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文档简介
1、尿液分析质量控制 -常见问题分析及对策,克州人民医院检验中心 吉品健 2016.06,干化学分析仪检验 全自动尿沉渣分析仪 流式细胞术分析仪 影像式尿沉渣,现代尿液分析仪类型,尿干化学试带测试原理、临床应用及质量控制,11项尿分析仪,代表仪器有美国的CLINITEK500型、长春迪瑞、韩国盈东、unitest 检测项目:蛋白、糖、PH、酮体、尿胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、白细胞、比密、维生素C;,多联试剂带结构图,试剂带原理,多联试剂带是将多种项目的试剂块集成在一个试剂带,使用多联试剂带,浸入一次尿液可同时测定多个项目。 它采用了多层模结构 尼龙膜:防止大分子物质对反应的污染;,绒制层
2、:包括碘酸盐层和试剂层: 碘酸盐层:可以破坏维生素C等干扰物质, 试剂层:含有试剂成分,主要与尿液中测定物质发生化学反应,产生颜色变化; 吸水层:可使尿液均匀快速的浸入,并能抑制尿液流到相邻的反应区; 塑料底层:作支持体。,试剂带中还有另一个垫“补偿区”,作为尿液本底颜色,以对有色尿及仪器变化等产生的误差进行补偿。 试剂带按一定的顺序排列,各个厂家不一样,尿液中的各种成分被各测定块吸收,引起化学反应及酶反应,使试剂块颜色根据尿液中各成分的比例而变化。,1、试剂带原理,此类仪器一般用微电脑控制,将浸有尿液的试剂带放在仪器比色槽内,试带上已产生化学反应的各种试剂垫被光源照射,其反射光被球面积分仪接
3、收,将试剂块反射光量值与空白块反射光量值进行比较,通过计算机求出反射率,换算成浓度值,便可由分析仪打印出半定量的数值。,2、测 量 原 理,尿液分析仪原理图,尿干化学试带检测原理,2.pH试纸法:,1.试带法:,模块有甲基红(pH4.6-6.2),溴麝香草酚蓝(pH6.0 - 7.6). 变色范围:黄5.0-绿7.0-蓝9.0,仪器或肉眼判读,多种混合指示剂(棕红色-深黑色), 与标准色板比较。,(一)测定原理,一、尿酸碱度测定(urine acidity),3.指示剂法:,5.pH计法:,4.滴定法:,0.4g/L溴麝香草酚蓝滴于尿液黄-酸性,绿-中性,蓝-碱性. 受黄疸尿及血尿的影响.,p
4、H电极.精确度较高,需仪器,烦琐,少用.,标准NaOH滴定,测总酸度.复杂,少用,(一)测定原理,一、尿酸碱度测定(urine acidity),(二) 尿酸度测定的方法学评价,标本新鲜; 操作规范; 试带保存; 试剂配制标准; pH计校准.,(三)质量保证,一、 尿酸碱度测定(urine acidity),正常饮食 晨尿pH:5.56.5,平均6.0; 随机尿pH: 4.68.0; 可滴定酸度: 2040mmol/24h尿,(四)参考值,一、 尿酸碱度测定(urine acidity),(1)生理变化: 食物影响:蛋白类酸性; 果蔬类碱性. 碱潮:餐后胃酸,肾泌H+,Cl-重吸收 尿pH一过
5、性. 生理活动:运动,饥饿,出汗,应急,夜间入睡呼吸 变慢体内酸性代谢产物pH.,(五)临床意义,一、 尿酸碱度测定(urine acidity),(2)病理变化: 酸性尿:酸中毒,高热,慢性肾炎,白血病, 糖尿病酮症酸中毒,低钾血症,痛风 碱性尿:碱中毒,呕吐,尿路感染,型肾 小管性酸中毒,原发性醛固酮增多症,一、 尿酸碱度测定(urine acidity),(五)临床意义,(3)药物影响: NaHCO3,K2CO3,枸橼酸钠碱化尿液防止酸性结晶(尿酸及胱氨酸)形成;促进酸性药物排泄. 氯化钙(铵、钾)、稀盐酸酸化尿液防止碱性结晶(磷/碳/草酸钙)形成;促进碱性药物排泄;预防细菌生长. 溶血
6、时口服NaHCO3碱化尿液促进溶解及排泄Hb.,一、 尿酸碱度测定(urine acidity),(五)临床意义,表5-6 常见影响尿液pH的因素,表5-6 常见影响尿液pH的因素,二、尿液蛋白质检查,健康人尿液中蛋白含量很少,定性为阴性。,尿液中蛋白质含量150mg/24h 或尿中蛋白质浓度100mg/L 蛋白定性为阳性,即 proteinuria.,1.蛋白尿 (proteinuria, PRO) ,(一)概述,二、尿液蛋白质检查,2.蛋白尿形成的原因,(1)肾小球滤过膜破坏或电荷屏障改变,(2)肾小管重吸收障碍,(3)溢出性,(4)肾组织性,(一)概述,【原理】 指示剂的蛋白质误差原理
