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文档简介
1、.1,抗体,2,概念1。抗体(antibody,Ab)的概念是一种球蛋白,它由浆细胞合成并分泌,含有相应的抗原和特异性的糖原。抗体分布在体液(血液、淋巴液、组织液及粘膜外分泌液)中,血清中最多。2.免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)概念1968年,世界卫生组织把抗体活性和化学结构类似抗体的球蛋白统称为免疫球蛋白(Ig)。免疫球蛋白除了分布在体液中外,还可以存在于b细胞膜上。3,a1,a2,b,g,白蛋白,球蛋白,(c),(a)免疫前血清中g球蛋白的带宽,免疫后相对集中。布鲁顿病患者血清蛋白中g球蛋白绑扎缺损(c)。Diversity of Ab(抗体分子的多样性),先天性丙种球蛋
2、白缺乏症。为了性蠕动隐性遗传性疾病,主要被少年发现,细菌感染反复,而对病毒或真菌感染不敏感。儿童外周淋巴组织发育不全,血清中各种免疫球蛋白水平很低,儿童体液免疫功能不足,而细胞免疫功能正常。4,具有抗体活性的Ig在用电泳分析血清时,大部分存在于-区域,因此很多人认为Ig和-球蛋白是相同的。抗体不在-区-区也证明没有抗体活性。5,存在形态BCR(B细胞受体)膜类型(membrane immunoglobulin,mIg)抗体分泌类型(secretd immunoglobulin,SIG),6,1节抗体的分子结构,7,1,免疫球蛋白的基本结构,“y”类型,四肽链重链(:)光链(: 2个),可变区域
3、(v区域)超更改区域(HVR,)含有很多脯氨酸,有弹性。适合抗原结合,也与补体激活有关。8,比较了来自徐璐其他b细胞克隆的Ig轻链氨基酸序列,结果v区的变化主要集中在3个小区域,每个区域由610个氨基酸残基组成。这三个区域也称为高变量区域或互补决定区域(CDR),参与抗原结合部分的构成。9,10,11,灯光链:VL,CL中链:VH CH1,CH2,CH3,CH4 IgG IgM IgA IgE IgD,2,免疫球蛋白的功能区,ribbon:不连续、紧密折叠的区域,中链和灯光链通过链内的二维键连接此区域具有特殊的功能特性。IgG分子以两条h链和两条l链的孔刘价格结合在一起。灯光链包含两个域:VL
4、和CL,中链包含一个VH和三个CH域。VH和VL一起形成抗原结合部位。Ig分子中线是对称的,有两个相同的抗原结合部位。12,主要功能1。VL和VH是抗原结合的部分(FV区域)。Cl和CH具有相同形状的遗传标记。3.IgG的CH2和IgM的CH3具有补体特有组件C1q的连接点,参与补体系统的激活。4.CH3/CH4具有结合包括单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、b细胞、NK细胞等的Fc段受体的功能。5.IgG的CH2 CH3具有通过胎盘的IgG的参数特性。13,3,免疫球蛋白水解片段1。木瓜蛋白酶(在肌氨末端切断重链)fab段(抗原结合片段)可以与抗原结合,具有抗体活性。Fc段(结晶片)不能与抗原结合,
5、可以执行Ig的其他功能,2 .胃蛋白酶(佩血因) (在卡复基末端附近的重链)F(ab)2: 2个表位。PFc:没有生物活性。意义:明确Ig分子生物学的作用。14,木瓜蛋白酶作用于IgG分子中链之间二硫化键的n端,分解为fab段和Fc段。胃蛋白酶切割二硫化键的c端,生成F(ab)2和pFc段。,15,16,4,其他成分1。连接链(joining chain,j链):IgM五聚体,IgA二聚体2。分泌纯化(secretory piece,sp): sIga,17,第二节抗体的种类和生物活性,第一,抗体的类型(1)同种类型(isotype)等抗体,每个个体所具有的免疫球蛋白的抗原特异性,其抗原主要存
