专题一基因工程习题

1、专题一基因工程练习专题一基因工程练习 1 1金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，使其观赏价值降低。科学家在某种植物中找到了抗枯金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，使其观赏价值降低。科学家在某种植物中找到了抗枯 萎病的基因，用转基因技术培育出了抗枯萎病的新品种金茶花。据下图完成萎病的基因，用转基因技术培育出了抗枯萎病的新品种金茶花。据下图完成(1)(1)(5)(5)题：题： (1)和结合能形成，常用的酶有(1)和结合能形成，常用的酶有_；其能结合形成；其能结合形成 ，最重要的原因是和经酶处理后具有，最重要的原因是和经酶处理后具有_。 (2)(2)形成的过程是形成的过程是_，它是实施基

2、因工程的第二步，也是基因工程的核心，它是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心， 一个的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子及一个的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子及_等。等。 (3)(3)若过程为将目的基因导入受体细胞若过程为将目的基因导入受体细胞，则将此抗病基因导入植物细胞采用最多的方法是，则将此抗病基因导入植物细胞采用最多的方法是 _；除此之外，转基因植物还可以通过；除此之外，转基因植物还可以通过_和和_两种方法获得。两种方法获得。 (4)(4)在过程中，在过程中， 获得抗病基因的金茶花细胞将经历获得抗病基因的金茶花细胞将经历_和和_过程后才能获得。过程后才能获得。

3、 (5)(5)经培养长成的植株具备了抗病性，经培养长成的植株具备了抗病性， 这说明这说明_。 抗枯萎病金茶花培育成功说明一种生物的基因表达系统能够识别来自另一种生物的抗枯萎病金茶花培育成功说明一种生物的基因表达系统能够识别来自另一种生物的DNADNA 的的 _。 2 2干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血只能提取干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血只能提取 0.50.5 g g，所以价格昂，所以价格昂 贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。阅读材料完成贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。阅读材料完成(1)(1

4、)(3)(3)题。题。 (1)(1)干扰素基因在基因工程中称为干扰素基因在基因工程中称为_。用。用_技术可使获得的基因迅速扩增。技术可使获得的基因迅速扩增。 (2)(2)此基因与细菌的质粒结合，构建基因表达载体要用此基因与细菌的质粒结合，构建基因表达载体要用_处理基因和质粒特定核苷处理基因和质粒特定核苷 酸之间的酸之间的_，使两者露出相同的黏性末端，再用，使两者露出相同的黏性末端，再用 _将二者连接成基因表达载体，然将二者连接成基因表达载体，然 后将其导入酵母菌体内。酵母菌在基因工程中称为后将其导入酵母菌体内。酵母菌在基因工程中称为_。 (3)(3)科学家在培养转基因植物时，常用科学家在培养转

5、基因植物时，常用 _中的质粒做载体。除了质粒外，基因工程的载体还中的质粒做载体。除了质粒外，基因工程的载体还 有有。 3 3下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图完成下列问题。下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图完成下列问题。 (1)(1) 能能 否否 利利 用用 人人 的的 皮皮 肤肤 细细 胞胞 来来 完完 成成 过过 程程 ？ _ ， 为为 什什 么么 ？ _。 (2)(2)过程一定要用到的酶是过程一定要用到的酶是_酶，过程在细胞内需要的酶是酶，过程在细胞内需要的酶是_酶。酶。 (3)(3)在利用在利用 A A、B B 获得获得 C C 的过程中

6、，一般用的过程中，一般用_切割切割 A A 和和 B B，使它们产生，使它们产生 _，再加入，再加入_，才可形成，才可形成 C C。 (4)(4)为使过程更易进行，可用为使过程更易进行，可用_(_(填药剂填药剂) )处理处理 D D。 4 4科学家通过基因工程方法，培育了能抗棉铃虫的棉花植株抗虫棉。其过程大致如图所示。根科学家通过基因工程方法，培育了能抗棉铃虫的棉花植株抗虫棉。其过程大致如图所示。根 据题意，回答下列问题。据题意，回答下列问题。 (1)(1) 基基因因工工程程的的操操作作程程序序主主要要包包 括括的的四四个个步步骤骤是是：_、 _、_、_。 (2)Ti(2)Ti 质粒是农杆菌中