7、溴酚蓝阴离子,(1)干化学试带法,【评价】,肉眼和仪器;对清蛋白灵敏(70-100mg/L), 与Hb/Mb/BJP基本不反应; 简便快速,易标准化,应用普遍。 健康普查、肾病筛查。,pH3.2,pro+复合物 (淡黄绿色兰色),(二) 尿蛋白定性检查,1.测定原理与评价,表5-7 试带法检测的干扰因素及评价,(二) 尿蛋白定性检查,【评价】,(2)磺基水杨酸法,【原理】 pro+ + 磺基水杨酸根- 不溶性蛋白沉淀,简便快速,灵敏度高0.05-0.1g/L; 与清/球/本周蛋白反应;假阳性。 干化学法的参考方法,NCCLS推荐的 确证实验。,H+,(二) 尿蛋白定性检查,1.测定原理与评价,
8、1,尿2-3ml+试剂0.1ml,立即混匀,1min内观察结果.,(2)磺基水杨酸法,【干扰因素】,(二) 尿蛋白定性检查,1.测定原理与评价,阴性():不浑浊 微量():轻微浑浊,PRO约0.1-0.15g/L 弱阳性():明显白雾状,PRO约0.2-0.5g/L 阳性(2):浑浊,明显颗粒,PRO约0.6-2.0g/L 强阳性(3):大量絮片沉淀,浑浊,PRO约2-5g/L 最强阳性(4):凝块,大量絮片沉淀,PRO5g/L,(3)加热乙酸法,【原理】加热PRO变性凝固, 加酸pH接近PRO等电点; 溶解碱性盐类结晶.,【评价】,(二) 尿蛋白定性检查,特异性高,干扰少,灵敏度0.15g/
9、L; 与所有蛋白发生沉淀反应。 经典准确的、定性的确证实验.,1.测定原理与评价,(3)加热乙酸法,【干扰因素】,(二) 尿蛋白定性检查,1.测定原理与评价,定性:阴性,2.参考值,干化学测定尿蛋白原理,R-CH,NH2,COOH,H+,R-CH,NH3+,COOH,+,指示剂,显色,指示剂蛋白误差原理,pH 3.6,(二) 尿蛋白定性检查,(1)检测前:患者正常饮食;,(2)检测中: 室内质控;阳性及阴性对照。 试带法:按规程操作,浸渍时间适宜;阴凉 干燥;有效期。 加热乙酸法:盐类浑浊假阳性; 遵循加热-加酸-再加热; 5%乙酸为尿液的1/10. 加热乙酸法和磺基水杨酸法:调尿液pH为5-
10、6,3.质量保证,(二) 尿蛋白定性检查,(3)检测后:报告审核;结果与临床不符,分析原因,(1)加热乙酸法: 加酸要合适; 无盐或低盐饮食,先加12滴饱和NaCL; PRO极少时,加酸后出现沉淀。,(2)磺基水杨酸法: 尿液浑浊,应先离心或过滤; 强碱性尿加5%乙酸数滴; 碘造影剂、青霉素及尿酸或尿酸盐假阳性。,(3)干化学法:尿液新鲜 超大剂量青霉素假阴性。,3.质量控制,(二) 尿蛋白定性检查,(1)沉淀法,【原理】 pro+生物碱沉淀物,【评价】,(三) 尿蛋白定量检查,费时、准确性差,已淘汰,H+,1.测定方法与评价,【评价】,(2)双缩脲比色法,【原理】 钨酸沉淀蛋白质,双缩脲法定
11、量。,蛋白质定量的经典方法。,(三) 尿蛋白定量检查,1.测定方法与评价,【原理】,(3)染料结合法,【评价】,后两种灵敏高,简便快速,呈色稳定,干扰少,但易污染。 第一种烦琐,沉淀不完全-影响结果。,(三) 尿蛋白定量检查,1.测定方法与评价,蓝色 (600nm比色),【原理】 单克隆抗体技术,(4)免疫法,【评价】,定量:0.15g/24h 0.1g/L,灵敏度和特异性更高,临床普遍应用,【原理】 SDS-PAGE、琼脂糖电泳,(5)电泳法,【评价】,灵敏度和特异性更高,(三) 尿蛋白定量检查,1.测定方法与评价,2.参考值,(三) 尿蛋白定量检查,定量:0.15g/24h 0.1g/L,
12、2.参考值,(1)结合灵敏度和线性范围选择方法;,(2)离心取上清,(3)冷藏保存,(4)更换试剂重做标准曲线,3.质量控制,(三) 尿蛋白定量检查,(1)生理性 蛋白尿,功能性,(2)病理性 蛋白尿,肾后性,肾 性,肾小球性: 肾小管性: 混合性:,溢出性:,肾前性,体位性,偶然性:血、脓、粘液,Alb,2、1-M,Alb、2-M,Hb,Mb,BJP,TH糖蛋白,+;0.5g/24h;青少年,+,卧床后(-);青少年,(三) 尿蛋白定量检查,4.临床意义,组织性:,蛋白尿的选择性,肾小球滤过膜损伤程度及尿中蛋白组分不同:,选择性蛋白尿:,非选择性蛋白尿:,MW49万,Alb,Tf;AT,前A