6、在于ig的c区。18,1 .类别和子类别(取决于h链的抗原性)IgG(gamma)IgA(alpha)IgM(变异数)igd (delta) IGE(立体论),(1)类别,(2)子类别,19,20个,2个。类型和亚型(根据光链c区抗原特异性的不同而不同的打字)(1)类型(kappa)类型(2)亚型(链):OZ()(或1):第190位(亮氨酸)OZ(-),21,(2)同类(allotype)同一个体之间的免疫球蛋白,主要反映分子CH和CL中一个或多个氨基酸的差异(基因标记)。Gm因子:Gm130 Am因子:A2m1,A2m2 Km因子:Km1,Km2,Km3 (3)固有(idiotype)在同一
7、体内,由其他b细胞克隆产生的免疫球蛋白分子v区和t,b细胞表面抗原受体由免疫球蛋白的超变量区域特有的氨基酸序列及组成决定。22、23,2,抗体的生物活性(a)特定结合抗原超场表位静、氢键、范德华力可逆的影响因素:PH,温度,电解质中和效果,以及毒素与病毒和Ag的联合吞噬作用,1。接合基础,2。实际意义,24,抗原,b微细胞位置,抗体CDR,表位,25,(2)补体系统ab (IgG) Ag C1q补体经典路径IgG4,IgA和IgE补体补体旁路途径(3)结合Fc受体(1)介导的超敏反应:类型超敏反应;(2)调理效果:促进IgG抗原(颗粒)单核、巨噬细胞和中性粒细胞(FcR)吞噬作用;(3) ad
8、cc: IgG抗原(目标细胞)Fc R(NK细胞)杀伤目标细胞。(4)通过胎盘和粘膜的Fcr部分,哥哥,26,27,27,28,28,29,3,抗体用fc受体(a) IgG都是通过免疫球白草系列的FcR:单核细胞,巨噬细胞,中性细胞,IgG(IgG1和IgG3)的高亲和力受体。FcR:分布广泛,低亲和力,免疫复合物和多合形式的IgG;Fcr: IgG 1,IgG3是低亲和力受体。结合巨噬细胞、NK细胞、嗜酸细胞和中性粒细胞、单体或免疫复合形态的IgG,介导NK微细胞的ADCC效应及巨噬细胞的捕获或去除等。30,(b) IgE的Fc受体FcR:结构:transmembrane glycoprot
9、ein,Ig超家族,IgE的高亲和力受体。分布和功能:嗜碱细胞和肥大细胞,介导的速度型超敏反应。FcR(CD23):结构:膜蛋白,低亲和力受体,c型凝集素家族成员。分布:成熟的b细胞、活化的巨噬细胞、树突细胞等。(3) IgA的Fc受体FcR(CD89)是transmembrane glycoprotein,是Ig superfamily的成员。为中亲和受体,主要表现在单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等,介导吞噬、ADCC、炎症介质的释放。(4) IgM受体和IgD电子主要在b细胞中表达,两者在成熟的b细胞中共同表达。32、FcR、FcR和FcR结构图,33,4,免疫球蛋白超家族(a)概念很多细
10、胞膜表面和身体中的某些蛋白质分子,多肽链折叠类似于Ig折叠,在DNA水平和氨基酸序列中,IgV区域或Ig C区域具有高同源性。编码这些多肽链的基因称为免疫球蛋白基因超家族,基因表达产物称为免疫球蛋白超家族(IGSF)。,34,(2) 1。t细胞、b细胞抗原识别受体和信号转导分子2。MHC及其相关分子3。Ig受体4 .一些细胞因子受体5。神经系统功能相关分子6。一些白细胞分化抗原(CD),35,免疫球蛋白超家族分子的结构图,Ig分子超家族的成员大多数是细胞膜表面分子。该图显示了Ig分子超级族的一些主要成员及其分子结构。36,第3节各种免疫球蛋白的特性和功能1,IgG 1。一般特性(1)单体分子;
11、(2)四个子类别;(3)血清含量最高(75% ig);(4)半衰期最长的(2123天);(5)35岁达到水平(8.017mg/ml);37,2。生物活性(1)通过胎盘(新生儿抗感染);(2)补体活化(热分解细胞);(3)调理(促进吞噬作用);(4)介导细胞毒作用(ADCC)。实用意义(1)抗感染;(2)自身抗体自身免疫病;(3)介导的过敏(,类型);(4)闭合性抗体肿瘤细胞逃逸;(5)亲和层析IgG纯化;(6)免疫学检查。38、2、IgM 1。五聚体,最大分子量(900kd),也称为巨球蛋白;人类发展过程中最早的合成ig;体液免疫反应中最先产生的Ig感染早期免疫;占血清Ig含量的510%。5.
