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文档简介
1、风湿症和免疫疾病检查,中日友好医院检查和张哲,1,专业纯化,免疫系统功能,免疫系统功能,2,专业纯化,guyousheng免疫和适应免疫的关联性和作用,3,专业纯化,免疫功能检查Immunological其中IgG、IgA、IgM、含量最多。基准值:Igg:6.94-16.18g/l Iga:0.68-3.78g/l IgM:0.60-2.63g/l,6,专业精炼,免疫球蛋白灯链,ig灯链正常人血清免疫球蛋白链:链约为2: 1。参考值:血液kap 5 . 9813 . 29 GL;lam 2.80-6.65 GL;尿KAP18.5mgL;LAM51mg/L林爽意义:含量增加见于多发性骨髓瘤、巨
2、球蛋白血症等。本周蛋白质:Bence-Jones protein(BJP),7,专业纯化,免疫球蛋白定量检测,血清免疫球蛋白减少:由于一个或多个免疫球蛋白减少,在所有先天和后天免疫缺陷病中发现。血清免疫球蛋白增加:1。多克隆增加;患者的血清型Ig在各种感染中很常见,特别是肺结核、慢性支气管炎、慢性肝病、系统性红斑狼疮、风湿性关节炎等各种细菌感染。2.单克隆增多:在多发性骨髓瘤、重链疾病、轻链疾病、原发性大球蛋白血症等免疫增殖性疾病中发现。8,专业纯化,林爽意义,尿液免疫球蛋白:多见于多发性骨髓瘤和肾脏损伤。脑脊液免疫球蛋白:增高更常见于中枢神经系统感染、多发性硬化等。9,专门纯化,克隆免疫球蛋
3、白的分类鉴定,血清免疫固定电泳:血清蛋白在琼脂糖凝胶介质中通过电泳分离后,蛋白质固定剂和每个免疫球蛋白及其轻链抗血清,在凝胶表面的通路中添加、培养和扩散后有对应抗原,在适应位置形成抗原抗体复合体,沉淀染色后,蛋白质电泳可以将泳道和抗原抗体沉淀部位着色为氨基黑,根据电泳迁移距离分离单克隆组,并将各种免疫球蛋白及其轻链分类。血清免疫固定电泳可用于确认m蛋白的类型、亚型和轻链类型。10,专业纯化,冷球蛋白,冷球蛋白(cryoglobulin,CG)是一组异常免疫球蛋白,它们可以在低温下自动沉淀,在高温下溶解。临床称冷球蛋白血症和冷纤维蛋白原血症,11,专业纯化,血清补体测定,补体是血清中酶活性和功能
4、连续反应的糖蛋白。补体在受到致病源微生物的攻击时,在抗体存在的情况下,参与停用病毒或杀死细菌的免疫反应。补体在自身免疫疾病中也可以破坏自己的组织或细胞,引起病理损伤。补体系统激活分为补体不稳定,室温快停用,采血后要立即接受检查。C5C9,经典路径:C1q-r-s,C4,C2,C3,迂回路径:C3,12,专业精制,总补体溶血活性测定complement 50% hemolytic activity溶血程度在补体活性一定范围(20%-80%)内呈正相关。一般50%的溶血是测试的终点。基准范围:50-100U/ML林爽意义:主要反映补体C1C9成分的综合水平。增加:见于急性炎症、感染、组织损伤和恶性
5、肿瘤减少:补体消耗相关疾病(急性肾小球肾炎、SLE、RA)、补体合成减少(肝硬化、慢性肝病等)、先天性缺陷。13,专业纯化,溶血程度与补体含量之间的关系:14,专业纯化,CH50试验溶血现象,完全溶血,部分溶血,不溶血,15,专业纯化,免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白of immunoglobin,免疫其中IgG、IgA、IgM、含量最多。基准值:IgG:6.94-16.18g/l IgA:0.68-3.78g/l IgM:0.60-2.63g/l,16,专业精炼,补体C3,C4测量,C4测量减少:在活动性免疫复合物性疾病(如SLE、RA、慢性活动性肝炎)中发现。肾炎的病原学鉴定:急性肾小球肾炎(
6、链球菌感染后肾炎、狼疮肾炎)C3减少;病毒性肾炎血清C3含量正常。IgA肾病C4减少。18,专门纯化,细胞因子,细胞因子是一类蛋白质和多肽,它们在细胞之间传递信息,调节免疫反应和炎症反应。林爽意义:sIL-2R可用于急性排斥反应和免疫疾病观察及疗效检查。IL-6、IL-8、TNF经常用于检测传染病。IL-2上升见于自身免疫疾病,减少见于免疫缺陷病、恶性肿瘤和病毒感染;IFN增加发现于SLE,恶性肿瘤早期,急性病毒感染;乙型肝炎,哮喘,活动性类风湿性关节炎等。19、专门纯化、细胞免疫检查、参与身体细胞免疫反应的细胞t淋巴细胞b淋巴细胞NK细胞(自然杀伤)中性粒细胞目标细胞数(amount)、活性