13、lb. 3+4+;3.5g/24h;肾病综合症.,MW9万,Ig(G,A,M),C3;Alb,T-H. 1+4+;0.53.0g/24h. 持续肾衰;原/继发肾小球疾病.,(三) 尿蛋白定量检查,肾小球性:肾小球肾炎+,很少+; 肾小管性:+,很少+. 混合性性:肾病综合征+. 组织性: +,很少+.,(三) 尿蛋白定量检查,三、尿液葡萄糖检查,正常人尿内含糖量极少,0.565.0 mmol/24h,定性试验阴性。,糖尿(glucosuria, GLU),血糖8.88mmol/L,肾糖阈值,或近端肾小管重吸收功能障碍时尿糖,定性试验阳性的尿液.,(1)试带法,【原理】 葡萄糖+H2O 葡萄糖氧
14、化酶 葡萄糖酸内酯+H2O2 H2O2+色素原 过氧化物酶 有色物质+ H2O,(glucose oxidase-peroxidase method),【评价】,特异性强,灵敏度高(1.672.78mmol/L 弱阳性),简便快速,自动分析.,1.测定方法与评价,(一) 尿糖定性检查,(1)干化学试带法,【干扰因素】,葡萄糖氧化酶试带法,1.测定方法与评价,(一) 尿糖定性检查,(2)班氏法(Benedict法),【原理】 Cu2+-Cu+ 兰色 黄色至砖红色.,【评价】,缺乏特异性,灵敏度低(8.33mmol/L弱阳性),-CHO,OH,1.测定方法与评价,班氏试剂1ml,煮沸不变色+尿2滴
15、煮沸1-2min 冷却后观察.,(一) 尿糖定性检查,(2)班氏法(Benedict法),【干扰因素】,1.测定方法与评价,(一) 尿糖定性检查,(3)薄层层析法(thin-layer chromatography, TLC),【评价】,鉴别、确证尿糖种类的特异、灵敏的方法;操作烦琐,很少应用。,(一) 尿糖定性检查,1.测定方法与评价,【原理】,吸附剂作固定相;有机溶剂作流动相;两相间作相对移动。 各组分流动相固定相反复吸附-解析-亲和作用展开分离。,比移值(Rf)=斑点距离/溶剂距离,(1)检验前:,(2)检测中:,容器清洁,不含氧化性物质;一次性尿杯. 消除VitC干扰:尿液煮沸几分钟.
16、,(3)检测后:,报告审核,结果不符查找原因; 与临床沟通.,2.质量控制,(一) 尿糖定性检查,室内质控. 试带法注意反应时间和温度;阴凉干燥,保质期. 班式法遵守操作规程,注意判读时间.,定性:阴性,3.参考值,(1)检验前质量控制,(2)试带法:,试带避光干燥保存; VitC,高SG尿,酮尿,左旋多巴假阴性; 尿液污染过氧化物或次氯酸盐假阳性.,(3)班氏法:,VitC,青/链霉素,头孢菌素水杨酸盐,氨苄西林假阳性; 大量铵盐,预先加碱煮沸去氨后再检验; PRO0.5g/L,加热乙酸法去蛋白取滤液检验; 大量尿酸盐绿色浑浊灰蓝色;,2.质量控制,(一) 尿糖定性检查,【测定方法】,葡萄糖
17、氧化酶法,己糖激酶法,(二) 尿糖定量检查,【评价】,测血糖方法。药物和尿液中的自然物质对己糖激酶法几乎无干扰;对葡萄糖氧化酶法有不同程度的干扰。,2.参考值:,0.565.0 mmol/L,1.测定方法与评价,非葡萄糖尿,葡萄糖尿,血糖增高性糖尿,血糖正常性糖尿-肾性,糖尿病-代谢性 内分泌性糖尿 饮食性糖尿 应激性糖尿 饥饿-糖耐量糖尿,糖尿,乳糖尿:,半乳糖尿,果糖尿,肝功障碍,哺乳期, (三)临床意义,暂时性,(胰岛素分泌不足),饥饿-糖耐量糖尿:见于晚期食道肿瘤、低营养状态和妊娠剧吐者 做糖耐量试验。,表5-10 内分泌性糖尿常见原因及检查结果,表5-11 血糖正常性糖尿常见原因及检
18、查结果,后天获得性肾性糖尿:慢性肾盂肾炎、药物中毒、肾病综合症,血糖的来源与去路,单糖,转化,四、 尿液酮体定性检查,-羟丁酸78% 乙酰乙酸20% 丙酮2%,脑,心脏,肌肉,尿酮体定性为阳性,即ketonuria.,正常血浆含量 24mg/L,正常24h尿含量:乙酰乙酸25mg, -羟丁酸9mg, 丙酮3mg,(2)乙酰乙酸测定法(Gerhardt法), 2.检测原理,四、尿液酮体定性检查,(1)亚硝基铁氰化钠法,乙酰乙酸+氯化高铁乙酰乙酸铁 (赭/酒红色),表5-12 基于亚硝基铁氰化钠的尿酮体检测方法,3.方法学评价,四、尿液酮体定性检查,片剂法 本法对乙酰乙酸的灵敏度50100mg/L