7、的一种质粒，其上有质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有 T T DNADNA，把目的基因插入，把目的基因插入 TiTi 质粒的质粒的 T T DNADNA 中是利用中是利用 T T DNA_DNA_的特点。的特点。 (3)Bt(3)Bt 毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为 _。 (4)(4)将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，将目的基因导入受体细胞的方法有很多种， 该题中涉及的是该题中涉及的是_ 。 (5)(5) 目目 的的 基基 因因 能能 否否 在在 棉棉 株株 体体 内内 稳稳 定定 维维 持

8、持 和和 表表 达达 其其 遗遗 传传 特特 性性 的的 关关 键键 是是 _， 这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是_。 5 51 1抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾 病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射入病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射入 1 1抗胰蛋白酶来缓解症状。据此完成抗胰蛋白酶来缓解症状。据此完成(1)(1)(2)(2) 题。题。 (1)(1)图图 1 1 表示获取人表示获取人 1 1抗胰

9、蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题：抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题： a a过过 程程 是是 在在 _ 酶酶 的的 作作 用用 下下 完完 成成 的的 ， 该该 酶酶 的的 作作 用用 特特 点点 是是 _。 c c 过程称为过程称为_，该过程需要的原料是，该过程需要的原料是_。 要确定获得的基因是否是所需的目的基因，要确定获得的基因是否是所需的目的基因， 可以从分子水平上利用可以从分子水平上利用_技术检技术检 测该基因的碱基序列。测该基因的碱基序列。 (2)(2)利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊

10、的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人 1 1抗 抗 胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图 2 2 所示。所示。 获得目的基因后，常利用获得目的基因后，常利用_技术在体外将其大量扩增。技术在体外将其大量扩增。 载体上绿色荧光蛋白载体上绿色荧光蛋白(GEP)(GEP)基因的作用是便于基因的作用是便于 _。 基因表达载体基因表达载体 d d，除图中的标示部分外，还必须含有，除图中的标示部分外，还必须含有_。 6 6阅读下面的资料并回答问题。阅读下面的资料并回答问题。 资料一资料一科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中科学家将牛生长

11、激素基因导入小鼠受精卵中 , ,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆 菌转化法培育出转基因烟草。菌转化法培育出转基因烟草。 资料二资料二T T4 4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码 T T4 4溶菌酶的基因进行了改造溶菌酶的基因进行了改造, ,使其表达的使其表达的 T T4 4溶溶 菌酶第菌酶第 3 3 位的异亮氨酸变为半胱氨酸位的异亮氨酸变为半胱氨酸, ,在该半胱氨酸与第在该半胱氨酸与第 9797 位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键, ,提高了提高了 T T4

12、 4溶菌酶的耐热性。溶菌酶的耐热性。 (1)(1)资料一属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用资料一属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法。构建基法。构建基 因表达载体常用的工具酶是因表达载体常用的工具酶是和和。 在培育有些转基因植物时在培育有些转基因植物时, , 常用农杆菌转化法常用农杆菌转化法, ,农杆菌的作用是农杆菌的作用是。 (2)(2)资料二中的技术属于资料二中的技术属于工程的范畴工程的范畴, ,该工程是指以分子生物学相关理论为基础该工程是指以分子生物学相关理论为基础, ,通过基因通过基因 修饰或基因合成修饰或基因合成, ,对对进行改造进行改造,

