血管紧张素转化酶ppt课件

1、精选，血管紧张素转换酶的测定及其临床意义检查科，精选，概况，血管紧张素转换酶(ACE )又称为激肽酶或多肽基-羧基多肽酶，系统名为多肽基-二肽酶。 血管内皮细胞膜结合酶从肽的c末端将氨基酸切成两段进行转换，使肽链的c末端二肽残基水解。 ACE催化血管紧张素(肽)水解为八肽的血管紧张素，使血管进一步收缩，使血压上升。 也可以用于肾上腺皮质，促进醛固酮分泌。 因此，ACE是血管紧张素醛固酮的重要成分。 精选，概况，ACE水解了具有降压作用的缓激肽，失去了活性。 ACE广泛分布于人体各组织，睾丸、睾丸及肺含量丰富，其中肺毛细血管内皮细胞ACE活性最高。 肾、垂体等组织酶活性低。 ACE测定方法主要有

2、比色法、酶偶联法等。 血管紧张素转换酶的别名：血管紧张素转换酶、精选、转换酶的测定原理血管紧张素、 (1)三硝基苯磺酸钠(INBS )显色法：基质马尿酸酰基-甘氨酸(Hip-Gly-Gly )在ACE的作用下后者在三硝基苯磺酸(TNBS )的作用下生成黄色的三硝基苯-甘氨酸(TNP-Gly-Gly )，其含量与ACE的活性呈正相关。 (2)酶偶联法： ACE将基质马尿酸二甘氨酸肽(Hip-Gly-Gly )水解为马尿酸(Hip )和二甘氨酸肽(Gly-Gly )，后者为L-谷氨酰胺-3-羧基-4-亚硝基胺(GGCN ) 精选，试剂，(1)三硝基苯磺酸钠(INBS )显色法：用基质液：5mmol

3、/L的Tris溶液制备30mmol/L HGG溶液，该液中含有0.4mol/LNa2SO4、0.3mol/L NaCl，ph为7.3 0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH9.0)。 钨酸钠100g/L (含2个水)溶液。 0.33摩尔/l naso 4。 加入60mmol/L TNBS溶液，精选，(2)酶偶联法： 50mmol/L HEPES缓冲液：羟基，乙基哌嗪乙酸(HEPES)1.191g，双蒸馏水100ml，溶解，制备GGT、CGCN和基质缓冲液。 20kU/L GGT贮存液：取5 ml hepes缓冲液，加入GGT 100U，混合后分装瓶子，20。 保存。 6.7kU/L GGT应用液：

4、用2倍量的HEPES稀释上述储存液制备。 0.1mmol/L GGCN溶液：称为GGCN 20mg，加入50mmol/L HEPES 60ml，溶解后保存4次。 精选，基质缓冲液： HEPES 1.191g，NaCl 1.755g，Na2SO45.68g，用双蒸馏水溶解后，用NaOH将pH调整到8.0，将双蒸馏水补充到100ml，4中保存。 基质液：溶解混合了89.5 mg hip-Gly-Gly和10ml基质缓冲液。 该液的各试剂的最终浓度为HEPES 50mmol/L、NaCl 30mmol/L、Na2SO4400mmol/L、Hip-Gly-Gly 30mmol/L。 10mmol/L二

5、甘肽标准液：加入52.9 mg Gly-Gly和双蒸馏水溶解，稀释成100ml作为存积液(40mmol/L )。 混合1份贮存液和3份蒸馏水是应用液。 精选、正常值、(1)三硝基苯磺酸钠(INBS )显色法： 26.156.7kU/L。 (2)酶偶联法： 12-68U/L。 精选、检查结果的临床意义，血清ACE测定主要与肺疾病的诊断相同，对其他系统疾病的诊断也有价值。 (1)肺部疾病：大部分结节病患者血清ACE活性上升，其阳性率和宽度与有无疾病活动和病变涉及的范围有关。 肺结核也上升，但哮喘发作、急性心原性肺水肿、慢性阻塞性肺疾病、自发性气胸、肺纤维化、成人呼吸窘迫综合征等血清ACE有所降低。

6、 (2)肝脏疾病：大多数肝脏疾病患者ACE活性高，上升幅度按肝硬化、急性肝炎、慢性肝炎的顺序排列。 脂肪肝正常。 精选：(3)甲状腺疾病：甲状腺功能亢进患者的ACE活性明显高于其他甲状腺疾病，酶活性的高度与T3，T4的含量呈正相关。 (4)其他：糖尿病、虹膜炎、免疫母细胞肉瘤等，血清ACE上升，高血压和大肠炎等降低。精选：备注： (1)三硝基磺酸钠(INBS )发色法：标本在室温或冰箱中保存1周，酶活性无明显变化，保存15周酶活性稳定。 胆红素对ACE有明显的抑制作用，所以重度黄疸会降低测定结果。 EDTA是ACE的强力抑制剂，NaCl和Na2SO4对ACE有明显的激活作用，溶血、脂质血对结果

7、无影响。 本法与紫外分光光度法的酶活性单位一致，但其测定值是紫外法的9倍。 精选：(2)酶偶联法：基质pH 8.0，GGCN 1.0mmol/L，GGT6.7ku/L时，ACE活性和吸光度值具有良好的线性。 线性范围宽，即使ACE为1500U/L，也可以不稀释地获得理想的结果。 GGCN浓度选择：在本反应体系中，GGCN是测定酶ACE的受体，也是指示酶GGT的施主。 理想的是1.0mmol/L的GGCN，在该浓度下，GGCN和吸光度保持良好的线性。 GGT对测定的影响：本反应利用GGT偶联二甘肽和GGCN生成黄色3 -羧基4 -亚硝胺，其添加量直接影响测定结果。 GGT高浓度能过度消耗基质，使吸光度偏离曲线的低浓度GGT又降低了吸光度，灵敏度不高。