19、,丙酮为200250mg/L,Rothera法 本法对乙酰乙酸的灵敏度1050mg/L,丙酮为100250mg/L,Gerhardt法 本法对乙酰乙酸的灵敏度250700mg/L,表5-13 尿酮体不同检测方法灵敏度比较,3.方法学评价,【灵敏度】,四、尿液酮体定性检查,【干扰因素】,3.方法学评价,四、尿液酮体定性检查,(1)检测前:标本新鲜,及时检测;密闭冷藏/冷冻,(2)检测中:阴阳对照; 加入少量冰乙酸防止肌酐、肌酸 过多引起的假阳性 试带阴凉干燥,保质期。,4.质量保证,四、尿液酮体定性检查,(3)检测后:注意方法灵敏度. 不同病程的酮体成分的影响.,(1)早期诊断:糖尿病酮症酸中毒
20、昏迷,四、尿液酮体定性检查, 5.临床意义,酮体阳性见于:,鉴别:低血糖、心脑血管病酸中毒、高血糖渗 透性糖尿病昏迷酮体不增高. 糖尿病酮症者肾功能严重障碍而肾阈值,糖尿病酮症酸中毒缓解时,-羟丁酸乙酰乙酸,分析结果时必须密切结合临床.,(2)治疗监测: 糖尿病酮症酸中毒早期主要为-羟丁 酸; 测定血-羟丁酸有利于早期诊断., 5.临床意义,酮体阳性见于:,四、尿液酮体定性检查, 5.临床意义,酮体阳性见于:,四、尿液酮体定性检查, 5.临床意义,酮体阳性见于:,(5)药物影响:降糖药抑制细胞呼吸作用,(3)非糖尿病性酮症:感染、严重呕吐 腹泻、长期饥饿、禁食、子痫,(4)中毒:氯仿、乙醚、磷
21、中毒,(2) 氧化法,(1)试带法(重氮法),胆红素+二氯苯胺重氮盐-紫红色偶氮化合物,强酸,1.检测原理 ,Harrison法,Smith碘环法,胆红素+碘胆绿素(绿色)(接触面),五、尿液胆红素(BIL)定性检查,(1)试带法:简单,分析仪,定性筛检 2,4-二氯苯胺试带灵敏度5-10mg/L 二氯重氮氟化硼酸盐试带灵敏度2-5mg/L,2.方法学评价,五、尿液胆红素定性检查,【干扰因素】,Harrison法:烦琐,灵敏度高(0.9umol/L)/0.5mg/L,2.方法学评价,五、尿液胆红素定性检查,(2) 氧化法:,Smith碘环法:简便,灵敏度低(17.1umol/L),少用,【干扰
22、因素】,(1)检测前:标本新鲜,棕色瓶避光保存.,(2)检测中: 试带避光干燥;规范,高低质控,定检。 Harrison法:加入FeCl3后未见足够的钡盐沉淀, 可加适量硫酸铵。,五、尿液胆红素定性检查,3.质量控制 ,4.参考值,(3)检测后:试带法定性,可疑用Harrison法验证,阴性,(1)肝细胞性黄疸,(2)梗阻性黄疸,hepatocellular jaundice,obstruct jaundice,(3)溶血性黄疸,hemolytic jaundice,(+),(+),(-),五、尿液胆红素定性检查,3.临床意义,黄疸的诊断与鉴别诊断,六、尿胆原和尿胆素定性检查,(1)改良Ehr
23、lich法(湿化学法),(2)干化学试带法,尿胆原+对二甲氨基苯甲醛樱红色化合物,Ehrlich醛反应 尿胆原+重氮化合物红色化合物,1.尿胆原(URO)测定方法,H+,Urobilinogen, URO/UBG,2.尿胆素(urobilin)测定方法,无胆红素尿液+碘液,尿胆原,尿胆素,Zn2+ +,复合物 (绿色荧光),六、尿胆原和尿胆素定性检查, Schleisinger法:,氧化,(1)试带法: 改良Ehrlich法:简单快速,分析仪,定性或定量; 不同试带灵敏度不同(1-4mg/L)。 偶氮反应试带不受胆红素影响,对尿胆原特异。,(2)尿胆素最低检出量为0.05mg/L。,3.方法学
24、评价,六、尿胆原和尿胆素定性检查,【干扰因素】 Ehrlich醛反应,偶氮法:尿甲醛2g/L,亚硝酸盐0.05g/L灵敏度,(1)检测前:标本新鲜,避光保存; 口服NaHCO3碱化尿液,午餐后2-4h尿标本。,(2)检测中:口服NaHCO3碱化尿液,先用乙酸调节 为弱酸性. 试带法:规范,高低室内质控,定检. 阴凉干燥,密闭避光,有效期., 4.质量控制,六、尿胆原和尿胆素定性检查,(3)检测后:正确评价尿三胆; 尿胆原阴性可疑尿胆素定性验证.,尿胆原:阴性或弱阳性; 1:20稀释阴性. 尿胆素:阴性,(1)鉴别黄疸种类.,(2)反映肝细胞损伤敏感指标.,(3)长期便秘易使尿胆原阳性程度增加.