13、 ,或制造一种或制造一种的技术。在该实例中的技术。在该实例中, ,引起引起 T T4 4溶溶 菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的序列发生了改变。序列发生了改变。 7 7在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因 afpafp 对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值。下图所示对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值。下图所示 是获得转基因莴苣的技术流程是获得转基因莴苣的技术流程, ,请据图回答下列问题。请据图回答下列问题。 7 7 题图题图 8 8 题图题图 (1)(1)获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和获取目的基因

14、的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和。 (2)(2)重组质粒除了带有抗冻蛋白基因重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afpafp 以外以外, ,还必须含有启动还必须含有启动子、终止子、子、终止子、和和 等等, ,这样才能构成一个完整的基因表达载体。这样才能构成一个完整的基因表达载体。 (3)(3)如果受体细胞如果受体细胞 C C1 1是土壤农杆菌是土壤农杆菌, ,则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的， 使目的基因进入受体细胞使目的基因进入受体细胞 C C2 2, ,并将其插入受体细胞并将其插入受体细胞 C C2 2中的中的上，使目的基因的上，使目的基因的 遗

15、传特性得以稳定维持和表达遗传特性得以稳定维持和表达, ,形成转基因莴苣。形成转基因莴苣。 经过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达经过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达, ,在分在分 子水平上可用子水平上可用法进行检测法进行检测, ,如果出现杂交带如果出现杂交带, ,说明目的基因已经表达蛋白质产品说明目的基因已经表达蛋白质产品, , 转基因莴苣培育成功。转基因莴苣培育成功。 8 8、如上图为某种质粒表达载体简图、如上图为某种质粒表达载体简图, ,小箭头所指分别为限制性核酸内切酶小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoEcoR R 、BamBamH H 的酶切的酶切 位点位点, ,ampam

16、p为青霉素抗性基因为青霉素抗性基因, ,tettet为四环素抗性基因为四环素抗性基因,P,P 为启动子为启动子,T,T 为终止子为终止子, ,oriori为复制原点。已知目的为复制原点。已知目的 基因的两端分别有包括基因的两端分别有包括EcoEcoR R 、BamBamH H 在内的多种酶的酶切位点。据图回答下列问题。在内的多种酶的酶切位点。据图回答下列问题。 (1)(1)将含有目的基因的将含有目的基因的 DNADNA 与质粒表达载体分别用与质粒表达载体分别用EcoEcoR R酶切酶切, ,酶切产物用酶切产物用 DNADNA 连接酶进行连接后连接酶进行连接后, ,其中由其中由 两个两个 DNA

17、DNA 片段之间连接形成的产物有片段之间连接形成的产物有 R RR R 、3 3 种。种。 (2)(2)用上述用上述 3 3 种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。 接种到含青霉素的培养基中接种到含青霉素的培养基中, ,能生能生 长的原核宿主细胞所含有的连接产物是长的原核宿主细胞所含有的连接产物是。之后将这之后将这 些些 宿宿 主主 细细 胞胞 接接 种种 到到 含含 四四 环环 素素 的的 培培 养养 基基 中中 , , 能能 生生 长长 的的 原原 核核 宿宿 主主 细细 胞胞 所所 含含 有有 的的 连连 接接 产产 物物

18、 是是; ;能生长的原因是能生长的原因是。 (3)(3)目的基因表达时目的基因表达时,RNA,RNA 聚合酶识别和结合的位点是聚合酶识别和结合的位点是 , ,其合成的产物是其合成的产物是。 (4)(4) 在在 上上 述述 实实 验验 中中 , , 为为 了了 防防 止止 目目 的的 基基 因因 和和 质质 粒粒 自自 身身 环环 化化 ， 酶酶 切切 时时 应应 选选 用用 的的 酶酶 是是。 9 9、图、图 1 1 表示含有目的基因表示含有目的基因 D D 的的 DNADNA 片段长度片段长度(bp(bp 即碱基对即碱基对) )和部分碱基序列和部分碱基序列, ,图图 2 2 表示一种质粒的结

