要发表的综述

1、中医药防治支气管哮喘实验研究的进展左琳1 张念志21安徽中医学院2008级研究生2安徽中医学院第一附属医院呼吸内科 合肥 230031关键词：哮喘；实验研究；进展 支气管哮喘是由多种细胞（如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等）和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病 1。是临床常见病、多发病,该病难以根治且易反复发作。中医药在治疗支气管哮喘方面疗效显著, 其实验研究方面也有较大进展。本文参阅了近年来国内有关中医药治疗支气管哮喘实验相关文献,从气道炎症、气道重塑、细胞因子、免疫细胞等方面综述如下：1. 气道炎症方面：由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞参与的气道慢性炎症被认

2、为是哮喘的本质。张念志、郭晶晶2探讨哮喘平冲剂对哮喘豚鼠模型肺组织的形态学影响。方法是采用卵蛋白致敏哮喘豚鼠模型, 观察实验过程中哮喘豚鼠的一般情况及肺组织形态学变化。结果显示，哮喘平冲剂能明显减少豚鼠哮喘模型支气管黏膜层炎症细胞浸润, 抑制嗜酸性粒细胞浸润; 从而逆转黏膜上皮损伤, 粘液腺增生等哮喘病理改变。表明哮喘平冲剂治疗哮喘的作用机理与改善肺组织形态学变化有关。张念志、郭晶晶3采用卵蛋白致敏哮喘豚鼠模型，观察实验过程中哮喘豚鼠的一般情况及肺功能的变化,探讨哮喘平冲剂对哮喘豚鼠模型肺功能的影响。结论表明，哮喘平冲剂可降低气道高反应性，缓解气道阻塞和改善肺通气。赵玮、宋康等4探讨椒枝软胶囊

3、对哮喘气道黏蛋白(Muc5ac)高分泌的影响及作用机理。表明椒枝软胶囊可减少Muc5ac高分泌,其作用机制可能是通过抑制气道炎症和气道杯状细胞增生或化生。朱慧华、虞坚尔等5研究平喘方对支气管哮喘模型小鼠外周血和支气管肺泡灌洗液巨噬细胞炎性蛋白-1(MIP-1)和免疫球蛋白E(IgE)含量及CD86分子表达的影响,探索平喘方对小鼠支气管哮喘模型气道重建的作用机制。结论表明:平喘方能降低支气管哮喘模型小鼠MIP-1和IgE水平,下调CD86分子表达,这可能是平喘方减轻支气管哮喘模型小鼠的症状,改善支气管哮喘气道炎症的作用机制之一。王媛、孔微等6观察穿山龙对哮喘豚鼠肺内Eos及炎性因子IL-5、IL

4、-3、GM- CSF水平的影响。方法:健康豚鼠50只随机分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松组、穿山龙+醋酸泼尼松组及穿山龙组(n=10) 。采用卵白蛋白致敏激发法建立哮喘豚鼠模型,观察药物对豚鼠诱喘时间、喘息持续时间的影响以及激发前后呼吸频率的变化；低倍镜下观察各组BALF中Eos及肺组织中Eos浸润情况；ELISA法测定IL-5、IL-3、GM-CSF的含量。结果:穿山龙各治疗组能明显延长卵白蛋白对豚鼠的诱喘时间、减短喘息持续时间及减慢哮喘发作后的呼吸频率；穿山龙各治疗组豚鼠BALF及肺组织中Eos数量明显低于模型组；穿山龙各治疗组肺组织匀浆中IL-5、IL-3、GM- CSF浓度明显低于模

5、型组( P0.05P0.01) 。结论:穿山龙能减少哮喘豚鼠肺组织Eos的浸润,减低细胞因子IL-5、IL-3、GM-CSF的含量,从而减轻哮喘气道炎症。2. 气道重塑方面：重塑是指人体气管受到损伤后的修复,是一种自然反应。哮喘的气道重塑主要在于气道的持续性损伤和结构异常，并影响疾病的转归，增加治疗的难度。哮喘的气道重塑的主要病理学改变为气道壁的增厚。气道壁增厚可累及整个支气管树，但主要发生于膜性和小的软管性气道。哮喘时气道重塑与哮喘症状的持续存在,严重程度及气道高反应性密切相关。张弦、王强等7观察中药补肺方对缓解期哮喘豚鼠气道重塑的影响。结论表明:中药补肺方可改善缓解期支气管哮喘豚鼠气道重塑