25、,六、尿胆原和尿胆素定性检查,5.参考值,6.临床意义,表5-15 不同类型黄疸的鉴别诊断,尿液中Hb来源: 血管内溶血 尿路出血,七、尿血红蛋白定性检查,正常人血浆中游离Hb微量(50mg/L),与结合珠蛋白形成Hb-Hp复合物,在单核-巨噬细胞系统代谢,故尿中Hb极微。定性:阴性,验证尿液潜在出血的试验: 隐血试验(occult blood test),1.概述,(1)试带法,(2)湿化学法,(3)免疫法:单克隆抗体法,利用胶体金标记的抗人Hb单克隆抗体检测。,2.测定方法,原理相同,七、尿血红蛋白定性检查,胶体金单克隆抗体法:,(1)试带法:,(2)湿化学法:,(3)免疫法:,试剂稳定性
26、差,特异性较低,假阳性多.0.3-0.6mg/L,简便快速,灵敏度高(0.15-0.3mg/L),影响多,筛检.,简便,灵敏度高(0.2mg/L),特异性强,验证,3.方法学评价,七、尿血红蛋白定性检查,3.方法学评价,七、尿血红蛋白定性检查,【干扰因素】,阴性,(1)检测前:标本新鲜,煮沸2分破坏WBC过氧化物酶 和其他对热不稳定酶.,(2)检测中:高低室内质控,阳性对照;3%H2O2或试 带验证所用试剂的有效期和可靠性。,4.质量控制,5.参考值,七、尿血红蛋白定性检查,(3)检测后:审核,沟通,验证。,(2)辅助诊断泌尿系统疾病.,(1)辅助诊断肾前性溶血性疾病.,各种血管内溶血性疾病:
27、PNH, 血型不合输血, AIHA,行军性Hb尿;各种病毒感染、疟疾;大面积烧伤、体外循环、术后所致的RBC大量破坏.,隐匿性肾炎尿中少量RBC破坏隐血试验();镜检时RBC少.,6.临床意义,七、尿血红蛋白定性检查,八、亚硝酸盐(NIT),硝酸盐,亚硝酸盐,(nitrate),(nitrite),对氨基苯磺(砷)酸,重氮盐,a-萘胺,偶氮化合物 (红色),1.检测原理:亚硝酸盐还原法,(1)亚硝酸盐检出率的3个影响因素: 尿中G-杆菌要有硝酸盐还原酶; 尿潴留时间4h; 尿中有硝酸盐.,八、亚硝酸盐(NIT),2.方法学评价,(2)灵敏度:0.3-0.6mg/L,(3)干扰因素,表5-16
28、亚硝酸盐检测的干扰因素及评价,(1)检测前:晨尿,尽快检测。,八、亚硝酸盐(NIT),3.质量控制,(2)检测中:高低室内质控,定时阳性标本验证; 试带干燥避光,有效期。,(3)检测后:审核,结合LEU、镜检分析。,阴性,4.参考值,快速筛检尿路感染,NIT阳性:泌尿系统有细菌感染.(排除假阳性) NIT阴性:不能排除泌尿系统有细菌感染.,八、亚硝酸盐(NIT),4.临床意义,NIT试带LEU镜检准确诊断.,确证试验:尿细菌培养阳性,九、白细胞(WBC,LEU)(leukocyte),1.检测原理:酯酶(esterase)法,吲哚酚酯 吲哚酚+有机酸,粒细胞酯酶,+ 重氮盐 重氮色素 (紫红色
29、缩合物),九、白细胞(WBC,LEU),2.方法学评价,(1)灵敏度1025个/ul或515个/HPF.,特异性强:中性粒细胞.,(2)【干扰因素】,九、白细胞(WBC,LEU),3.质量控制,(1)检测前:标本新鲜,久置后WBC破坏试带法 与镜检结果差异过大。,(2)检测中:规范操作和质控。,(3)检测后:审核,结合NIT、LEU、镜检分析, 提高尿路感染诊断的可靠性。,阴性,4.参考值,LEU阳性:泌尿系统感染.(排除假阳性),5.临床意义,LEU阳性镜检阴性?,九、白细胞(WBC,LEU),诊断泌尿系统感染。,LEU阴性:镜检为淋巴细胞或单核细胞。 见于肾移植排斥反应、泌尿系结核。,中性