19、表示一种质粒的结 构和部分碱基序列。现有构和部分碱基序列。现有MspMsp、BamBamH H 、MboMbo、SmaSma 4 4 种限制性核酸内切酶种限制性核酸内切酶, ,它们识别的碱基序它们识别的碱基序 列和酶切位点分别为列和酶切位点分别为 C C CGGCGG、G G GATCCGATCC、 GATCGATC、CCCCCC GGGGGG。请回答下列问题。请回答下列问题。 (1)(1)图图 1 1 的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。连接。 (2)(2)若若用用限限制制酶酶SmaSma完完全全切切割割图图 1 1 中中 DNADNA

20、片片段段, ,产产生生的的末末端端是是末末端端, ,其其产产物物长长度度 为为。 (3)(3)若图若图 1 1 中虚线方框内的碱基对被中虚线方框内的碱基对被 T TA A 碱基对替换碱基对替换, ,那么基因那么基因 D D 就突变为基因就突变为基因 d d。 从杂合子中分离出图从杂合子中分离出图 1 1 及其对应的及其对应的 DNADNA 片段片段, ,用限制酶用限制酶SmaSma完全切割完全切割, ,产物中共有产物中共有种不同长度的种不同长度的 DNADNA 片段。片段。 (4)(4)若将图若将图 2 2 中质粒和目的基因中质粒和目的基因 D D 通过同种限制酶处理后进行连接通过同种限制酶处

21、理后进行连接, ,形成重组质粒形成重组质粒, ,那么应选用的限制酶那么应选用的限制酶 是是。在导入重组质粒后。在导入重组质粒后, ,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌, , 一般需要用添加一般需要用添加的的 培养基进行培养。培养基进行培养。 经检测经检测, ,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因 D D 不能正常表达不能正常表达, ,其最可能的原因其最可能的原因 是是 。 1010 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点， 圈圈 l l、 圈圈 2 2 中箭头表示相关限制酶的酶

22、切位点中箭头表示相关限制酶的酶切位点 请请 回答下列问题：回答下列问题： （1 1）一个如图）一个如图 1 1 所示的质粒分子经所示的质粒分子经 SmaSma切割前后，分别含有切割前后，分别含有个游离的磷酸基团个游离的磷酸基团 （2 2）若对图中质粒进行改造，插入的）若对图中质粒进行改造，插入的 SmaSma酶切位点越多，质粒的热稳定性越酶切位点越多，质粒的热稳定性越 （3 3）用图中的质粒和外源）用图中的质粒和外源 DNADNA 构建重组质粒，不能使用构建重组质粒，不能使用 SrnaSrna切割，原因是切割，原因是 （4 4）与只使用）与只使用 EcoR IEcoR I 相比较，使用相比较，

23、使用 BamHBamH和和 HindHind两种限制酶同时处理质粒、外源两种限制酶同时处理质粒、外源 DNADNA 的优点在于可的优点在于可 以防止以防止。 （5 5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入。 （6 6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。 （7 7）为了从为了从 cDNAcDNA 文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变 体，然后在体，然后在的培养

24、基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 1111、下表是几种限制酶识别序列及其切割位点、下表是几种限制酶识别序列及其切割位点, ,图图 1 1、图、图 2 2 中标注了相关限制酶的酶切位点中标注了相关限制酶的酶切位点, ,其中切割其中切割 位点相同的酶不重复标注。请回答下列问位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题。题。 限制酶限制酶 识别序列及识别序列及 切割位点切割位点 BamBamH H BclBclSauSau3A3A HinHind d (1)(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒用图中质粒和目的基因构建重组质粒, ,应选用应选用两种限制

25、酶切割两种限制酶切割, ,酶切后的载体和目的基酶切后的载体和目的基 因片段因片段, ,通过通过酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒, ,需将其转入处需将其转入处 于于态的大肠杆菌。态的大肠杆菌。 (2)(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌, ,应在筛选平板培养基中添加应在筛选平板培养基中添加, ,平板上长出的菌平板上长出的菌 落落, ,常用常用 PCRPCR 鉴定鉴定, ,所用的引物组成为图所用的引物组成为图 2 2 中中。 (3)(3)若若BamBamH H 酶酶切切的的 DNADNA 末末端端与与BclBcl酶酶