6、,降低肺组织中TGF-1浓度,在缓解期对哮喘进行中药干预对预防气道重塑有实验意义。莫万勇,刘鑫等8观察血管内皮生长因子(VEGF)在慢性哮喘大鼠中的表达水平及柴朴汤的干预作用,探讨柴朴汤在气道重塑中的作用。结果显示慢性哮喘模型组大鼠气管内壁及气道平滑肌增厚,肺组织VEGFmRNA、VEGF蛋白的表达增高( P0.01) 。表明VEGF参与了慢性哮喘大鼠的气道重塑。柴朴汤能够抑制气道重塑。张燕萍,张元元等9初步探讨益肾平喘活血合剂对哮喘气道重塑大鼠血清及气道上皮炎性因子的影响。结果显示，与正常组比较,中药3个组血清IL-2水平下降, IL-4水平升高均轻于造模组和激素组,与造模组比较有显著差异(

7、P0.05);中药组组间比较,高、中剂量组优于低剂量组(P0.05) 。TGF-免疫组化造模组阳性反应最强,呈深棕色,激素组,中药3个组阳性反应稍弱,呈棕黄色至浅黄色,正常组呈淡浅黄色。苦味酸天狼星红染色,偏振光显微镜观察,造模组支气管粘膜及上皮下型和型胶原纤维明显增多;激素组较造模组减少,中药低剂量组改变与激素组类似,中药中、高剂量组胶原纤维沉积少于激素组;正常组可见少量胶原纤维分布。结论益肾平喘活血合剂治疗哮喘慢性持续期的作用途径,可能有一部分是通过调节IL-2、IL- 4、TGF-水平,减少气道壁胶原等来延缓支气管哮喘气道重塑的形成。3.细胞因子方面:吴滨,蔡宛如10研究血清IL-4、I

8、L-6及IgE在卵蛋白致敏哮喘大鼠发病中的作用及芍药甘草汤对它们的影响。结论表明，支气管哮喘的发病与血清IL-4、IL-6及IgE的异常有关, 芍药甘草汤对其具有调节作用。朱慧华,虞坚尔等11通过研究哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1水平及CD86分子表达的影响，探索平喘方防治支气管哮喘的作用机制。结果显示，平喘方能显著降低MIP-1水平、下调CD86分子表达、减轻气道黏膜上皮损伤，减少气道炎细胞浸润，减轻支气管壁及周围间质充血、水肿，具有减轻哮喘发病症状，改善哮喘气道炎症的作用。薛卫林，周兆山等12用清洁级雄性Wistar大鼠84只,随机分为7组,每组12只,采用卵蛋白制作大鼠哮喘模型。用酶联

9、免疫吸附试验法检测各组大鼠肺泡灌洗液中IFN-和IL-4的水平，观察防哮灵胶囊对哮喘大鼠肺泡灌洗液IFN-和IL- 4含量的影响,探讨防哮灵胶囊治疗哮喘气道炎症的作用机制。结论表明，防哮灵胶囊治疗哮喘气道炎症的作用机制与纠正失衡的IFN-/IL-4水平有关。贺明，杨建民13研究蠲哮汤对哮喘大鼠血管内皮细胞黏附分子(ICAM21)及白介素12表达的影响。建立由卵蛋白诱发的支气管哮喘大鼠模型;采用ELISA法检测哮喘大鼠静脉血和肺泡灌洗液)中ICAM21、IL-12的含量。结论是，蠲哮汤能减少造模动物ICAM21,提高IL-12的表达,而且随着药物剂量的减少,各分表达呈递增趋势,具有量效关系。王晓

10、红，杨牧祥等14研究温阳益气平喘方对支气管哮喘大鼠肺组织嗜酸粒细胞凋亡及相关基因蛋白Bcl22和Bax表达的影响。结论表明，温阳益气平喘方可通过调节抑制凋亡基因bcl22和促进凋亡基因bax蛋白的表达,促进肺内EOS凋亡,减少炎细胞浸润,减轻哮喘气道炎症。梁建卫,张玉振等15探讨疏肝化瘀养阴清肺方对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠IL-6、IL-8的影响。结果表明:疏肝化瘀、养阴清肺方能有效降低大鼠哮喘模型血清及BALF中IL-6、IL-8的水平。4.免疫细胞方面：史锁芳、吴寒等16用卵蛋白致敏豚鼠复制支气管哮喘动物模型，用祛风宣痹方治疗，观察实验动物肺泡型细胞病理形态的变化，探讨祛风宣痹方对支气

11、管哮喘的作用机理。结果表明，祛风宣痹方有效治疗哮喘的作用与防止肺泡型细胞损伤，抑制其凋亡密切相关。刘仁慧、郭忻17研究淫羊藿女贞子配伍对哮喘大鼠模型Th1/Th2失衡的免疫调节作用。结果表明:淫羊藿女贞子对哮喘大鼠Th1/Th2失衡有一定的调节作用。蒋玉清18探讨中药辛夷单味方剂对支气管哮喘患者Th1/Th2免疫平衡的影响及辅助治疗作用。表明辛夷单味中药能够改善支气管哮喘患者Th1/Th2免疫失衡及炎性介质表达,发挥对支气管哮喘的辅助治疗作用。韩晓伟、姜欣等19制备豚鼠哮喘模型诱导发敏,喷雾给药,观察定喘汤对哮喘豚鼠致喘潜伏期、微生态菌群、肥大细胞脱颗粒率的影响及血清总补体含量的变化。结果提示