30、粒细胞溶解,见于肾脏病人。,十、维生素C(VitC或ASG),1.反应原理:,甲基绿磷钼酸噻嗪化合物, VitC,钼蓝 (蓝色紫色),检测VitC用于提示尿液OB、BIL、GLU、NIT及LEU检测结果是否准确,防止出现假阴性结果。,(1)还原法,(2)吲哚酚法,2.方法学评价,(1)灵敏度:50-100mg/L.,特异性:只检测还原性抗坏血酸.,(2)【干扰因素】,3.质量控制,(1)检测前:随机尿。,(2)检测中:规范操作和试带质控。,(3)检测后:审核,分析对OB/Hb、BIL、GLU、 NIT、LEU是否产生影响。,阴性,4.参考值,5.临床意义,判断试带法OB/Hb、BIL、GLU、
31、NIT、LEU等 结果是否可靠。,质量控制,操作严格、规范、正确 2种浓度质控液,尿液有形成分检查,细胞数量:肉眼血尿 镜下血尿(RBC3/HPF),(2)非均一性红细胞血尿,(1)均一性红细胞血尿,(3)混合性血尿,形态:, 红细胞(RBC),尿的红细胞与白细胞,电子显微镜图象,光学显微镜图象,红细胞,尿液中红细胞,尿 中 异 常 红 细 胞,尿中异常红细胞,异 常 红细胞,正 常 红细胞,血 尿 中 的红细胞,皱缩红细胞,小红细胞,影细胞,大红细胞,环形红细胞,颗粒形红细胞,新月形红细胞,红细胞碎片,棘形红细胞,小 结,临 床 意 义,判断血尿是肾源性还是非肾源性 1肾源性血尿 2非肾源性
32、血尿: 暂时性镜下血尿 泌尿系统自身疾病 其它疾病,肾脏疾病与肾外泌尿疾病的鉴别,临 床 意 义,泌尿系统自身疾病: 炎症、结石、创伤、肿瘤 泌尿系统临近器官疾病: 前列腺炎、盆腔炎等 全身出血性疾病:如ITP、血友病等,红细胞镜检注意事项,1、红细胞注意与脂肪球、污染酵母菌、球形草酸钙结晶区别 2、红细胞多时可致蛋白假阳性 3、注意单纯血尿与血浓尿的区别 4、有时潜血与镜检结果不一致,尿中红细胞及类似有形成分的鉴别,名称 形态 折光性 大小 排列 加蒸馏水 化学试验 红细胞 淡黄色双凹盘状 弱 一致 无规律 破坏 隐血(+) 酵母菌 无色椭圆形 强 不 有规律 不破坏 隐血() 脂肪球 无色
33、正圆形 强 不 不一致 不破坏 苏丹III染色(+) 精子头部 无色椭圆形 较强 不 无规律 不破坏 隐血() 淀粉颗粒 无色类圆形 弱 不 无规律 不破坏 遇碘成兰紫色 草酸钙结晶 无色圆形或椭圆形 强 不 无规律 不破坏 盐酸可溶解 尿酸盐结晶 淡红色小球 较弱 不 无规律 不破坏 加热60度溶解,酵母菌,RBC,酵母菌和红细胞,潜血阳性、镜检阴 性 镜检阳性、潜血阴性,尿液不新鲜 尿液不等渗 强碱性尿,误认 干化学试带失效 大量VitC等还原性物质干扰,判断血尿来源,(2)白细胞(WBC),细胞数量:肉眼脓尿 镜下脓尿(WBC5/HPF) 形态: (1)完整白细胞 (2)闪光细胞 (3)
34、脓细胞,完整白细胞:圆形,直径1014um,不染色核较模糊,浆内颗粒清晰可见;分散存在。闪光细胞:急性肾盂肾炎,低渗条件下,可见 中性粒细胞胞质内颗粒呈布朗分子运动,由于光折射在油镜下可见灰蓝色发光现象,似星状闪光,称为闪光细胞。脓细胞:陈旧尿中的白细胞,胞浆可因均质化而呈明胶样。炎症时,在炎症过程中破坏或死亡的中性粒细胞外形多变,不规则,结构模糊,浆内充满粗大颗粒,核不清楚,细胞常成团,边界不清,已为死亡细胞。,白 细 胞,放大倍数1000,Giemsa染色,放大倍数400,不染色,白细胞,嗜中性白细胞 (无染色),嗜中性白细胞 (染色),单核细胞,淋巴细胞,中性粒细胞,中性粒细胞,闪光细胞
35、,胀大白细胞,脓细胞团(见于炎症,白细胞变性、坏死粘连),1.泌尿系统炎症:肾盂肾炎、膀胱炎。 2.生殖系统疾病:女性阴道炎、宫颈炎和附件炎,前列腺炎。女性生殖系统炎症成团脓细胞伴鳞状上皮细胞增多。 3.肾移植排斥反应:出现大量淋巴细胞和单核细胞 4.尿液单核细胞增多常见于药物性急性间质性肾炎 5.尿液嗜酸性粒细胞为主常见于药物所致变态反应、泌尿系其他部位的非特异性炎症等。,临 床 意 义, 上皮细胞(epithelium),组织学和形态学: 肾小管上皮细胞(复粒细胞) 移行上皮细胞:大圆上皮细胞(表层),尾形上皮细胞(中层),小圆上皮细胞(底层) 鳞状上皮细胞(扁平),肾小管上皮细胞:来自于
