基因工程原理练习题及其答案

1、复习基因工程的问题题型：名词解释(10个) 30分填补(每1分) 20分选择题(各问题1分) 10分简单解答(4个) 20分论题(2个) 20分。第一章绪论1 .名词解释：基因工程：按照预修订的蓝摄影图片，利用现代分子生物学技术特别是酶催化剂学技术对遗传物质DNA直接进行体外重组操作和改造，将一种生物(供体)基因转移到另一种生物(接纳体)，实现接纳体生物定向改造和改进。遗传工程科学广义：指以改变生物有机体的性状为目标，采用工程科学技术这样的手段进行遗传物质操作，以改善其质量或创造新品种。 包括细胞工程、染色体工程科学、细胞器工程科学、基因工程等不同技术水平。 狭义：基因工程。爱沙尼亚克朗：无性

2、(繁殖)系或纯系。 指同一祖先通过无性繁殖方式获得的遗传上由同一DNA分子、细胞球或个体组成的特殊生命集团。2 .什么是基因克隆和基本要点？三、举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。a )限制性核酸内切酶和DNA连接酶的发现(标志着DNA重组时代的开始) b )载体的使用C) 1970年，反转录酶和抗逆性标记的发现。4 .基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程爱沙尼亚克朗运载体的研究基因工程接纳体系统的研究研究目的基因基因工程工具酶催化剂的研究对基因工程新技术的研究应用研究：基因工程药物的研究转基因动植物的研究食品化学能在环保等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶催化剂1 .名词

3、解释：限制性核酸内切酶催化剂：识别双链DNA中特殊的核苷酸序列，能够切断各链一个磷酸二酯类化合物键的新脱氧核糖核酸酶催化剂。回文结构：双链DNA中的一段反转重复序列，当该序列的双链打开时，可以形成发卡结构。同尾酶催化剂：来源不同，识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶催化剂。同裂酶催化剂：不同来源的限制酶催化剂可以切断相同的靶序列和相同的识别序列粘性末端： DNA末端的一条链上突出的几个核苷酸可以与另一个具有突出的一条链的DNA末端以互补配对粘接，这样的DNA末端称为粘性末端。平端： DNA片段的末端是平的。有限核酸内切酶的酶活力单位(u ) :在酶催化剂的最佳反应条件下，容积50l中，60分钟

4、内完全切断1 mg ldna所需的酶催化剂量为1个酶活力单位(unit或u )限制性核酸内切酶星活性：限制性核酸内切酶是指在非标准条件下，对与识别序列相似的其他序列也进行剪接反应，出现非特异性DNA片段的现象。链接器：由化学合成的812个核苷酸组成的寡聚核苷酸片断。 以中线为轴两侧对称，其上有一个或几个限制性核酸内切酶催化剂识别序列，酶催化剂切断后产生一定的粘性末端，便于与具有相同粘性末端的其他DNA片段连接。转接器：化学合成的寡聚核苷酸，包含一种或多种限制性核酸内切酶催化剂识别序列。 在其一端或两端具有由1种或2种核酸内切酶切断形成粘性末端.基质部位的显着效果：对同一DNA基质上不同酶催化剂

5、剪接部位的酶催化剂剪接速度不同。激酶：磷酸化核酸末端的羟基化学基。2 .说明限制性核酸内切酶命名原则的要点。用由属名的最初文字和物种名的最初2个文字组成的3文字斜体的缩略词表示寄主菌的物种名和菌株(型)的符号名。 在该菌株(种)中发现的不同酶催化剂依次为日语罗马字号I、II、III等。 例如： Escherichia coli用Eco表示。 第四个文字表示菌株或者株型、变种名，如果酶催化剂存在于质粒上，用大写字母表示非染色体基因。 例如： Hind III是从流感嗜血菌株d株中分离的第三个酶催化剂。 EcoR I表示在Escherichia coli的药剂耐受力r质粒上存在基因。 前三个字符用

