植物组织培养技术 (2)ppt课件

1、植物组织培养技术：植物组织培养是指植物器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)的分离。)，组织(如形成层、表皮、皮层、骨髓细胞、胚乳等。)、细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)和原生质体。植物组织培养的理论基础：植物细胞的全能性。植物细胞的全能性是指植物的每个细胞都含有该物种的所有遗传信息，因此具有发育成完整植物的遗传能力。在合适的条件下，任何细胞都可以发育成新的个体。植物组织培养的一些概念外植体：在植物组织培养过程中，外植体从植物中分离出来，接种在培养基上，用于培养的原生质体、细胞、组织和器官成为外植体。愈伤组织：一组无定形的薄壁组织，在植物损伤后的伤口或植物组织培养中的外植体切口处不断增殖。胼

2、胝体能愈合伤口，使表面细胞软木化，起到保护作用；切割植物时，愈伤组织可以形成不定根。植物嫁接时，愈伤组织可以使接穗和砧木愈合；在植物组织培养中，愈伤组织通常能形成不定芽。去分化：这意味着分化的组织回到未分化状态。在组织培养过程中，分化的外植体如茎、叶和花被培养形成愈伤组织并返回未分化状态，这称为去分化。再分化：指在植物组织培养中培养去分化的愈伤组织并诱导其形成新的植物体的过程。4.植物再生是指通过组织培养技术将植物的细胞、组织和器官培养成完整植物的过程。试管苗：指在无菌条件下，在人工培养基上培养植物细胞、组织或器官获得的再生植株。5、原代培养：指组织培养过程中最初的外植体无菌培养阶段。由于第一

3、次外植体来源复杂，携带细菌较多，很难适应培养条件。继代培养：在组织培养过程中，当外植体接种一段时间后，已形成愈伤组织或分化出根、茎、叶、花等的培养物。被重新切割，然后转移到其他媒体，以进一步扩大文化，这是所谓的亚文化。利用组织培养方法可以在相对简单和易于观察的条件下研究细胞、组织或器官的繁殖、生长和分化以及各种外界因素对它们的影响，为解决农业生产和医药生产中的一些问题开辟了广阔的前景。目前，一些重要成果已应用于生产实践，一是无性繁殖系的快速繁殖，如甘蔗为例；最初，每亩使用0.51吨甘蔗种子，通过组培快繁育苗可节约大量甘蔗种子。另一个例子是贝母的繁殖率很低，大约三个月的组织培养分化的鳞茎大小相当

4、于种子繁殖的两年生鳞茎大小。另一个是药物和生物制品的工业化生产。探索天然药物生产的产业化途径是目前药物生产的新方向。用组织培养代替整株植物提取有效成分是可能的。组织培养在药学中的应用虽然历史不长，但发展迅速。它具有以下优点：1 .用组织培养代替原植物培养，可以获得所需的有效成分，达到高产、低成本、节约土地的目的。它可用于生物转化以及二次生物质生产。例如，在烟草组织培养中，可以在替拜因去甲基化后产生吗啡。目前，麦角、灵芝、猴头菌等真菌已在我国成功产业化，高等植物组织培养在产业化中的应用也正在研究中。总之，植物组织培养新技术在中草药应用方面有着无限的前景。它不仅有利于讨论和阐明药用植物的生理、遗传

5、和成分生物合成等一系列理论问题，而且一旦工业化生产问题得到解决，将为疾病的预防和治疗做出巨大贡献。1.培养基1的组成和制备。培养基的组成(1)无机营养素(2)有机物质(3)植物生长刺激物质(4)其他添加剂(5)其他未知的对生长有益的化合物成分，如椰子汁、酵母提取物和麦芽提取物。如果培养基中加入051琼脂，则它是用于静态培养的固体培养基，否则它是用于悬浮培养的液体培养基。不同的植物材料经常需要改变它们的配方。例如，维持生长和诱导细胞分裂和分化的公式是不同的，因此有许多种公式。目前最常用的基础培养基是Ms(murashege和Skoog)，它有利于一般植物组织和细胞的快速生长。10、2种培养基、M

6、S培养基、B5培养基、白色培养基、N6培养基等。3培养基的制备(1)混合培养基中的组分(2)熔化琼脂(3)调节酸碱度至5.8 (4)分装(5)灭菌(6)备用，11。组织培养操作的一般过程。餐具的清洗。培养基的制备和灭菌。接种室和器具的消毒。材料灭菌：70酒精，氯化汞，5接种，6无菌培养，12。材料选择和灭菌方法高等植物的所有种类和部分，从低等藻类到苔藓、蕨类植物和种子植物，都可以用作组织培养的材料。通常，裸子植物使用幼苗、芽和韧皮部细胞，而被子植物使用胚胎、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠。因为在自然条件下植物的表面经常被霉菌和细菌污染，所以这些材料必须消毒。通常，用

7、漂白粉溶液(110)、次氯酸钠溶液(0510)、氯化汞溶液(001)、乙醇(70)或过氧化氢(310)等处理后。用无菌水反复清洗组织，直到它们变干净，然后在无菌室内的固体培养基上快速培养组织。在适当的条件下，一种去分化的组织块，称为胼胝体，可以很快在损伤组织的切口表面生长。十三四。培养条件(1)温度：2028可以满足大多数植物组织的生长需要，其中2627最合适。(2)光：组织培养通常在散射光下进行。光的影响会导致不同的结果。一些植物组织在黑暗的地方生长良好，而另一些在明亮的地方生长良好。然而，当愈伤组织分化成器官时，每天需要一定量的光照来形成芽和根。一些次要物质的形成只取决于三个因素。渗透压：渗透压与植物组织的生长和分化密切相关。渗透压可以通过向培养基中加入盐、蔗糖、甘露醇和乙二醇来调节。一般来说，12个大气压可以促进植物组织的生长。当压力高于2个大气压时，会发生生长障碍，当压力为6个大气压时，植物组织不能存活。(4)酸碱度：一般植物组织生长的最适酸碱度为565。在培养过程中，酸碱度会发生变化，加入磷酸氢盐或二氢盐可以起到稳定作用。(5)通风：悬浮培养中细胞的旺盛生长必须