12、半衰期5日血清中的特定IgM水平暗示了最近的感染。激活补体;7.IgM不能通过胎盘脐血或新生儿血清的IgM值表明胎儿宫内感染;8.b细胞膜IgM体液免疫反应;9.自身抗体自身免疫病。39,40、3、IgA 1。两种类型2。半衰期6天;占血清Ig含量的515%。粘膜局部抗感染免疫,防止病原微生物附着;聚合IgA启用补体替代路径。血清型:IgA 1,单体;分泌:IgA2,二聚体,粘膜局部浆细胞合成;分泌片由粘膜上皮细胞合成。41,origin of secretory component of siga,42、4、IgD 1。单体分子2。存在形态:在分泌血清中,功能不全;膜结合b细胞表面,3 .意
13、义(1)是b细胞成熟的重要标志;(2)调节b细胞激活、增殖和分化。占血清Ig含量的1%。5.半衰期3天。43、5、IgE 1。单体分子;血清含量最低(0.002%的Ig);在种子进化中出现得最晚。呼吸机和胃肠道浆细胞生成;介导的超敏反应;6.过敏性疾病和特定寄生虫感染患者血清中特异性IgE水平上升。44,5种主要免疫球蛋白特性比较(1,45,5种主要免疫球蛋白特性比较(2)、46,各种免疫球蛋白比较,47,第四节免疫球蛋白的基因结构和1,免疫球蛋白的基因池,免疫球蛋白的基因组成。48,2,免疫球蛋白的基因结构及其重排和表达,免疫球蛋白基因结构,49,3,抗体多样性的遗传学基础(1)胚胎中大量v
14、,d,j基因片段;(2)V-D-J和V-J重排时,基因片段随机组合。(3)VDJ连接过程中核苷酸缺失和n区核苷酸插入;(4)L链h链之间的随机对组合;(5)体细胞突变。50,4,免疫球蛋白的类转换Ig类转换,也称为同种转换:b细胞受到抗原刺激后,先合成IgM,然后转化为其他类别,如合成IgG。机制:b细胞激活基因重排形成V-D-JC合成IgM CD40/CD40L信号和细胞因子作用c基因被具有相同抗原特异性的不同Ig和子类取代。TD-Ag刺激,51,B细胞基因重排机制图,52,53,5节单克隆抗体和基因工程抗体1,多克隆抗体1。定义:抗原分子通常有多个抗原决定基,动物免疫后,通过刺激具有相应抗
15、原受体的多个b细胞的免疫反应,可以产生各种抗原决定基的各种抗体。徐璐其他b细胞克隆产生的抗体称为多克隆抗体(pcab)。2.实际意义(1)感染性疾病的预防、治疗(非特异性差异,发生过敏反应)(2)林爽诊断,54、2、单克隆抗体(McAb) 1。定义:在单克隆b细胞杂交瘤中产生,仅识别抗原分子的特定抗原决定群,非常特殊的抗体。每个单克隆抗体在其类别、子类型、类型和亲和力完全相同,并且非常均匀。性质非常均匀。杂交瘤细胞骨髓瘤细胞无限增殖。免疫b细胞合成,分泌特定抗体。4.杂交瘤技术HAT徽章:二次黄嘌呤(h)、甲氨蝶呤(a)和胸腺嘧啶核苷(t)。55,56,iii,基因工程抗体基因工程抗体是通过PCR技术获取抗体基因或抗体基因片段,在适当的载体和重组后引入其他
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