6、斜体表示，其他用本来面目表示。 存在于有酶催化剂的特殊菌株中，在3个字符后附加菌株名符号时，名称的最后部分多含有罗马数字，这种特殊菌株显示了发现该酶催化剂的优先顺序。3 .引起限制性核酸内切割酶催化剂星活性的可能因素是什么？如果未正确使用buffer，则有star activity，但star activity是指，如果酶催化剂作用的DNA和序列失去专一性，酶催化剂识别切断位置的能力降低，则类似的序列和错误的序列长度也起作用，产生错误的结果。 因此，DNA以2种限制酶催化剂对云同步进行处理时，选择两个酶催化剂的活性反应为75%以上的restriction buffer，如果没有找到合适的buf

7、fer，首先加入低盐的buffer使一个酶催化剂起作用后，加入高盐buffer4. DNA片段之间的连接方法是什么？具有粘性末端的DNA片段间的连接、具有平末端的DNA片段间的连接、DNA片段末端修饰后的连接、DNA片段链接器后的连接。什么是Klenow酶催化剂？ 有什么样的活性？ 那么，基因工程有什么作用呢？Klenow DNA多聚酶是E.coli DNA polymerase 用蛋白酶(纳豆菌蛋白酶)分解从全酶催化剂中除去5-3外切活性的肽段的大片段肽段，聚合活性和3-5外切活性不受影响。 也称为Klenow片断或E.coli DNA多聚酶I大片断。 53多聚酶35外切酶没有小亚基活性6.

8、 DNA多聚酶、RNA多聚酶、反转录酶、末端转移酶、多核苷酸激酶和碱性磷酸酶有哪些主要特性？ 在基因工程的主要用途是什么？第三章基因工程的运载体1 .名词解释：运载体：是指能够将外来DNA片段(目的基因)携带到接纳体细胞球，具有自我复制能力，使外来DNA片段在接纳体细胞球中扩增表达，不被接纳体细胞的酶系破坏的一种DNA分子。爱沙尼亚克朗运载体：用于在接纳体细胞球中放大目的基因的运载体。 一般分子量低，复制数高，有松弛型复制子。 主要由细菌质粒或其质粒、噬菌体及真核生物细小病毒与DNA重组建构。表达运载体：使目的基因在宿主细胞球中表达的运载体。 能够将重组体DNA导入适当的接纳体细胞球，使所搭载

9、的目的基因能够进行复制、转印及翻译。摆梭载体：被称为基本运载体(bifunctional vector )。 可以在两种不同生物体内复制的载体。 质粒：独立存在于宿主细胞球的染色体外，是指可自我复制的DNA分子。松弛型质粒：拷贝数超过10个的质粒。严格型质粒； 拷贝数从1到数个质粒。结合质粒； 质粒具有的基因功能就是使细胞球有效接触，使质粒DNA从施主细胞球转移成接纳体细胞球。 例如，质粒上的tra基因可使宿主细胞球(大肠菌群)产生菌毛，合成细胞表面物质，促进宿主细胞球和接纳体细胞球结合。质粒的不亲和性显性质粒； 隐性质粒； 质粒的迁移作用；多拷贝质粒； 整合质粒； 梭状质粒； 表达质粒； 探

10、针质粒； pUCl8质粒； pBR322质粒； 溶菌生长； 溶解源生长； 原噬菌体强烈的噬菌体溶原化； 课程载体或粘粒(cosmid) cos部位人工染色体2 .作为工程职业生涯必要的基本条件是什么？试制了质粒载体、噬菌体运载体、科斯运载体、M13单链丝状噬菌体运载体和酵母人工染色体运载体的各自组成特点和在基因工程中的应用。4 .概述质粒的生物科学特性是什么？5 .建构人工质粒的目的是什么？6 .理想质粒载体应具备的条件和建构应遵循的原则是什么7 .以7.-DNA为载体的优点是什么？8 .为什么野生型l噬菌体DNA不适合作为基因工程的运载体？ 怎么改造好呢？第四章目的基因的制备1名词解释：目的