26、切切的的 DNADNA 末末端端连连接接, ,连连接接部部位位的的 6 6 个个碱碱基基对对序序列列 为为, ,对于该部位对于该部位, ,这两种酶这两种酶( (填“都能”、“都不能”或“只有一种填“都能”、“都不能”或“只有一种 能”)切开。能”)切开。 (4)(4)若用若用SauSau3A3A 切图切图 1 1 质粒最多可能获得质粒最多可能获得种大小不同的种大小不同的 DNADNA 片段。片段。 1212干扰素是能够抑制多种病毒复制的抗病毒物质干扰素是能够抑制多种病毒复制的抗病毒物质科学家利用基因工程技术从人的科学家利用基因工程技术从人的 T T 淋巴细胞中提淋巴细胞中提 取干扰素基因转入羊

27、的取干扰素基因转入羊的 DNADNA 中，培育出羊乳腺生物反应器，使羊乳汁中含中，培育出羊乳腺生物反应器，使羊乳汁中含 有人体干扰素请回答：有人体干扰素请回答： （1 1）研究人员用研究人员用 DNADNA 测序仪显示了基因组的某测序仪显示了基因组的某 DNADNA 片段一条链的碱基排列片段一条链的碱基排列 顺序图片其中图顺序图片其中图 1 1 的碱基排列顺序已经解读，其顺序是：的碱基排列顺序已经解读，其顺序是：GGTTATGCGTGGTTATGCGT， 请解读图请解读图 2 2 显示的碱基排列顺序：显示的碱基排列顺序：。 （2 2）科学家从相关基因组中获取了干扰素基因，并采用）科学家从相关基

28、因组中获取了干扰素基因，并采用技术对干扰素基因进行扩增，技术对干扰素基因进行扩增， 然后将干扰素基因与质粒等载体组合形成了然后将干扰素基因与质粒等载体组合形成了。 （3 3）科学家将干扰素基因与羊）科学家将干扰素基因与羊基因的基因的等调控组件重组在一起，通过等调控组件重组在一起，通过 等方法，导入羊的等方法，导入羊的细胞中，通过系列操作培育转基因动物。细胞中，通过系列操作培育转基因动物。 （4 4）如何检测和鉴定目的基因已被成功导入羊体内？请写出两种方法。）如何检测和鉴定目的基因已被成功导入羊体内？请写出两种方法。 1313农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转

29、入棉花，培育抗农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗 病棉花品系请回答下列问题：病棉花品系请回答下列问题： （1 1）要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用）要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用进行切割切割的部位是两个核苷酸进行切割切割的部位是两个核苷酸 之间的之间的，假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因，假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病基因 分子末端是分子末端是 （2 2）切割完成后，采用）切割完成后，采用酶将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的酶将运载体与该抗病基因连接，连接

30、后得到的 DNADNA 分子称分子称 为为。 （3 3）将连接得到的）将连接得到的DNADNA 分子导入棉花细胞常用的方法是分子导入棉花细胞常用的方法是，利用植物细胞具有的，利用植物细胞具有的 性进行组织培养性进行组织培养 （4 4）为了确定抗病基因是否插入到棉花染色体）为了确定抗病基因是否插入到棉花染色体DNADNA 上，通常才用上，通常才用技术，并用技术，并用 _标记目的基因做探针标记目的基因做探针 （5 5）该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是（）该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是（） A A淀粉淀粉 B B脂类脂类 C C蛋白质蛋白质 D D核酸核酸 E E抗生素抗生素 （6 6） 烟草

