,然后计算虫害种子百分率及每千克种子中害虫的头数。,二、过筛检验 凡是成虫或幼虫散布在种子中间的害虫适用。 三、剖粒检验 凡是隐藏在种子内部的害虫,如蚕豆象、豌豆象等适用。,四、染色检验 应用染料或化学试剂处理种子,使被虫害种子的孔口更明显,易于鉴别。 ()高锰酸钾染色法 检查米象、谷蠹为害的孔口
9、。先将送验样品中的杂质除去称取试样15g,倒入铜丝筛中,浸于30水中lmin,再移到1高锰酸钾溶液中,浸4560s,立即取出用清水洗涤,马上倒在白色吸水纸上,用扩大镜检查,被害种子表面有直径为0.5cm突起的黑色斑点。如再用过氧化氢和硫酸混合液(100ml的1硫酸加1ml 3过氧化氢)洗涤则黑色斑点更为明显,结合剖粒检验查出害虫头数,并换算成每千克种子中的种子害虫头数。,(二)碘或碘化钾染色法 凡豆象为害的种子适用。 从送验样品中取试样50g,放于铜丝筛中或用纱布包好,浸于1碘化钾或2碘酒中,经11.5min取出移于盛有0.5氢氧化钠的溶液中,浸30s立即检查。豆粒表面有12mm直径的黑色圆形斑点的,为豆象感染过的种子,结合剖粒检验,计算每千克种子的害虫头数。,五、比重检验 凡被米象、谷骚、豆象和麦蛾为害过的种子比重轻,可浮于一定浓度的液面上。 取试样100g,倒人饱和食盐溶液中(在20条件下,100ml水中溶人35g食盐),充分搅拌1015s,放置2min,将浮在上层的种子取出,结合剖粒检验,计算出每千克种子害虫头数。,对不同的虫害: 1.对活动在种子堆内的害虫 肉眼 过筛 2.对虫损伤后有明显症状的 肉眼 3.对虫损伤后症状不明显的 染色 4.对种子内的害虫 比重,剖粒,X射线,第四节 种子健康测定的程序(病害),一、未经培养的种子样检验 1.
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