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文档简介
1、.,1,怎样鉴别异型淋巴细胞,.,2,主要内容,.,3,一、物品准备,准备干净的玻片、推片 瑞氏染液、 待检EDTA抗凝全血 计时器 显微镜 计数器,.,4,二、样本处理,血涂片的制备: 1、制作血涂片的载玻片要求清洁、干燥、中性、无油腻; 2、距载玻片一端约1cm处滴EDTA抗凝全血30ul; 3、将推片放置于血滴的前端,紧挨血滴,使其顺推片边缘散开; 4、调整好推片与载玻片的夹角,使其约呈30度角,均匀向前推片。,.,5,影响涂片厚薄的因素有:血滴大小、推片与载玻片间的夹角,推片速度、血细胞比容。 制备涂片时,血滴越大、角度越大、推片速度越快,血膜越厚,反之越薄。血细胞比容增高、血液粘度较
2、高时,应采用小血滴、小角度、慢推,可得满意结果;血细胞比容减低、血液较稀时,应采用大血滴、大角度、快推。,.,6,血涂片的好坏直接影响到细胞的鉴别。 一张良好的血涂片,要求厚薄适宜、头体尾明显、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、两端和两边留有一定空隙。,.,7,三、涂片染色,1、滴入瑞氏染液I液数滴盖满标本,30秒; 2、再加入瑞氏染液II液与I液比例为1:1,染13分钟; 3、用流水冲洗涂片。,.,8,注意事项: 1、血涂片干透后火焰固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。 2、冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以防燃料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱色。如血涂片上有燃料颗粒沉积,可滴加甲醇
3、,然后立即用流水冲洗。 3、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。 4、染色的深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、PH值密切相关,可根据情况适当纠正。,.,9,四、显微镜观察,由于各种白细胞体积大小不等,在血涂片中分布很不均匀,一般体积较小的淋巴细胞在头、体部分布较多,而尾部和两侧以中性粒细胞核单核细胞较多,异常大的细胞常在片尾末端出现。一般认为细胞分布在片头至片尾的3/4区域比较均匀,因此分类时最好选择在体尾交界处,且必须按一定方式有规律地移动视野。 需在油镜下观察。 先调粗螺旋找到视野,再调动细螺旋慢慢找到较为清晰的视
4、野。,.,10,在病毒或过敏原等因素刺激下,外周血淋巴细胞增生并发生异常形态变化,称异型淋巴细胞或“Downey”细胞。已知此种细胞属T淋巴细胞,其形态的变异是因增生亢进,甚至发生母细胞化的结果。根据细胞形态可分为三型。,.,11,2,I型 空泡型,III型 幼稚型,II型 不规则型,分型,.,12,细胞中等大小,细胞 多呈圆形或部分不规则 形或阿米巴型,胞质嗜 碱性强,呈深蓝色,含 有大小不等的空泡或呈 泡沫状,无颗粒或有少 数颗粒,胞核偏位,呈 椭圆形,肾形或分叶形, 染色质粗糙,呈粗网状 或成堆排列。,I型(泡沫型或浆细胞型),.,13,细胞胞体较I型大, 形态不规则,胞质量 多,呈浅灰
5、蓝色,但 靠胞膜边缘处较深染 且不整齐,无空泡, 可有少数天青胺蓝颗 粒,胞核呈圆形、椭 圆型或不规则形,染 色质较I型细致,亦呈 网状。,型(不规则型或单核细胞样型),.,14,细胞直径 15um18um,形态不规则,胞质呈蓝色,可有分布较均匀的小空泡,一般无颗粒,胞核圆形或卵圆形,可见核仁1个2个,染色质细致、均匀,呈网状排列,无浓集现象。,型(幼稚型或幼淋巴细胞样型),.,15,异型淋巴细胞除I、II、III型三个类型外,有时也可见到少数组织细胞样的难以归类的异型淋巴细胞。,异型淋巴细胞,.,16,异型淋巴细胞增多主要见于传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热、湿疹等病毒性疾病和过敏性疾病。正常人血片中可偶见此种细胞。一般病毒感染异型淋巴细胞 10%,因此二者可依据异性淋巴细胞的多少来鉴别
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