31、中的抗病基因可以嫁接到棉花的烟草中的抗病基因可以嫁接到棉花的 DNADNA 上，上， 原因是：原因是：。 1414如图甲是目的基因如图甲是目的基因EPSPSEPSPS（4.0kb4.0kb，1kb=10001kb=1000 对碱基）与对碱基）与pUC18pUC18 质粒（质粒（2.7kb2.7kb）重组的示意图图）重组的示意图图 中中 Ap是抗氨苄青霉素基因，Ap是抗氨苄青霉素基因，lacZlacZ 是显色基因，其上的是显色基因，其上的 EcoRIEcoRI 识别位点位于目的基因插入位点的右侧，识别位点位于目的基因插入位点的右侧， 其控制合成某种酶能将无色染料其控制合成某种酶能将无色染料 X-

32、galX-gal 变成蓝色，变成蓝色， 最终能在含无色染料最终能在含无色染料 X-galX-gal 的培养基上将含该基因的菌的培养基上将含该基因的菌 落染成蓝色落染成蓝色 （图乙中深色圆点即为蓝色菌落）（图乙中深色圆点即为蓝色菌落） （1 1）将处理后的目的基因）将处理后的目的基因 EPSPSEPSPS 与与 pUC18pUC18 质粒、质粒、DNADNA 连接酶混合后，再与某菌种混合，若要从混合物中连接酶混合后，再与某菌种混合，若要从混合物中 筛选出含筛选出含 EPSPSEPSPS 基因的菌株，在图乙的培养基中必须加入基因的菌株，在图乙的培养基中必须加入请判断图乙中所出现的请判断图乙中所出现

33、的 白色和蓝色两种菌落中，何种颜色菌落会含有重组质粒白色和蓝色两种菌落中，何种颜色菌落会含有重组质粒 （2 2）现用）现用EcoRIEcoRI 酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为 kb kb 和和 kb kb 的片段，则可以的片段，则可以 判断该质粒已与目的基因重组成功判断该质粒已与目的基因重组成功 （重组质粒上目的基因的插入位点与（重组质粒上目的基因的插入位点与 EcoRIEcoRI 的识别位点之间的碱基对的识别位点之间的碱基对 忽略不计）忽略不计） （3 3）假设）假设 EPSPSEPSPS 基因已被成功转移到植物基因已被成功转移到植物F

34、F 中，但植物中，但植物F F 仍没有表现出抗性，分析可能的原因仍没有表现出抗性，分析可能的原因 是是 1515转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其 培育过程如图所示（至代表过程，培育过程如图所示（至代表过程，A A 至至 C C 代表结构或细胞）代表结构或细胞） ： （1 1）图中过程用到的酶是）图中过程用到的酶是，所形成的，所形成的 B B 叫做叫做 （2 2）过程常用）过程常用处理农杆菌，使之成为处理农杆菌，使之成为细胞，利于完成转化过程。细胞，利于完成转化

35、过程。 （3 3）图中过程需要用到的激素是）图中过程需要用到的激素是 （4 4）在分子水平上，可采用）在分子水平上，可采用的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原 16 16如图是利用牛乳腺生产人生长激素的流程图，回答相关问题如图是利用牛乳腺生产人生长激素的流程图，回答相关问题 （1 1）图中）图中 B B 过程需要过程需要酶是酶是含有启动子的是含有启动子的是（填“目的基（填“目的基 因”或“目的基因”因”或“目的基因” ） （2 2）大量扩增目的基因可采用的方法是）大量扩增目的基因可采用的方法是。 （3 3）为牛的）为牛的，b b 过程

36、常用的方法为过程常用的方法为图示过程中，为使人生长激素基图示过程中，为使人生长激素基 因在牛乳腺细胞中表达，需将该基因与因在牛乳腺细胞中表达，需将该基因与等调控组件重组在一起等调控组件重组在一起 （4 4）检测人生长激素基因在牛的乳腺细胞中是否转录需用）检测人生长激素基因在牛的乳腺细胞中是否转录需用法法 1717、将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以、将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以 下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。 表表 1 1几种限制酶识别序列及切割位

