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文档简介
1、第四次实验 钙、磷、试剂空白测定,目的与要求 1.掌握钙、磷的测定原理和操作方法 2.掌握试剂空白测定的应用 3.了解钙、磷的测定的临床意义,一、血清钙离子测定,甲基麝香草酚蓝比色法 邻甲酚酞络合酮法（临检中心推荐） 原子吸收光谱法 离子选择电极法,(一)实验原理,血清中钙离子在碱性溶液中能与甲基麝香草酚蓝染料结合，生成有色复合物。,(二)试剂,工作液：显色试剂与碱性试剂等量混合,(三)操作,1. 检测参数 主波长：612nm 温度： 室温。 2.空白管 标准管 样本管,3.分别混匀各管，室温放5分钟，以空白管校零，记录各管吸光度。,4.结果 钙 (mmol/L)=,(四)临床意义,1.参考值
2、： 2.12.9mmol/L。 生命危急值：1.7mmol/L，3.3mmol/L。 2.增高：甲旁亢、多发性骨髓瘤、VitD增多症、代酸等 3.降低：甲旁减、尿毒症、佝偻病等。,(五) 方法评价,1.重复性、准确度较好、简便、易于自动化。 2.线性：在样本浓度0-3.75mmol/L范围内, 线性良好。 3.精密度：批内 CV5。批间相对误差5 4.易受干扰。,三、无机磷的测定,磷钼酸还原法临检中心推荐 染料结合法 氧化酶法 同位素质谱法决定性方法 原子吸收光谱法,(一)实验原理：,血清中无机磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成在340nm处有吸收峰的磷钼酸铵，其吸光度的变化与无机磷含量成正比。,
3、(二)试剂,(三)测定步骤,混匀，以3710在340nm波长处比色。 结果 无机磷含量=A样本/A校准C校准,空白管,校准管,标本管,磷试剂,纯化水,校准液,标 本,(ml),1.0,1.0,1.0,0.02,0.02,0.02,(四)临床意义,1.参考值：成人：0.97-1.62mmol/L 儿童：1.45-2.10mmol/L 2.增高：甲旁减、慢性肾炎晚期、多发性骨 髓瘤、骨折愈合期等。 3.减低：甲旁亢、肾小管变性病变时等。,(五) 方法性能,精密度:批内变异 CV5。 线性范围:0-4mmol/L。,三、试剂空白测定,1.定义：用蒸馏水调零测定仅仅未加样品的试剂管，用以扣除试剂干扰对结果所造成的系统误差。 本次实验用钙离子测定的方法进行试剂空白实验。,2.操作,室温放5分钟，以蒸馏水调零，612nm 测定。,计算,空白值=空白OD/标准OD 标准浓度 样本值= 标准浓度,3. 试剂空白的选择原则,（1）试剂中某组分在测定波长下对光有吸收； （2）被测试样本身在测定波长下没有光吸收； （3）被测试样中的其他成分与显色剂作用
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