常用贮液与溶液

1、.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20。10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完

2、全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20。1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水

3、定容到100ml。0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20。1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl26H2O于足量的

4、水中，定容到100ml。100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20。20mg/ml蛋白酶K（proteinase K）：将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20。10mg/mlRnase（无DNase）（DNasefree RNase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH 5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的TrisHC

5、l调pH至7.5，于-20贮存。（配制过程中要戴手套）5mol/L氯化钠（NaCl）：溶解29.2g氯化钠于足量的水中，定容至100ml。10N氢氧化钠（NaOH）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。10SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100ml。100三氯乙酸（TCA）:在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶

6、解。（稀释液应在临用前配制）2.5 Xgal（5-溴-4-氯-3-吲哚-半乳糖苷）：溶解25mg的Xgal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20。100Denhardt试剂（Denhardts regent）100Denhardt试剂（Denhardts regent） 成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量2%聚蔗糖（Ficoll，400型）2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）2%BSA（组分V）水2g2g2g加水至总体积为100ml依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20贮存。10标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA li

7、gase buffer）（粘端、平端连接） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分的用量0.5mol/L Tris-HCl100mmol/L MgCl2100mmol/L DTT2mmol/L ATP5mmol/L 盐酸亚精胺（可选）0.5mg/ml BSA（组分V）（可选）水5ml 1mol/L 贮液1ml 1mol/L 贮液1ml 1mol/L 贮液200ul 100 mmol/L 贮液50ul 1 mmol/L 贮液0.5ml 10 mg/mL 贮液2.25ml将配制好的缓冲液分装成小份，贮存于-20 。100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions）可以购买到100mm

8、ol/L纯dNTPs贮液，-80可贮存至少6个月。10mmol/L dNTP混合液 成分及终浓度配制20ul溶液各成分的用量10mmol/L dATP10mmol/L dCTP10mmol/L dGTP10mmol/L dTTP水2ul 100 mmol/L dATP 贮液2ul 100 mmol/L dCTP 贮液2ul 100 mmol/L dGTP 贮液2ul 100 mmol/L dTTP 贮液12ul20PEG 8000/2.5M NaCl 成分及终浓度配制10ml溶液各成分的用量质量浓度为20聚乙二醇2.5mol/L 氯化钠水20g50ml 5 mol/L 氯化钠 或 14.6g

9、固体氯化钠补足100ml加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中，加水至终体积100ml，用磁力搅拌器搅拌溶解。20SSC 成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量300mmol/L 柠檬酸三钠（二水）3mol/L 氯化钠水88.2g175.3g补足1L溶解柠檬酸三钠（二水）和氯化钠于约0.9L水中，加几滴10N NaOH溶液调pH为7.0，用水补足体积至1L。DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水加100ul DEPC 于 100ml 水中，使DEPC的体积分数为0.1。在37温浴至少12h，然后在15 psi 条件下高压灭菌20min，以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应，不可用DEPC处理Tris缓冲

10、液。甲酰胺（deionized formamide）直接购买或加Dowex XG8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中，用磁力搅拌器轻轻搅拌1h，可去除甲酰胺中的离子。经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份，充氮气于-80贮存（防止氧化）。磷酸缓冲液（phosphate buffer）按照下表所给定的体积，混合1 mol/L 的磷酸二氢钠（单碱）和1mol/L 磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸二氢钠（NaH2PO4H2O）贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠（Na2HPO4）贮液:溶解142g于足量水中使终体

11、积为1L。 1mol/L 磷酸二氢钠（ml）1mol/L 磷酸氢二钠（ml）最终pH值8778508157757356856255655104503903302801231501852252653153754354905506106707206.06.16.26.36.46.56.66.76.86.97.07.17.2TE（用于悬浮和贮存DNA） 成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量10mmol/L TrisHCl1mmol/L EDTA水1ml 1mol/L Tris-HCl（pH7.4-8.0，25）200ul 0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）98.8mlTris缓冲液（

12、Tris-HCl buffer）将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25下）加一定量的浓盐酸（11.6N），用水调整终体积至1L。 浓盐酸的体积（ml）pH8.6142128.53846566671.3769.08.88.68.48.28.07.87.67.47.2二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液电泳缓冲液50Tris-乙酸（TAE）缓冲液 成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱1mol/L 乙酸100 mmol/L EDTA水242g57.1 ml的冰乙酸（17.4 mol/L）200ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）补足1L