37、点表几种限制酶识别序列及切割位点表 限制酶限制酶AluAlu AGCTAGCT EcoREcoR GAATTCGAATTC CTTAAGCTTAAG PstPst CTGCAGCTGCAG GACGTCGACGTC SmaSma CCCGGGCCCGGG GGGCCCGGGCCC 切割位点切割位点 TCGATCGA 请根据以上图表回答下列问题请根据以上图表回答下列问题 （1 1） 在采用常规在采用常规 PCRPCR 方法扩增目的基因的过程中，方法扩增目的基因的过程中， 使用的使用的 DNADNA 聚合酶不同于一般生物体内的聚合酶不同于一般生物体内的 DNADNA 聚合酶，聚合酶， 其最主要的特

38、点是其最主要的特点是。 （2 2）图）图 1 1 步骤所用的步骤所用的 DNADNA 连接酶对所连接的连接酶对所连接的 DNADNA 两端碱基序列是否有专一性要求？两端碱基序列是否有专一性要求？ （3 3）为将外源基因转入马铃薯，图）为将外源基因转入马铃薯，图 1 1 步骤转基因所用的细菌步骤转基因所用的细菌 B B 通常为通常为。 （4 4）对符合设计要求的重组质粒）对符合设计要求的重组质粒 T T 进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图 1 1 中标中标 示的酶切位点和表示的酶切位点和表 2 2 所列的识别序列，对以下酶

39、切结果做出判断。所列的识别序列，对以下酶切结果做出判断。 采用采用 EcoREcoR和和 PstPst酶切，得到酶切，得到种种 DNADNA 片段。片段。 采用采用 EcoREcoR和和 SmaSma酶切得到酶切得到种种 DNADNA 片段。片段。 1818、ch1Lch1L 基因是蓝细菌基因是蓝细菌( (蓝藻蓝藻)DNA)DNA 上控制叶绿素合成的基因，为研究该基因对叶绿素合成的控制，需上控制叶绿素合成的基因，为研究该基因对叶绿素合成的控制，需 要构建该种生物缺失要构建该种生物缺失 ch1Lch1L 基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示，请据图分析回答问题。基因的变异株细胞。技术路线如图甲所

40、示，请据图分析回答问题。 (1)(1)与真菌相比较，与真菌相比较， 蓝细菌在结构上最主要的特点是蓝细菌在结构上最主要的特点是_。 (2)(2)过程中均使用的工具酶有过程中均使用的工具酶有_。 (3)(3)构构建建重重组组质质粒粒B B在在整整个个操操作作过过程程中中的的目目的的是是_ 和和。 (4)(4)若含有若含有 ch1Lch1L 基因的基因的 DNADNA 片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如图乙所示。请回答问题：片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如图乙所示。请回答问题： 构建含构建含 ch1Lch1L 基因的重组质粒基因的重组质粒 A A 时，时，应选用的限制酶是应选用的限制酶是_，对

41、对_进行进行 切割。切割。 同时用酶同时用酶 1 1 和酶和酶 4 4 切割图乙中的质粒，切割图乙中的质粒，则产生含有则产生含有 15001500 对碱基和对碱基和 82008200 对碱基的两种片段；对碱基的两种片段；用图中四种用图中四种 酶同时切割此质粒，则产生含有酶同时切割此质粒，则产生含有 500500 对碱基和对碱基和 82008200 对碱基的两种片段；若换用酶对碱基的两种片段；若换用酶 1 1 和酶和酶 3 3 同时切割此质同时切割此质 粒，则产生的片段是粒，则产生的片段是_。 （5 5）可用）可用 PCRPCR 技术对技术对 ch1Lch1L 基因扩增时，需一对引物基因扩增时，需一对引物 I I、IIII，从理论上推测，该，从理论上推测，该 DNADN