第1章：组织学绪论.ppt

1、第1章：组织学绪论,基础学院 组织学与胚胎学教研室,崔运河,实验室：北实验教学楼三层东侧。,注意事项： 1.穿隔离衣 2.带实验报告册、红蓝铅笔和橡皮，绘图。,目 录,组织学发展简史和当代组织学,组织学的学习方法,组织学技术简介,组织学的内容和意义,一、组织学的内容和意义,概念： 组织学(histology)：研究机体微细结构及其相关功能的科学。以显微镜观察组织切片为基本方法，又称显微解剖学 (microanatomy) 细胞(cell)：机体结构和功能的基本单位，成人约有1x1015 个、200 余种。 组织(tissue)：细胞群和细胞外基质构成。,一、组织学的内容和意义,组织类型： 上皮

2、组织、结缔组织、肌组织、神经组织。 四种组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官（organ） 。完成一个或几个生理活动。 若干功能相关的器官构成一个系统（system） 并完成一个连续的的生理活动。,一、组织学的内容和意义,研究层次： 光镜结构（常称为显微结构） 电镜结构（又称为超微结构）,意 义： 是一门重要的医学基础课，属主干学科。与解剖学、生理学、病理学及内科学、外科学等学科有密切关系。,二、组织学发展简史和当代组织学,发展简史：,1665年英国人Hooke首先利用显微镜发现细胞(cell)。,随后意大利学者、荷兰学者又相继发现了精子、红细胞、肌细胞、神经细胞等。,1831年发现了细胞

3、核，对细胞的结构有了初步认识。,1838年德国植物学家Schladen(施来登)、1839年动物学家Schwann（施万）分别发现植物和动物都是由细胞组成的，细胞是植物和动物的结构、功能和发生的基本单位。创立了“细胞学说”。,二、组织学发展简史和当代组织学,19世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代，放大倍数较高的显微镜，切片机和各种染料的应用。已能较为正确地描述细胞结构，使组织学发展为一门独立而系统的学科。,二、组织学发展简史和当代组织学,当代组织学： 20世纪后期，新仪器、新技术的发明和应用； 免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学 引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景。

4、,三、组织学的学习方法,审视角度 平面与立体 形态与功能,审视角度,组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点及 功能 亚细胞水平：细胞的超微结构 分子水平：主要在生物化学课程讲解,平面与立体,形态与功能,舒张状态,收缩状态,光镜技术,四、组织学技术简介,（一）光镜技术 石蜡切片术：适用于大多数组织样品的制作。 主要步骤： 取材 固定 水洗 脱水 透明 包埋 切片 贴片 染色 封片 。 其它制片方法：适用于某些特殊样品的制作，如 涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等。,染色,染料性质,碱性染料：具有阳电荷。含氨基（-NH2)、 二甲氨基-N(CH3)2等碱性助色

5、团。,酸性染料：具有阴电荷。含羧基（-OOH）、 羟基（-OH）或磺基（-SO3H） 等酸性助色团。,光镜技术,染色原理,嗜碱性：,细胞和组织中的酸性物质或结构与碱性染料亲和力强，易被着色。,嗜酸性：,细胞和组织中的碱性物质或结构与酸性染料亲和力强，易被着色。,中性：,与两种染料的亲和力均不强。,光镜技术,染色方法,苏木精(hematoxylin)： 蓝色，碱性染料，可使细胞核和胞质内的酸性物质或结构着蓝紫色。 伊红(eosin)： 红色，酸性染料，可使细胞质、溶酶体等大多数细胞器，以及细胞间质内的胶原纤维等碱性物质或结构着红色。,（1）、苏木精和伊红染色（简称 H E 染色）,光镜技术,染色

6、方法,HE染色,苏木精,伊 红,嗜碱性结构： 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等,嗜酸性结构： 细胞质基质 溶酶体、线粒体等细胞器 胶原纤维等,光镜技术,染色方法,HE染色法以外的所有染色法，通常是为了显示某些用HE染色法显示不出的细胞和结构。如： 苏丹法显示脂肪 镀银法显示神经细胞、嗜银颗粒 铁苏木素法显示心肌闰盘 马氏三色法显示胰岛细胞 甲苯胺蓝法显示糖胺多糖,（2）、特殊染色,光镜技术,四、组织学技术简介,几种特殊显微镜的应用 荧光显微镜 相差显微镜 暗视野显微镜 倒置显微镜 其它：共焦激光扫描显微镜、偏光显微镜、紫外光显微镜、隧道扫描显微镜、X-射线显微镜等。,光镜技术,电镜技术,四、组

7、织学技术简介,（二）电镜技术 发明：1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔 透射电镜术 (transmission electron microscope ,TEM) 电子束穿透样品(超薄切片)。放大倍数为几万至几十万倍，分辨率可达0.2nm。标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。被重金属浸染呈黑色的结构，称高电子密度 (electron-dense)；反之，浅染的部分称低电子密度 (electron-lucent)。,电镜技术,四、组织学技术简介,扫描电镜术 (scanning electron microscope，SEM) 观察组织表面的立体结构。如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞

8、噬行为等。,组织化学术,四、组织学技术简介,（三）组织化学术( histochemistry ) ： 通过化学或物理反应原理显示组织或细胞内化学成分，通常是使其形成有色终末产物，以便在镜下观察，可进行定位和定量。,四、组织学技术简介,1.一般组织化学术 PAS反应（过碘酸希夫反应，periodic acid Schiff reaction)。形成紫红色反应产物，反应显示糖类。 Feulgen反应。显示DNA的传统方法，先用稀盐酸处理，使DNA分子中脱氧核糖与嘌吟之间的连接键打开，形成醛基，再与Schiff试剂作用显色，故此反应显示DNA。,组织化学术,四、组织学技术简介, 免疫组织化学术 （immunocytochemistry) 利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方法，则为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽和蛋白质。,组织化学术,四、组织学技术简介,组织化学术, 原位杂交术 （in situ hybridization) 为核酸（DNA和RNA）组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示该核酸。,四、组织学技术简介,放射自显影术 图像分析术 细胞培养术 组织工程,其它技术,正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、 血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功， 已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等