7、(function)、表面标记(membrane molecules),20,专门纯化,血液淋巴细胞免疫表型分析,淋巴细胞在发育过程中发生表面抗原对应的变化,该细胞在分化过程中产生的抗原是分化抗原(CD)。根据淋巴细胞表面分化抗原(CD),分为相应的细胞子集t细胞免疫标记。CD3,CD4,CD8 B细胞免疫标记物:CD19,CD20 NK细胞免疫标记物:CD16,prod56,21,专业纯化,CD3分子3360表现在所有成熟的t淋巴细胞表面,是反映整个t细胞变化的t细胞固有标记物。免疫缺陷、自身免疫疾病、恶性肿瘤。CD4分子:辅助t细胞(Th)表达。恶性肿瘤,遗传性免疫缺陷病,艾滋病,免疫抑制
8、剂的使用减少。CD8分子:是抑制,杀伤细胞的象征。在自身免疫疾病中发现。增加见于传染性单核细胞增多症,慢性肝炎。CD4/CD8比例:减少了提示免疫抑制,例如AIDS患者(0.5)。提高过敏症,发现于自身免疫疾病。CD19分子:b细胞表达。增加见于急性和慢性淋巴细胞白血病等。林爽意义,22,专业纯化,自身免疫病检查,23,专业纯化,自身免疫病Autoimmunedisease AID,由于过度和持续的自身免疫反应,组织器官受损自身抗体autoantibodies Ab是指对自身组织、器官、细胞和细胞内成分的免疫球蛋白。自体抗体检测方法间接免疫荧光法IIF酶联免疫吸附ELISA放射免疫测定法RIA
9、粒子凝集PA免疫印迹方法IB,简介,24,专业纯化,自身免疫检测项目, 1类风湿因子Rheumatoid Factor RF 2抗核抗体检测抗双strand antiibodies dsdna 4抗提取核抗原多肽抗体谱抗可移植核苷抗常性抗体检测抗微米蛋白抗体抗抗体抗apla) 12抗核小体抗体(anti-nucleosome antiody,anua) 13抗环核苷类抗体(cyclic citrullinated peptide,CCP) 14抗平滑肌抗体(anti-nucleosome antiody,anua) RF可分为IgG IgA IgM IgD IgE 5类型。主要见于风湿性关节炎
10、,还与其他结缔组织病有关。参考值:30U/ml速度散射浊度法的林爽意义:类风湿关节炎(RA)80%,在混合冷球蛋白血症中增加。系统性红斑狼疮,硬皮病,自身免疫溶血性贫血,恶性贫血。慢性炎症过程可产生低逆度RF。这些疾病包括亚急性细菌性心内膜炎、疟疾、梅毒、结核病、肝炎、麻风病、传染性单核细胞增多症等。RF随年龄的不同可能略有提高,但他们以后很少发生RA。27,专门纯化,抗核抗体检测抗核抗体antinuclear antoina抗核抗体统称抗核酸和核蛋白抗体。目标抗原分布在细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等整个细胞中。因此,广泛定义抗核抗体是指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。参考
11、值:阴性1:4iif法在血清中存在不同性质的特定ana,可以与目标抗原结合,表示不同形式的荧光模型。28,专业纯化,核均质核粒化核粒化核核心类型homogeneous speckled nucleo blar h s n,抗核抗体荧光模型,29,专业纯化,抗核抗体荧光模型,丝点状细胞质微粒子粒化粒化粒化PBC原发性胆汁性肝硬化,32,专门精制,干燥综合征Scl:硬皮病primary biliary cirrhosis PBC :原发性胆汁性肝硬化systemic lupuss ana是自身免疫疾病的重要筛查。阳性表示自身免疫疾病的可能性。34、专业纯化、抗双链DNA检测抗双链strand抗体d
12、sdna检测原理:固定在生物板材载体上的绿色蝇短膜虫和稀释血清温育。标本为阳性,IGA,IGG,IGM特定抗体与移动矩阵相结合,结合抗体与荧光素标记的抗人抗体反应,荧光显微镜下观察。参考值1333610阴性IIF林爽意义的阳性在活性SLE中发现,效价与疾病的活动有关。如果在健康人的血清中发现这种抗体,其中85%在5年内发展成SLE。35,专业纯化,抗dsDNA抗体(绿色蝇短膜虫),运动基质,核,36,专业纯化,可提取核抗原多肽抗体谱抗可降解核抗原抗体ENA为这种抗原生成的抗体称为ENA抗体。该抗体主要是:抗U1-RNP抗体、抗sm抗体、抗ssa抗体、抗ssb抗体、抗scl-70抗体和抗jo-1抗体。参考值:阴性(免疫印迹法IB),37,专业纯化,林爽意义的U1-RNP抗体为混合结缔组织疾病的特征指标95-100%,系统性红斑狼疮30-40%,但经常Sm抗体Sm抗体为系统性红斑狼疮Ss-A抗
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