36、肾小管立方上皮。尿中出现表示肾小管有病变及肾移植后发生排异反应 移行上皮细胞(变异上皮细胞):来自于输尿管、膀胱等移行上皮组织、可由来源部位和脱落时器官缩张状态差异,而大小形态有很大的差异 鳞状上皮细胞(扁平):来自尿道前段,上皮细胞,大圆上皮细胞:来自于肾盂、输尿管、膀胱及尿道等处的移行上皮组织的表层脱落而来。细胞较大 尾形上皮细胞:来自于上述器官的中层。细胞呈梨形、纺锤形有尾。大多来自于肾盂,又叫肾盂上皮细胞 小圆上皮细胞:来自于上述器官的底层。胞体类似于肾小管上皮细胞,但体圆、核小, 上皮细胞,放大倍数:400,尿液中的上皮细胞,尿液中的上皮细胞,尿液中的上皮细胞,肾小管上皮,鳞状上皮,
37、移行上皮 (尾形上皮),移行上皮(小圆上皮),尾形上皮细胞,鳞状上皮细胞,白细胞,A.移行上皮细胞 B.红细胞 C.白细胞,异常鳞状上皮细胞,移形上皮细胞: 大量移行上皮细胞出现时提示相应部位的炎症或坏死性病变。膀胱炎时,可大量大圆上皮细胞或成片脱落;肾盂肾炎时,常见尾形上皮细胞增多,鳞状上皮细胞: 尿中大量出现或片状脱落,或伴白细胞、脓细胞,多见于尿道炎;女性患者,应排除阴道分泌物的污染,临 床 意 义,肾小管上皮细胞: 增多提示肾小管病变。见于急性肾小管肾炎、肾病综合征、肾小管间质性炎症。肾移植术后l周出现较多的肾小管上皮细胞,随后逐渐恢复正常,如发生排斥反应,再度大量出现,若尿中上皮细胞
38、伴有白细胞具有较高参考价值: 1.肾小管上皮细胞或尾状上皮细胞增多,提示肾盂肾炎。 2.底层移形上皮细胞增多,提示膀胱炎。 3.扁平上皮细胞增多,提示尿道炎或阴道分泌物的混入。 4.出现管型提示肾实质受损,多见于肾小球肾炎。,临 床 意 义, 吞噬细胞(phagocyte),中性粒细胞,(1) 小吞噬细胞,(2)大吞噬细胞,组织细胞,比 白 细 胞 大 2 倍,吞 噬 细 胞, 吞噬细胞,吞噬细胞 (吞噬白细胞),吞噬细胞 (胞浆含大 量颗粒,趋向一红细胞),尿中出现呑噬细胞提示泌尿道急性炎症 见于急性肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎等 常伴有白细胞、脓细胞和细菌存在,临 床 意 义,尿液管型(cas
39、t): 是一些有机物或无机物,如蛋白、细胞或结晶等成分,在肾小管(远曲小管)和集合管内凝固聚合而形成的圆柱状结构物。 提示有肾实质性损害 。 与临床症状结合,对急性或慢性肾炎、肾病综合征有特异的诊断意义。, 管型,蛋白在小管、集合管中凝固管型形成条件: 清蛋白和T-H蛋白为基质 尿液浓缩酸化 有可提供交替使用的肾单位,尿流缓慢,管型形成机制,共性:圆柱体,长短、粗细不一,两边多平行、末端多钝圆。 只在肾小管或集合管内形成,其外形基本可反映肾小管和集合管内腔的形状。 主要类型:透明管型、细胞管型、颗粒管型、蜡样管型、脂肪管型、其它管型和类管型物质。,管 型,1. 透明管型,主要由T-H蛋白构成。
40、 规则圆柱体,大小、长短不一致;通常两边平行,两端钝圆 ,平直或 弯曲 ,质地菲薄, 可有少许颗粒或细胞粘附在管型外或包含于其中。 碱性尿液中或稀释时可溶解消失,无色透明;折光性较差, 观察时视野调暗。,透明管型 (黏附少量白细胞),透 明 红 细 胞 管 型,1.透明管型参考值为O-1LPF;2.生理:偶尔可见于成人浓缩尿、激烈运动后等病理: 1.可见于发热、麻醉、心力衰竭、肾受刺激后3.大量持续出现,同时可见异常粗大的透明管型和红细胞,表示肾小管上皮细胞有剥落现象,肾脏病变严重;可见于急、慢性肾小球肾炎、慢性进行性肾功能衰竭、急性肾盂肾炎、肾瘀血、恶性高血压、肾动脉硬化、肾病综合征等。,临