12、，中药定喘汤雾化吸入,通过调节机体的免疫功能,可以改善由哮喘引起的微生态失衡状态,加强机体的防御功能,减少哮喘的发病率。王志英,李向荣23观察哮宁颗粒防止支气管哮喘复发的疗效,并探讨其作用机理。实验研究结果表明:哮宁颗粒能降低豚鼠肺泡灌洗液细胞总数及白细胞分类计数,能降低豚鼠血清及肺组织中ET和IL-4水平,升高NO和IFN-r含量。5.展望近年来,中医药在哮喘的实验研究方面,取得了一定进展,但尚存在不足：大多实验研究尚缺乏金指标,缺乏对经方、验方中有效成分的研究分析,未能研制开发出疗效显著的中成药，尚缺乏大规模的临床验证及循证医学支持，不能完全代表临床,需要进一步深入研究。迄今为止没有一种实

13、验模型能完全等同人类支气管哮喘的病理生理过程。现有的模型大都仅能重现支气管哮喘某些阶段的形态及病理生理改变。大多数研究尚缺乏缺乏病证证相应的实验模型。因此,我们将来应该做的工作有：选择临床疗效卓著的经方、验方进行实验研究。可开展多中心、随机双盲、大样本的临床研究、以得出证据级别较高的循证医学证据。对哮喘的病证模型进一步探讨。参考文献1 陆再英，钟南山 内科学M. 北京:人民卫生出版社,2007，692 张念志，郭晶晶 哮喘平冲剂对哮喘豚鼠模型肺组织形态学的影响J.成都中医药大学学报，2008，30（4）：63-64，843 张念志，郭晶晶 哮喘平冲剂对哮喘豚鼠模型肺功能的影响J.中国中医急症，

14、2008，17（6）：815-816 4 赵玮,宋康等 椒枝软胶囊对哮喘大鼠气道黏蛋白影响的实验研究J.中华中医药学刊，2009，27（12）：2561-25645 朱慧华,虞坚尔等平喘方对支气管哮喘模型小鼠气道重建的影响J.中西医结合学报，2009，7（3）：261-2676 王媛,孔微等 中药穿山龙对哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞影响的实验研究J.中华中医药学刊，2009，27（9）：1898-19027补肺方对缓解期哮喘豚鼠气道重塑作用机制的研究J.江西中医学院学报，2009,21（2）：57-588莫万勇,刘鑫等 柴朴汤下调哮喘大鼠血管内皮生长因子表达抑制气道的重塑J.社区医学杂志，2010，8

15、（1）：16-179张燕萍,张元元 益肾平喘活血合剂对哮喘气道重塑大鼠血清及气道上皮炎性因子的影响J.时珍国医国药，2010，21（1）：114-11610吴滨, 蔡宛如 芍药甘草汤对哮喘模型大鼠血清白细胞介素-4，白细胞介素-6及IgE影响的实验研究J.福建中医药,2008,39（5）：47-5011 朱慧华，虞坚尔 平喘方对支气管哮喘模型小鼠巨噬细胞炎性蛋白- 1水平及CD86分子表达的实验研究，上海中医药杂志，2008，42（9）:58-6212 薛卫林，周兆山等 防哮灵胶囊对哮喘大鼠肺泡灌洗液IFN-和IL- 4的含量的影响J.现代中医药，2009，29（2）：61-6313 贺明，杨

16、建民 祛瘀化痰法对哮喘大鼠血管内皮细胞黏附分子及白介素12表达的影响J.中国实用医药，2009,4（9）：3-414 王晓红等 温阳益气平喘方对支气管哮喘大鼠嗜酸粒细胞凋亡和相关基因蛋白Bcl22和Bax表达的影响J.中国免疫学杂志，2009，25（10）：943-94715 梁建卫 ,张玉振等 生物医学工程研究，疏肝化瘀养阴清肺方对CVA大鼠IL - 6、IL-8的实验研究J.2009,28(2):14815016史锁芳，吴寒等 祛风宣痹方对实验性哮喘豚鼠肺泡型细胞凋亡的影响J.江苏中医药，2009，41（10）：68-6917刘仁慧，郭忻 淫羊藿女贞子配伍对哮喘大鼠模型Th1 /Th2 调节作用的研究J.中华中医药学刊，2009，11（27）2288-229118蒋玉清 辛夷单药对支气管哮喘患者Th1/Th2免疫平衡的影响研究J.临床和实验医学杂志，2010，9（1）：16-1719 韩晓伟，姜欣等