离子交换色谱ppt展示_第1页
离子交换色谱ppt展示_第2页
离子交换色谱ppt展示_第3页
离子交换色谱ppt展示_第4页
离子交换色谱ppt展示_第5页
已阅读5页，还剩16页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、离子交换色谱,运用与分析,主讲：许先融 编辑： 资料搜集：刘佳娜 李春凤 甘权贤 资料整理：李扬帆 刘雁 08中药分析与鉴定（1）班,基本原理：,离子交换色谱 （ion exchange chromatography，iec） 以离子交换树脂作为固定相，树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时，组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。,主要用于分离离子或可离解的化合物，包括氨基酸，多肽，核酸，核苷等各种生物大分子。,离子交换色谱的运用：,分离纯化生物大分子,po+zdo=pb+zdb,重视,po:流动相中

2、溶质的浓度； pb:填料表面上被吸附的溶质浓度; do:流动相中洗脱剂的浓度； db:填料表面上洗脱剂的浓度； z:蛋白质在吸附过程中从填料表面上 被置换的洗脱剂的数目；,以离子交换色谱快速纯化 8 一 淀粉酶为例,研究探讨离子交换色谱,本研究利用合成的强阴离子交换柱很好地分离了a- 淀粉酶粗品,其活性 回收率高达96%,比活性达388ug/mg蛋白质纯度提高30倍。此法的研究成功 为大规模制备高纯度 a- 淀粉酶提供了一个新工艺路线。,高纯度的 8 一淀粉酶可作为酶试剂 ,研究生物作用的特性、酶反应机理,测定 生化反应的平衡常数。,1.0 摘要：,2.0实验部分, 2.1标准酶液配制 用微量

3、天平准确称取5mg高纯度的 a-淀粉酶试剂,于小离心 试管中,准确加1.0ml水,溶解后 ,在1300r/min的高速离心机上离心5min,小心转移上部清液于另一离心试管中,此液相当于1062u/ml活力.,3.0结果与讨论,3.1 洗脱剂 为获得高的洗脱效率,本实验选用0.02mol/l tris-2mol/lnacl(ph6.0)体系作为洗脱剂.（tris-指三羟甲基氨基甲烷 ）,由图2可知 ,在 2.0mol/l以下,随盐浓度的增加 ,洗脱能力增大,活性回收率提高。洗脱液中离子强度对洗脱效率的影 响可归结为离子交换平衡的移动,这种色谱行为表明该固定相具有典型的阴离子交换特性 ,符合离子交

4、换色谱的洗脱规律。但在2.0mol/l以上 ,随盐浓 度增 加洗脱 能力下降。这种反常现象,可能是由于离子交换柱的多功能特性引起。,实验证明,离子交换柱不仅有离子交换的作用 ,而且还表现一定的疏水作用的。并且这种疏水作用 ,随溶液离子强度发生变化 。当洗脱剂 浓度大于 2.0mol/l时,由于溶液的表面张力过大 ,离子交换剂的疏水作用变得明显,对蛋白质疏水缔合作用增强 ,故被吸附 的蛋白质难以洗脱,因而 活性回收率下降。 所以选择抓nacl浓度为2.0mol/l.,3.3 ph对活性回收率的影响,总结,凡在溶液中能够电 离的物质通常都可以用离子 交换色谱法进行分离。它不仅适 用于无机离子混合物的分离，亦可用 于有机物的分离，例如氨

人人文库> 全部分类> 生活休闲 > 科普知识

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论