流式细胞术在白血病中的应用.ppt

1、a，0，流式细胞术在白血病/淋巴瘤分类和监测中的应用，a，1，世界卫生组织血液肿瘤分类体系(1999)，新分类体系的基本原则如下：结合形态、免疫表型、遗传变化及林爽方面，识别疾病的实际本质。“这将为世界各国的肿瘤学家和病理学家提供有趣的合作交流新篇章，必将大大促进血液肿瘤的治疗和认识。”(美国临床肿瘤协会，临床肿瘤专刊第17卷3835-3849页，1999年)更重要的是，提供疾病分类和治疗选择及预后判断的更明确相关，打开血液肿瘤靶向治疗和个性化计划的新时代。a，2，白血病分子诊断的意义，系统诊断，白血病早期发病，异常标记，准确诊断的正确预后指导治疗研究资料，残留监测目标治疗，免疫/遗传学目标，

2、MICM诊断，a，3，、a、4、a、5，investigative tools for mm diagnosisis and management(2008 ash education program book p298)patient evalue总蛋白质；本周蛋白质尿和血清免疫固定血清游离锁和比例骨髓检查和骨髓活检Bone marrow aspiration and biopsy组免疫表型-克隆验证和CD38/CD56/CD19/CD45抗体组合，对90多名患者正常血浆细胞中残留MM细胞最终器官损伤检查和全血细胞计数进行评估；生化检查：血清肌酐和骨钙预后评估球蛋白、betta-2微球蛋白、

3、LDH、CRP骨髓细胞遗传学和FISH t(4；14)、t(14)；16)，del 17p是针对特定患者的特殊研究，a，6，传统流式细胞术的林爽应用细胞数：CD4，CD34 DNA含量：多重倍数，s期结果是数据，准确性取决于良好的质量管理，传统流式细胞术在白血病免疫表型中的应用单参数“白血病表型治疗选择疗效监测，预后判断，流式细胞手术，a，7，骨髓-异质性系统的应用，多个系列淋巴细胞(T，B，NK)单核细胞神经原发细胞baso Phil eryte 所有抗体在标准化试剂中结合使用“秘密武器”或专用抗体，可以从有限样本中获得最大的信息量，并通过对正常抗原表达的正确理解，有效地确认与疾病状态相关的

4、变化。a，9，可聚合物的油类型显微手术，可以区分骨头和骨髓。1万个微小细胞，每一个为0.5 %，a，10，a，11，CD45/SS，Wood(2004)methods cell biology 75336059-576， 与白血病相关的免疫表型特征，a，15，Aml-m0，a，16，AML-m2，a，17，AML-m3，a a，31，a，32，32，tcrv克隆，a，33，摘要，流式细胞术有助于诊断血液异常疾病的更明确诊断排除其他疾病，有助于细分亚型更准确的原始细胞识别和定量，在预后判断治疗后快速监测，a，34，免疫表达两者可以匹配，也可以不匹配。在某些情况下，尤其是骨髓性白血病亚型的情况下，

5、免疫表型分析并不寻常；复杂的情况需要多种检查，例如特定染色体核型分析或融合基因综合判断。a，35，MRD背景，目前大部分白血病患者可以通过多种化疗药物的联合使用获得形态完全缓解(CR)。但是大部分患者不能维持长期缓解，复发的患者很多。复发的主要原因是患者体内有少量难以形态识别的残留白血病细胞。如果能准确检测患者体内残留的白血病的状态，部分可以用丘脑治疗，避免很多不必要的痛苦。a、36、MRD、outline of leuke mic diagnsis、morphology : 1-5%、cyto genetics 3360 1-5%、flow cytometry准备HSCT前MRD评价HSCT

6、优化时间HSCT后MRD评价免疫抑制治疗时间曹征等临床试验结束时MRD评价新的抗all药物或治疗结果，a，39，MRD及预后，剩馀白血病细胞10-2，3年复发率76-94% 10-3剩馀白血病细胞10-3这些特征通常不在正常的血细胞上，因此，利用这些标记，可以识别正常细胞和异常细胞，特异性地检测残留的白血病细胞。评价这些方法的有效性和应用性主要基于该方法的特异性、灵敏度、简洁性、重复性和速度。FCM免疫表型，FCM DNA配体，PCR，FISH是更好的方法。a，41，MRD流动分析原则，与正常分化模型诊断相反，偏离正常发育阶段的免疫表型相对特异性抗原组合随访结果，正常免疫表型和其他不连续群体以

7、诊断免疫表型为起点。a，42，免疫表型异常适合MRD检测。ALL 95%儿童ALL 90-95%成人ALL AML 85%儿童AML 80-95%成人AML，a，43，报告模板，a，44，案例1 AML，案例资料：女性，3淋巴细胞比例下降。提示：急性髓系白血病(可能是AML-M2)。基因：AML1/ETO阳性。a，45，病例1(续1)，2009.7化疗D33: FCM:可见残留，CD33 CD19细胞约占0.04%。基因：AML1/ETO阳性。a、46、2009.9d70: FCM:否。基因：AML1/ETO语音。2010.3 D245: FCM:免疫表型无明显异常细胞。基因：AML1/ETO

8、语音。案例1(续2)，A，47，案例B-ALL，案例资料：男性，3岁，2007.3早期FCM印象：CD45/SSC点图中的门分析，在CD45弱表达分布区域中可见的异常细胞群，细胞核中的药提示：急性B淋巴细胞白血病(一般B-ALL)。基因：BCR/ABL语音。a，48，2008.11化疗20个月：FCM:没有明显的表型异常残留白血病细胞。基因：渡边杏了。2009.09化疗30个月：FCM:看到残留，将CD45dim/-地区约1.87%的CD10 CD19 CD20-细胞和1.55%的HLA-DR CD19 CD34细胞视为残留白血病细胞。(见右图)基因：没有。案例2(继续1)，a，49，案例2(继续2)，2010.03化疗DC-CIK第36个月：FCM印象：CD45/SSC点图中的门分析，CD45声音原始扩展分布区域的异常细胞群，提示：与病史一起，考虑急性B淋巴细胞白血病(一般型B-ALL)复发。基因：ALL基因筛选为TSL/ERG阳性，其他为阴性。，a，50，案例3 T-ALL，案例资料：女性，3岁，2008.10早期FCM印象：CD45/SSC点图中的门分析，原始细胞分布区域中可见的异常细胞群体，约59%的核细胞，与淋巴细胞的边界不明，提示：急性t淋巴细胞白