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植物组织中超氧物歧化酶活性的测定,制作人:刘洪庆 单 位: 植物生理学教研室,一、实验目的,掌握SOD酶活性测定方法。 掌握分光光度计、光照培养箱、冷冻离心机使用方法。,二、实验原理,因此光还原反应后,反应液蓝色愈深说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。,本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。,核黄素,被氧化物质,还原的核黄素,氧,氮蓝四唑,蓝色的化合物,(560nm),2 + 2H+ H2O2 + O2,SOD,三、实验材料,绿豆芽下胚轴,四、 实验步骤,1、酶液提取,2、显色反应,表1 各溶液加入量,3、SOD活性测定,五、实验结果计算,SOD总活性 =,单位:酶单位/g鲜重表示;,Ack照光对照管的光密度值; AE样品管的光密度值; V样液总体积(ml); a测定时样品用量(ml); W样重(g);,六、思考题,1、在SOD测定中为什么设暗中和照光两个对照管? 2、影响本实验准确性的主要因素是什么?应如何克服?,

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