13、5Tris-硼酸（TBE）缓冲液 成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱445 mmol/L 硼酸盐10 mmol/L EDTA水54g27.5g 硼酸20 ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0）补足1L染料1溴酚蓝（bromophenol blue）加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。1二甲苯青FF（xylene cyanole FF）溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。10mg/ml的溴化乙锭（ethidium bromide）小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完

14、全溶解。用铝箔包裹装液管，于4贮存。凝胶上样液（gel loading solutions）6碱性凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.3 N 氢氧化钠6 mmol/L EDTA18聚蔗糖（400型）0.15溴甲酚绿0.25二甲苯青FF水300ul 10N 氢氧化钠120ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）1.8g15mg25mg补足到10ml6聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15溴酚蓝0.15二甲苯青FF5 mmol/L EDTA15聚蔗糖（400型）水1.5ml 1溴酚蓝1.5ml 1二甲苯青FF100ul 0.

15、5mol/L EDTA（pH8.0）1.5g补足到10ml6溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.25溴酚蓝0.25二甲苯青FF15聚蔗糖（400型）水2.5ml 1溴酚蓝2.5ml 1二甲苯青FF1.5g补足到10ml6甘油凝胶上样液（4贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15溴酚蓝0.15二甲苯青FF5 mmol/L EDTA50甘油水1.5ml 1溴酚蓝1.5ml 1二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）3ml3.9ml6蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15溴

16、酚蓝0.15二甲苯青FF5 mmol/L EDTA40聚蔗糖水1.5ml 1溴酚蓝1.5ml 1二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0）4g补足到10ml10十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.2溴酚蓝0.2二甲苯青FF200 mmol/L EDTA0.1SDS50甘油水20mg20mg4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)100ul 10 SDS5ml补足到10ml三.常用培养基LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1N NaOH（1ml）调整pH至7.0，

17、再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1 mol/L 氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。分成100ml的小份，高压灭菌。培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。TB培养基将下列

18、组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。冷却到60，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。2YT培养基将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用1N NaOH（1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨20g

19、酵母提取物10g葡萄糖20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。四.常用抗生素氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以25ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以25ug/ml50ug/ml的终

20、浓度添加于生长培养基。甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以12.5ug/ml25ug/ml的终浓度

21、添加于生长培养基。链霉素（streptomycin）（50mg/ml）溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。四环素（tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20贮存。常以10

22、ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。一、常规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO4 9.465g蒸馏水 加至1000ml乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液KH2P04 9.07g蒸馏水 加至1000m1分装在棕色瓶内，于4冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH 甲液ml 乙液mI pH 甲液ml 乙液mI 5.29 5.59 5.91 6.24 6.47 6.64 2.5 5.0 10.0 20.0 3

23、0.0 40.0 97.5 95.0 90.0 80.0 70.0 60.0 6.81 6.98 7.17 7.38 7.73 8.04 50.0 60.0 70.0 80.0 90.0 95.050.040.030.020.010.05.0(二)0.3台盼兰染液 称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。 (三)0.5酚红指示剂 酚红 0.5g0.1N(0.4)NaOH 15ml 双蒸水 85ml 将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入8

24、5ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。 (四)5.6NaHCO3溶液 称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4冰箱保存) (五)10gml秋水仙素 秋水仙素 lOmg生理盐水 100ml装入茶色瓶中，为贮备液，4冰箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。 (六)0.4KCl-0.4柠檬酸钠低渗液 将0.4KCl和0.4柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。 (七)2柠檬酸钠 称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。 （八）0.2次甲基兰染液 称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏

25、水100ml，室温保存。 (九)0.5醋酸洋红(Aceio Carmine)染液 洋红 lg 醋酸 90ml 蒸馏水 110ml 将90ml醋酸加入110ml蒸馏水煮沸，然后将火焰移去，立即加入1克洋红，使之迅速冷却过滤，加饱和氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴，直到呈葡萄酒色。室温保存。加铁使洋红沉淀于组织而着色。此染液室温存放时间越长效果越好，室温保存。 (十)1甲苯胺兰(Toluidine blue) 称取甲苯胺兰1克，加蒸馏水lOOml。 (十一)1/3000中性红染液 取中性红(Neutral red)0.1克，加蒸馏水300ml。室温保存。 (十二)Giemsa染液 1贮备液Giemsa