11、基因基因实况拉力赛cDNA实况拉力赛2 .通常分离目的基因的方法是什么？ 其原理分别是什么？3 .克隆复制目的基因的方法是什么？4 .什么是“染色体组文库”？ 建构基因组文库的原理与什么样的基本过程有关？ 遗传学上的基因实况拉力赛和cDNA实况拉力赛有什么不同呢？第五章目的基因的引进和重组子的筛选1名词解释：接纳体细胞球受体状态细胞球转换传递转运蛋白体外组装转换子转化率负筛选正a-互补滤波2 .试制几种常用的转换方法。3 .试制了用运载体的选择标记进行重组子筛选的方法和原理。4 .试制了根据插入顺序的表型特征进行重组子筛选的方法和原理。5.DNA片段之间的连接方法是什么？ 各种连接方式的长处和

12、短处以及DNA重组需要留心哪些问题？6 .选择接纳体细胞球的原则？第六章外源基因的表达1名词解释：融合蛋白分泌蛋白质包涵体外源基因表达系统2 .由大肠菌群表达运载体组成的重要因素是什么？3 .比较大肠菌群、酵母、植物和动物细胞遗传子表达运载体各自的组成特征。4 .照片核基因在大肠菌群中的表达问题和有效的表达对策是什么5 .基因表达产物的检测方法是什么？第七章基因操作的基本技术名词解释：分子杂交探针PCR； 引物； 随机引物； 切口位移热启动间隙翻译Northern印迹Southern印迹2.DNA制造的基本步骤是什么？3 .碱分解法和CTAB法的原理。4 .有多少种凝胶电泳？ 影响琼脂糖凝胶电

13、泳的残奥表是什么？5.PCR的基本原理是什么？ PCR反应体系的构成成分是什么？6 .试制了PCR反应的普计程仪拉姆和残奥表。7.PCR反应引物的设定修订应遵循的原则是什么？8 .试制核酸分子的单孢杂交类型和基本步骤。9 .探针标记的方法是什么？10 .说明southern杂交的原理和方法。11.Northern印影和Southern印影的区别是什么第八章植物基因工程与应用1 .植物的基因转换方法主要有吗？2 .转换基因枪的好处是什么？3 .天然的Ti质粒可以用作表达运载体吗？ 为什么？4 .理想的杀虫剂应该具有什么特性？第九章动物基因工程与应用1名词解释：转基因生物共抑制效应多效胚胎干细胞2

14、 .转基因共机制效应的特征？3 .转基因失活的原因是什么？4 .有动物基因工程的运载体吗？5 .如何筛选转基因多效干细胞？第十章医学基因工程与应用1 .名词解释：胰岛素基因诊断基因治疗2 .基因鉴定的作用？3 .如何进行基因治疗？基因工程原理练习题及其答案一、填空题1 .基因工程是发展于年代的遗传学的一个分支学科。2 .基因工程的两个基本特征是： (1)和(2)；3 .基因克隆的三个基本要点是：一、一、二、三、三、四4 .通过比较用不同组合的限制性核酸内切酶处理一个特定的基因区域而得到的不同大小的片断，可建构表示该区域的各限制性核酸内切酶接点的相互位置的5 .限制性核酸内切酶是根据属性名和物种

15、名的组合原则来命名的，第一个大写字母是_ _ _ _，第二个和第三个字符是_ _ _ _ _，第四个字符被使用6 .某些酶催化剂削减可采取的措施是： (1)采取什么措施？7 .最初分离的限制性内切酶是指用于建构重组体的第一个限制性内切酶，而8 .限制性核酸内切酶BsuRI和haeiii的由来不同，但所识别的数组都是9.DNA多聚酶I的Klenow大片段是用DNA多聚酶I切割而得到的分子量为76kDa的大片段，具有(1)两种酶活力(2)的活性。10 .可以使用双链DNA来防止DNA自环化11.EGTA是络离子鳌合剂。12 .排序酶催化剂是限定的T7 DNA多聚酶，只激活酶催化剂，而不激活酶催化剂。13 .使用“切割平移”(nick translation )法标记DNA的基本原理是：标记DNA的基本原理是：14 .将具有突出单链末端的双链DNA分子变换为平末端的双链形式，通常需要：15 .反转录酶除了催化DNA的合成外，还有其它作用，包括：RNA杂种双链中的会被水解作用定。16 .在基因工程中，根据应用的不同17 .要克隆复制一个基因(DNA片断)，最简单的质粒载体必须包含