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文档简介
1、实训 培养基灵敏度的测定技术,(一)实训目的 掌握培养基灵敏度试验的操作方法及培养基灵敏度检查结果的判断。,(二)材料和用具 1ml无菌刻度吸管、l0ml无菌刻度吸管、需氧及厌氧培养基、真菌培养基、试管、培养皿、0.9无菌生理盐水、酒精灯、培养箱、试管架、吸耳球、涂布棒等。,(三)操作步骤 1.菌悬液制备 取己配制好的细菌和真菌的原菌液1m1分别加到无菌试管内,加9ml0.9的无菌生理盐水作10倍稀释,作上标记1(10-1),作为1号管;从1号管内各吸取1ml分别加入一个无菌试管内,加9ml无菌生理盐水,作上标记2(10-2);重复上述操作,作10倍系列稀释,直至稀释到10-7,制成约含101
2、00个菌的稀释菌液。 2.涂菌平板制备 取已稀释至10-7的细菌稀释菌液各lml分别涂布在已制好的细菌培养基平板表面,做3个平板。然后倒置培养;取已稀释至10-7的真菌稀释菌液各1m1分别涂布在已制好的真菌培养基平板表面,做3个平板,倒置培养。,3.液体培养基接菌 取10-7的细菌稀释菌液1ml,接种至每管装有9ml需气、厌气菌培养基的试管内,平行做3管; 取10-7的真菌稀释菌液1ml,接种至每管装有9ml真菌培养基的试管内,平行做3管; 以未接菌的细菌培养基和真菌培养基管做阴性对照。 4.培养条件 需气、厌气菌30-35培养3天,真菌23-28培养5天。,5.结果观察及判定 观察培养结果,判定培养基是否灵敏度合格。 6.注意事项 试验用的菌悬液在制备时要注意挑取的菌落不要过多,过多会使菌悬液过浓,导致计数不准确;各个稀释剂要分别用不同的刻度吸管来吸取,在做平板菌落计数时要将菌悬液滩布均匀;平板要倒置培养;要做到以未接菌的培养基做阴性对照。,(四)实训结果 依据实训操作写出实训报告。 (五)思考题 培养基灵敏
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