26、粉 1g纯甘油 66ml甲醇66ml 先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入，放入56温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般两周后使用为好。 2工作液 临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。 (十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液 苏木精 1.0g 乙醇 50ml 醋酸 5ml 甘油 50ml 硫酸铝钾 5g 蒸馏水 50ml 将苏木精溶于少量的乙醇中，再加醋酸并搅拌，以加速其溶解。当苏木精溶解后将甘油加入并摇动容器，同时加入其余的乙醇；硫酸铝钾需研磨并加热，然后溶解于蒸馏水中，将其一滴滴地加入上边的溶液，并不断摇动，

27、此液配好后，将瓶口用纱布盖好，置通风处，经常摇动以加速其成熟，成熟约需4周左右，成熟的染液为深红色。 二、细胞化学和细胞组分分离溶液 (一)M一缓冲液 眯唑(Imidazole) 3.404g KCI 3.7g MgCl26H2O 101.65mg ECTA 380.35mg EDTA 29.224mg 巯基乙醇0.07ml 甘油 297ml 蒸馏水 加至1000ml 用lNHCl调pH至7.2室温保存。 (二)2Triton X一100溶液 量取2mlTriton X一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液，加M缓冲液98ml即可。 （三）0.2考马斯亮兰R-250染液 甲醇 46.5ml 醋酸 7

28、.0ml 考马斯亮兰 0.2g蒸馏水 加至100ml(四)A0.1碱性固绿染液(pH8.08.5) 10.1固绿水溶液 固绿(Fast green) 0.1g 蒸馏水 100ml 20.05Na2C03溶液 Na2C03 50mg蒸馏水 100ml用时按1:1体积混合即可。 B0.1酸性固绿染液(pH2.2) 10.1固绿水溶液。 2molL75盐酸液 盐酸(比重1.19)0.109ml加蒸馏水至100ml 用时按l:1混合。 (五)甲基绿一哌咯宁染液 1.1molL醋酸缓冲液(pH4.8)： (1)醋酸 17ml 蒸馏水 加至200ml (2)醋酸水 13.5g 蒸馏水 加至lOOml用时分

29、别取两液40ml、60ml混匀即可。 2甲基绿一哌咯宁(methyl greenPyrcnln) 5哌咯宁水溶液 6ml 2甲基绿水溶液 6ml 蒸馏水 16ml lmol/L醋酸缓冲液 16ml lmol/L醋酸缓冲液临用时才可加入染液中。 (六)Schiff试剂 将碱性品红0.5克加入lOOml沸水，持续煮沸5分钟，并随时搅拌，待冷却到50时过滤到棕色瓶中，加1N HC11O毫升，冷却至25时加入1克NaHSO3，此时需很好的振荡，避光过夜。次日取出(呈淡黄色)加0.25克活性炭剧烈振荡1分钟。过滤后即得Schiff试剂。避光低温保存。 (七)联苯胺混合液 联苯胺(4.4 Diamino

30、benzidine) 0.2g 95乙醇 lOOml 3过氧化氢 2滴 此液临用时配制。 (八)l番红水溶液 番红(Safranin) 1.0g 蒸馏水 100ml (九)1SDS(十二烷基硫酸钠Sodium dodecyl sulfate,SDS) SDS 10g 45乙醇 100ml (十)1molLTris(三羟甲基氨基甲烷/盐酸缓冲液Trihydroxy methylaminomethane Tris/HCL)pH7.8 Tris 12.114g 蒸馏水 lOOml 先将Tris溶于少量蒸馏水，用HCI调pH至7.8，然后加水至100ml (十一)Ringer Solution氯化钠(

31、冷血动物用065克) 0.9克氯化钾 0.042克氯化钙 0.025克蒸馏水 100ml(十二)淀粉肉汤培养基蛋白 2g淀粉 6g牛肉汤 100ml用10NaHCO3调pH至7.07.2(十三)0.25molL蔗糖一0.003molL氯化钙溶液蔗糖 85.5g氯化钙 0.33g蒸馏水 1000ml(十四)1詹纳斯绿B染液取詹纳斯绿(Janus green B)1.0g Ringer氏液100ml(十五)1刚果红染液刚果红 1g蒸馏水 100ml(十六)Gomori硝酸铅作用液0.05molL醋酸缓冲液(pH5) lOOml0.6醋酸加蒸馏水200ml、取其 42ml醋酸钠1.36g加蒸馏水20

