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1、.,ApoE的检测方法,.,112,158,cys,cys,cys,arg,arg,2,3,4,TGC,cys,CGC,arg,codon:112/158,TGC,TGC,TGC,CGC,CGC,arg,CGC,.,测序 ARMS-PCR PCR-SSCP PCR-RFLP Q-PCR,.,T/C,T/C,112,158,T,C,C,T,P1,P2,P3,P4,5,3,上游引物,P5,下游引物,A管:P1、P3、P5 B管:P2、P4、P5,1 2 3 4 5 6,1 2 3 4 5 6,11、22、33、44、55、66分别代表基因型 E2/E2、 E2/E3 、E2/E4 、E3/E3 、
2、E3/E4 、E4/E4,ARMS-PCR,.,PCR-SSCP,单链构象多态性(SSCP) 是在非变性聚丙烯酰胺凝胶上,根据短的单链DNA 或RNA 分子碱基序列不同形成的不同构象;一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变, 形成多态性。,E2/E2:A,A1 E2/E3:A,A1,B,B1 E2/E4:A,A1,C,C1 E3/E3:B,B1 E3/E4:B,B1,C,C1 E4/E4:C,C1,.,PCR-RFLP,GCGC,CGCG,A,B,C,D,E,E2: TT 片段A E3: TC 片段E、D E4: CC 片段B、C、D,112位:GT/CGC,158位:GC/TGC,E2/E2:A E2/E3:A,D,E E2/E4:A,B,C,D E3/E3:E,D E3/E4:B,C,D,E E4/E4:B,C,D,.,Q-PCR,F,R,probe,probe,.,.,.,Roche SNP Genotyping Introduction,.,融解曲线分析的原理,.,融解曲线分析的结果判读,.,单色荧光对Apo
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