41、 床 意 义,2. 细胞管型,概念: 含有脱落细胞、粘附于凝结的蛋白质之中而形成的管型。 分类:红细胞管型、白细胞管型及上皮细胞管型。,正常尿中无红细胞管型 病理情况:提示肾小球疾病和肾单位内有出血,见于急性肾小球肾炎、慢性肾炎急性发作、肾出血、肾充血、急性肾小管坏死、肾移植排斥反应、肾梗死、肾静脉血栓形成、恶性高血压、狼疮性肾炎、亚急性心内膜炎、lgA肾病等,(1)红细胞管型(red cell cast),红细胞管型,红细胞管型,管型中含由退化变性坏死的白细胞(或脓细胞),一般为中性粒细胞。 正常尿中无白细胞管型 白细胞管型,提示肾实质有细菌感染性病变,见于急性肾盂肾炎、肾脓肿、间质性肾炎、
42、急性肾小球肾炎;非感染性炎症的肾病综合征、红斑狼疮肾炎;肾移植排斥反应(可见淋巴细胞管型)。,(2)白细胞管型(white cell cast),A.白细胞管型 B.红细胞 C.小圆上皮,透明管型(黏附少 量白细胞,与白细 胞管型区别),白细胞管型,白细胞管型,白细胞管型,管型内含肾小管上皮细胞,比白细胞大,大小、形态变化比白细胞复杂,加酸法呈现细胞核;酯酶染色(+),过氧化物酶染色(-)。 正常尿中无肾上皮细胞管型。 病理增多,常见于肾小管病变;肾移植患者,在移植术3天内,出现肾小管上皮细胞管型,为排异反应的可靠指标之一。,3肾上皮细胞管型(renal epithelial cast),复合
43、管型(由WBC、RBC、 上皮细胞混合而成,可见 于肾移植急性排斥反应),肾上皮细胞管型,内含大小不等的颗粒物,颗粒来自崩解变性的细胞残渣、血浆蛋白及其它物质,含量超过13管型面积以上时,称为颗粒管型。 形态:颗粒管型常较透明管型短而宽大,呈淡黄褐色或棕黑色。 分类:粗颗粒管型和细颗粒管型。,4. 颗粒管型,1. 正常人尿中无粗颗粒管型。 2. 细颗粒管型可偶见于运动后。 3. 颗粒管型的出现和增多,肾脏病变性细胞产生,为肾实质性病变,见于急慢性肾炎,某些药物中毒肾损害。,临床意义,颗粒管型,血液管型(红细胞破碎呈颗粒状),颗粒管型(无染色),颗粒管型(S染色),腊样管型,腊样管型,A.腊样管
44、型 B.颗粒管型,脂肪管型由肾小管上皮细胞脂肪变性、崩解,大量的脂肪滴进入管型内而形成。苏丹染色染成橙红色或红色。 1.正常尿液中无脂肪管型。 2.出现脂肪管型提示肾小管损伤、肾小管上皮细胞发生脂肪变性。可见于亚急性肾小球肾炎、慢性肾小球肾炎、中毒性肾病等,尤其多见于肾病综合征。,6. 脂肪管型(fatty cast),脂肪管型,脂肪管型(S染色),透明管型,上皮细胞管型,WBC管型,RBC管型,管型,颗粒管型,蜡样管型,肾衰管型,脂肪管型,管型,(1)粘液丝 : 长线条形,边缘不清,末端尖细卷曲。 见于正常尿中,尤其其妇女尿液中较多;如大量存在常表示尿道受刺激或有炎症反应。 (2)假管型 :
45、为非晶形尿酸盐、磷酸盐等形成的圆柱体, 加温或加酸后即消失。 (3)圆柱体 :又称类管型,其形态与透明管型相似,但一端尖细,有时有扭曲或弯曲,如螺旋状,常伴透明管型同时出现。见于急性肾炎、肾血循环障碍或肾受刺激的患者。,7.类管型相似物,粘液丝,类圆柱,假管型,形成:与尿液的pH、温度、形成该结晶的物质及其胶体物质的浓度和溶解度有关。 检查方法 : (1)光学显微镜下观察结晶形态; (2)相差、干涉或偏振光显微镜观察晶体立体形态及颜色等; (3)根据各种理化反应特性进行鉴别。,(三)结晶(crystal),酸性结晶 碱性结晶 非结晶性尿酸盐结晶 磷酸铵镁结晶 尿酸结晶 磷酸钙结晶 尿酸钠结晶 非晶性磷酸盐 尿酸胺结晶 草酸钙结晶 尿酸钙结晶 马尿酸结晶 碳酸钙结晶,分 类,1.草酸钙结晶 2.尿酸结晶 3.非结晶性尿酸盐 4.马尿酸结晶 5.磷酸盐类结晶 6.尿酸铵结晶 7.碳酸铵结晶,1.胆红素结晶 2.胱氨酸结晶 3.亮氨酸与酪氨酸结晶 4.胆
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