32、0ml，取其158ml共200mlB-甘油磷酸钠 2g醋酸铅 2g5氯化镁 5ml以上作用液在临用时配制，最终在pH55.2，过滤使用。(王世藩 汇编)三、细胞培养和细胞融合溶液(一)0.01molLPBS(磷酸盐缓冲液Phosphate Buffer Saline，PBS)pH7.2。0.2molL磷酸氢二钠液(甲液)：NaH2PO412H2O 35.814g双蒸水 加至500ml0.2molL磷酸二氢钠液(乙液): NaH2PO412H2O 15.601g 双蒸水 加至500ml 取甲液36ml，乙液14ml和NaCl8.2克，加双蒸水至1000ml。混匀待完全溶解分装，经高压灭菌后保存于

33、4冰箱备用。 (二)50PEG(聚乙二醇Polyethyleneglycol mwl500) 称取0.5克PEG，用前放入试管中在酒精灯火焰上熔化，加入等量37予热的MEM培养液，混匀，保温在37水浴中待用。 (三)MEM培养液(含10小牛血清) MEM培养液(日本制药株式会社) 9.4g 双蒸水 1000ml NaHCO3 1.5g 谷氨酰胺(L-glutamin) 0.292g 56灭活30分钟的小牛血清110ml MEM粉末加水溶解后，用NaHCO3调pH到7.1(因在抽滤过程中pH升高0.20.3)，然后加灭活的小牛血清和谷氨酰胺，待完全溶解后，立即用G6抽滤除菌，分装，置4冰箱保存备

34、用。 (四)0.25胰蛋白酶一0.02EDTA混合消化液 胰蛋白酶(Trypsin)粉 0.25g EDTA粉 20.0mg 0.01molL PBS 100ml 先用少量PBS溶解胰蛋白酶，然后将EDTA粉末和剩下的液体加入混合，置37水浴中1小时左右(待彻底溶解，液体呈透明为止)，用G5抽滤，分装置4冰箱中保存。 (五)Hanks液 1原液甲 NaCl 160g KCl 8g MgSO47H2O 2g MgCI26H2O 2g 溶于800ml馏水中。 CaCl2(无水) 2.8g 溶于100ml蒸馏水中。 将两种液体混合后，加水至1000ml用滤纸滤过，再加2ml氯仿防腐，置4冰箱备用。

35、原液乙 Na2HPO412H2O 3.04g KH2PO4 1.2g 葡萄糖 20.0g 溶于800ml蒸馏水中，用滤纸过滤，然后加0.5酚红80ml，再加水至1000ml，最后加入2ml氯仿防腐，置4冰箱备用。 2使用液 甲乙两液各1份，双蒸水18份，混匀分装包扎好瓶口，经10磅15分钟高压灭菌后置4冰箱中保存。使用时用5.6NaHCO3调pH值到所需要求。 (六)1640培养液(含lO小牛血清) RPMI-1640粉 10.39g 双蒸水 加至1000ml 通入适量的C02气体，边通入CO2边慢慢搅拌，使其(呈透明)完全溶解。用NaHCO31.5克调pH值到7.2。 双抗1万u/ml 10

36、ml 灭活小牛血清 110ml 混匀上述液体，立即用G6抽滤除菌分装，置4冰箱备用。 (七)青、链霉素溶液 青霉素钠盐(40万u瓶) 5瓶链霉素(100万u瓶) 2瓶将两者溶于200ml0.9的无菌生理盐水，分装小瓶，-30保存。双抗在培养基中的终浓度为各lOOu为宜。 (八)二甲基亚砜诱导HL-60细胞分化使用的终浓度为1。4。 (九)BrdU溶液(200ug/m1) 用无菌青霉素瓶，在室温下称取1.0mg，在无菌条件下加入灭菌生理盐水9.0ml，溶解，混匀，用黑纸包严，避光置冰箱冰格中保存。最好用时现配。 (十)2SSC溶液用分析天平称取氯化钠17.53克，柠檬酸钠8.82克溶于蒸馏水中，加蒸馏水至1000毫升。 （十一）3琼脂：取琼脂粉3克，加入双蒸水到100毫升，搅匀，高压消毒后(15磅20分钟)，冷藏备用，使用前重新加热煮沸(贮存时间不宜过长)。四、制备电镜标本的溶液(一)2.5戊二醛溶液25戊